GDNF在修复SD大鼠模型脱髓鞘位点中的作用

目的:研究GDNF对三叉神经痛SD大鼠模型中脱髓鞘位点的修复作用.方法:选取30只已经建立成功的SD大鼠三叉神经痛模型,分为治疗组、治疗对照组以及空白组.麻醉后,将大鼠固定在大鼠脑定位仪上,向大鼠左侧三叉神经根注射2％ GDNF10 μL作为治疗组,对照组则在左侧三叉神经根处注射生理盐水10μL,空白组不予处理.解剖游离大鼠三叉神经节,行星形胶质细胞GFAP免疫荧光染色,观察星形胶质细胞在实验组和对照组之间的变化.采用SPSS 13.0软件包对数据进行统计学分析.结果:术后3、7、14、21、28 d,治疗组大鼠较对照组对疼痛反应刺激迟钝,三叉神经节内星形角质细胞较治疗对照组显著减少.结论:三叉神经痛病变多与神经变性、脱髓鞘病变有关.GDNF能够有效参与痛觉过敏的调控过程,并可能通过促进神经纤维修复再生,参与调控三叉神经痛.

七叶皂苷对缺血性脑卒中大鼠血清MBP含量和髓鞘再生的影响

目的:探讨注射用七叶皂苷对缺血性脑卒中大鼠受损脑髓鞘的保护作用.方法:104只成年雄性SD大鼠,随机分为正常对照组(N)、假手术组(C-)、大脑中动脉阻塞模型组(C+)、生理盐水治疗组(E0)、七叶皂苷(1 mg·kg-1,qd)治疗组(E1).用改良的线栓法制备右侧大脑中动脉阻塞(MCAO)的局灶性脑缺血再灌注模型,用Pal-Weigert髓鞘特殊染色法和ELISA法动态观察各组在1,3,5,7 d时脑髓鞘的再生情况和血清髓鞘碱性蛋白(MBP)的含量.结果:在各个时间点,C+组内囊有明显的髓鞘脱失,且血清MBP含量也明显升高(P＜0.05,P＜0.01);E1组在各个时间点的髓鞘脱失程度明显减轻,且血清MBP含量升高的幅度明显低于C+组(P＜0.01).结论:注射用七叶皂苷可能通过较明显激发脑的可塑性潜能及其他机制,促进MCAO大鼠缺血损伤区的髓鞘再生.

少突胶质前体细胞与髓鞘形成及再生的研究进展

脱髓鞘病变可阻碍神经系统电传导,导致功能障碍.髓鞘再生由广泛分布于成体的少突胶质前体细胞(OPC)介导.理解少突胶质细胞生理学,了解髓鞘形成与维稳机制,了解在某些主要神经系统病变(如多发性硬化)CNS髓鞘再生失败与内源性OPC数量、迁移以及形成髓鞘能力的关系,对于改善髓鞘修复策略具有重要意义.

有氧运动改善老年脑小血管病大鼠淡漠行为机制的研究

目的 观察有氧运动对老年脑小血管病(CSVD)大鼠长期慢性脑缺血后出现的淡漠行为的改善作用,并探讨其可能的神经保护机制.方法 48只老年雄性SD大鼠采用完全随机化方法分为正常对照组(不作任何处理)、假手术组(假手术后4周进行游泳锻炼)、脑缺血组[接受双侧颈动脉结扎(BCCAO)处理]和游泳组(BCCAO术后4周进行游泳锻炼)4组.术前对全部正常大鼠进行挖穴和社交试验的测定,术后8周再次进行测定,并对大鼠的淡漠行为进行评估;通过固蓝染色观察大鼠基底节区白质髓鞘脱失情况;利用免疫荧光法测定大鼠基底节区离子钙接头蛋白分子(Iba-1)、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)的表达;利用western blot法测定大鼠基底节区髓鞘碱性蛋白(MBP)、白细胞介素1(IL-1)、IL-6及肿瘤坏死因子(TNF-α)的表达.结果 与正常对照组和假手术组比较,脑缺血组大鼠挖穴和社交能力明显下降(P<0.05),基底节区出现明显的髓鞘脱失,Iba-1、GFAP阳性星形胶质细胞数目均增高(P<0.05),MBP蛋白水平明显降低(P<0.05),IL-1、IL-6、TNF-α 水平明显增高(P<0.05).游泳组较脑缺血组挖穴能力明显上升(P<0.05),Iba-1、GFAP阳性星形胶质细胞数目降低(P<0.05),MBP水平升高(P<0.05),IL-1、IL-6水平降低(P<0.05),TNF-α 水平无明显变化.结论 有氧运动可能是通过减少CSVD大鼠基底节区小胶质细胞活化释放炎症因子,增加髓鞘再生从而改善大鼠慢性脑缺血导致的淡漠行为.

影响多发性硬化髓鞘再生的因素及其机制

多发性硬化(MS)是常见的中枢神经系统(CNS)炎性脱髓鞘性疾病,目前认为MS是一种自身免疫性疾病,是细胞免疫与体液免疫共同参与导致的以脑和脊髓白质损伤为主的疾病.由于在人类成体前脑有大量少突胶质细胞前体细胞(OPC),另外在MS脱髓鞘斑内亦存在OPC,少突胶质细胞及其前体OPC是MS中髓鞘再生的主要来源.目前越来越多的研究认为髓鞘再生是MS治疗中非常有前景的方向,但是要达到有效的、有治疗作用的髓鞘再生,首先必须了解影响髓鞘再生的各种因素,理解控制髓鞘形成和髓鞘再生的确切机制.现就近年来这方面的研究进展综述如下.

皮层下缺血性白质损伤后少突胶质细胞损伤与再生机制

少突胶质细胞是构成脑白质的主要细胞之一.在生理情况下,它们包绕轴突,并为轴突提供营养与支持作用.然而缺血后,少突胶质细胞损伤、发生脱髓鞘会导致白质功能失调,终导致认知功能进展性损害.本文综述了缺血引起的少突胶质细胞损伤的重要因素以及影响髓鞘再生过程的重要分子和相关通路,以期为皮层下缺血性白质损伤后保护白质功能完整性以及长期神经功能恢复寻找有效的治疗靶点.

夹脊电针干预脊髓损伤大鼠再髓鞘化的研究

[目的]观察夹脊电针干预脊髓损伤大鼠髓鞘再生和运动功能恢复作用.[方法]108只SD(Sprague Dawley)肇性大鼠随机分为假手术组、模型组、夹脊电针治疗组(EA组),每组再分为术后1天、7天、14天三个时间点组(n=12).假手术组只切除椎板,其余两组建立脊髓损伤模型后模型组不予治疗,EA组取损伤周围夹脊穴进行电针治疗(疏密波,2/100HZ,1mA),每次20min,每天一次.各组大鼠于各时间点进行BBB(Basso,Beattie,Bresnahan)运动功能评分,应用LFB(Luxol Fast Blue)法进-行髓鞘染色,western blot方法检测髓磷脂碱性蛋白(Myelin Basic Protein,MBP)的表达.[结果]术后1天EA组与模型组BBB评分无明显差异(P=-0.724),7天和14天时EA组大鼠BBB评分逐渐增高,与模型组比具有显著性差异(P＜0.01);LFB髓鞘染色发现脊髓损伤后白质区域有较大面积的染色变浅,间隙变稀疏、排列不均匀,且有大量空泡存在,术后1天模型组大鼠髓鞘平均积分光密度值(Integrated Optical Density,IOD)较假手术组明显降低(P＜0.01),EA组较模型组无明显差异(P=0.945);7天和14天EA组髓鞘含量显著增多,与模型组比较具有显著性差异(P＜0.05或P＜0.01);术后EA组MBP蛋白相对表达逐渐增多,在各时间点较模型组均具有显著性差异(P＜0.01).[结论]夹脊电针可能通过增加MBP的表达,有效促进脊髓损伤后的轴变再髓鞘化,从而进一步促进大鼠神经功能的恢复.

电针对大鼠坐骨神经截断后髓鞘再生修复的影响

目的 观察电针刺激对大鼠坐骨神经截断后髓鞘再生修复的影响,从而探讨电针治疗周围神经损伤的可能机制.方法 将实验大鼠坐骨神经截断后构建神经再生室模型,分别给予5 Hz和100 Hz电针刺激,应用砂罗铬花青染色、HE染色、免疫组化染色和图像分析半定量测定方法,观察电针刺激对大鼠损伤坐骨神经髓鞘结构、神经纤维结构及雪旺细胞S-100蛋白表达的影响.结果 5 Hz及100 Hz电针刺激均能显著促进坐骨神经截断后髓鞘再生,加快神经纤维形态恢复正常,提高雪旺细胞的S-100蛋白的表达水平,其中以5 Hz电针刺激的改善效应较显著.结论 电针刺激对周围神经损伤的治疗效果显著,能明显促进雪旺细胞增殖与髓鞘组织再生,并且其治疗效果与电针作用频率密切相关.

针刺对缺血性脑卒中大鼠血清髓鞘碱性蛋白含量及缺血灶神经髓鞘再生的影响

目的 观察针刺对缺血性脑卒中大鼠受损脑髓鞘的保护作用并探讨其相关机制.方法 共选取100只成年雄性SD大鼠,将其随机分为正常组、模型组、早期针刺组(早期组)及晚期针刺组(晚期组).采用改良的线栓法制备右侧大脑中动脉阻塞(MCAO)的局灶性脑缺血再灌注模型.分别于造模后不同时间点采用"醒脑开窍针刺"法对早期组及晚期组大鼠进行针刺干预.采用Pal-Weigert髓鞘特殊染色法和ELISA法动态观察各组大鼠在实验开始1,3,5,7 d时脑髓鞘的再生情况及血清髓鞘碱性蛋白(MBP)含量的改变.结果 在各不同观察时间点,发现模型组大鼠内囊髓鞘均有明显脱失,且血清MBP含量亦较造模前明显升高;各针刺组大鼠在相应时间点的髓鞘脱失程度均较模型组明显减轻,且血清MBP含量升高的幅度亦显著低于模型组;另外早期组大鼠血清MBP含量达到峰值的时间较晚期组滞后.结论 针刺可能通过激发大鼠脑可塑性潜能从而促进MCAO脑缺血损伤区的神经髓鞘组织再生,并且针刺治疗时间窗对缺血后脑损伤的恢复具有重要影响作用.

间充质干细胞修复周围神经损伤的研究进展

周围神经损伤的修复及支配区功能的恢复,是再生医学面临的难题.间充质干细胞(Mesenchymal stem cells,MSCs)有强大的增殖能力和多向分化潜能,移植后可促进损伤神经修复及功能恢复,其作用的主要机制可能是分泌神经营养因子、促进内源性神经再生和血管再生、促进突触连接和髓鞘再生、自身分化为神经细胞、减少凋亡和减轻炎症等.

039 有效的中枢神经系统髓鞘再生需要T细胞

神经干细胞移植促进鼠脊髓损伤后髓鞘结构的修复

目的观察神经干细胞移植治疗对鼠脊髓损伤后髓鞘结构修复的作用并探讨其作用机制.方法制备鼠T10脊髓损伤模型,体外培养、诱导鼠神经干细胞,定量评价神经干细胞移植对脊髓损伤后髓鞘结构修复的影响.结果与对照组相比,神经干细胞移植组明显地增强了蛋白前脂蛋白信使核糖核酸(PLP mRNA)的表达,促进了髓鞘碱性蛋白(MBP)阳性的髓鞘再生和髓鞘结构的修复.结论神经干细胞移植通过增强髓鞘的再生而促进了脊髓损伤后髓鞘结构的修复,是急性脊髓损伤一种有效的治疗方案.

环己酮二腙致C57BL/6J小鼠脑白质脱髓鞘病变及髓鞘再生的雌雄差异性研究

目的 探讨环己酮二腙(CPZ)诱导C57BL/6J小鼠脑白质脱髓鞘病变及自发性髓鞘再生的雌雄差异.方法 48只C57BL/6J小鼠,雌雄各半,随机选取32只为造模组,16只为对照组(A组),对照组常规饲养,造模组用含CPZ饲料饲养6周,造模成功后再随机分为脱髓鞘组(B组)和髓鞘再生组(C组).A组和B组于6周末行运动协调能力测试后处死取脑组织,C组继续常规饲养6周后行运动协调能力测试后处死取脑组织,所有脑组织均行卢卡斯快蓝(LFB)染色,检测髓鞘碱性蛋白(MBP)和脑细胞凋亡比值.结果 与A组比较,B组运动协调能力及MBP含量明显降低(P＜0.05),脑细胞凋亡比值及脱髓鞘病变程度评分明显增加(P＜0.05).C组运动协调能力及MBP含量较B组显著提高(P＜0.05),脑细胞凋亡比值及脱髓鞘病变程度评分较B组低(P＜0.05).B组组内雌雄比较运动协调能力、脱髓鞘病变程度评分、脑细胞凋亡比值、MBP含量差异均无统计学意义(P＞0.05).C组组内比较,雌组比雄组运动协调能力好、脱髓鞘病变程度评分低及MBP含量高,脑细胞凋亡比值差异无统计学意义(P＞0.05).结论 CPZ致C57BL/6J小鼠脑白质脱髓鞘病变无雌雄差异,在髓鞘再生期,雌性小鼠具有更好的髓鞘再生能力.

siRNA 沉默 MAG 基因对脑出血大鼠的神经保护作用

目的：探讨慢病毒介导的siRNA沉默MAG基因对脑出血大鼠的神经保护作用。方法将SD大鼠45只随机分为3组：siRNA组、PBS组和正常对照组，每组15只。胶原酶诱导建立脑出血模型，据不同组别于模型术后1 d立体定向下进行侧脑室注射慢病毒MAG基因的siRNA和PBS。分别于治疗前1 d和治疗后1、7、14、21 d利用Rotarod运功功能评分检测大鼠神经功能情况，用弥散张力成像技术检测大鼠的FA参数，应用劳克坚牢蓝检测脑损伤区的神经纤维恢复情况。结果 siRNA组的神经功能改善和神经纤维修复较PBS组明显提高（ P＜0.05），siRNA组的rFA值较PBS组明显升高（P＜0.05），劳克坚牢蓝染色结果显示，在血肿周围组织siRNA组较PBS组的神经纤维损害范围缩小。结论 siRNA沉默MAG后较明显提高神经纤维髓鞘再生能力，rFA对脑出血后神经功能恢复的评估有重要意义。

少突胶质细胞前体细胞在双环己酮草酰二腙诱导的脱髓鞘模型中的变化特点

目的 观察神经胶质细胞在双环己酮草酰二腙(cuprizone,CPZ)诱导的脱髓鞘模型中的变化特点,探讨其与髓鞘再生的内在联系.方法 选8周龄C57BL/6雄性小鼠,分为正常组、急性脱髓鞘组及髓鞘再生组.正常组每天饲养正常鼠粮；模型组小鼠饲养含有0.2％ CPZ的混合鼠粮,连续饲养6周；髓鞘再生组在连续喂养6周CPZ鼠粮后,换用正常鼠粮2周.实验过程中通过卢卡斯快蓝染色及透射电镜技术判断脑组织胼胝体区髓鞘脱失及恢复程度,通过免疫组化及免疫荧光技术检测脑内NG2,Olig2和GFAP的表达来评估少突胶质细胞前体细胞及星形胶质细胞的变化特点.结果 与正常组相比,急性脱髓鞘组胼胝体髓鞘脱失明显,Olig2、GFAP表达明显升高(P＜0.05),侧脑室旁外侧隔核(LSD) NG2升高水平较胼胝体区(CC)更为明显(P＜0.05,P＜0.01)；髓鞘再生组髓鞘有所修复,Olig2、GFAP表达仍高于正常组,但较急性脱髓鞘组有一定程度降低(P＜0.05).结论 髓鞘损伤期少突胶质细胞前体细胞不能有效迁移至受损部位,修复期Olig2表达降低,星形胶质细胞持续高水平表达可能是髓鞘修复障碍的影响因素.

黄体酮对大鼠实验性变应性脑脊髓炎的治疗作用

目的 研究黄体酮对实验性变应性脑脊髓炎(experimental allergic encephalomyelitis,EAE)大鼠的治疗作用.方法 采用注射豚鼠脊髓匀浆的方法 制作雄性Wistar大鼠EAE模型.当EAE大鼠出现神经症状后,开始在治疗组腹腔内注射溶于2.5 ml芝麻油中的黄体酮(4 mg·kg~(-1)·d~(-1),连续注射4 d),模型组注射等量的芝麻油.分别对两组大鼠进行运动功能评分和脑组织的电镜检查、LFB染色、锇酸Marchi's染色.染色结果 采用IPP图像分析软件计算光密度(OD)值.结果 治疗组和模型组神经功能评分无明显区别,但是在开始治疗后第6、10、25天,治疗组正常髓鞘的积分光密度值明显高于模型组,而退变髓鞘的积分光密度值明显低于模型组.结论 黄体酮有利于EAE大鼠中枢神经系统的髓鞘再生,促进髓鞘修复.

微RNA调控少突胶质细胞分化及其在脱髓鞘疾病中的研究进展

少突胶质前体细胞(OPC)分化为成熟少突胶质细胞(OL)是中枢神经系统(CNS)神经元轴突髓鞘形成的关键环节.诸多转录因子,如性别决定区Y基因相关高可变区基因10(SOX10)、ZFP191等促进因子和Hes5、SOX6、PDGFRα及ZFP238等抑制因子,在细胞分化过程中发挥着重要的调控作用[1].

少突胶质细胞和脊髓损伤

脊髓损伤(SCI)的过程中伴随着大量少突胶质细胞(OLs)的死亡,而OLs的死亡直接导致有髓神经纤维失去正常的电传导作用,引起脊髓的上下传导功能减弱甚至丧失,终导致机体的感觉及运动功能损伤.因此本综述归纳了SCI后影响OLs死亡的各种微环境,并简述了OLs再生和髓鞘再生在SCI修复中的重要作用.后针对影响OLs死亡和再生的各种因素,对SCI的治疗方式进行了分类总结,并对OLs在SCI治疗中的应用前景作了展望.

睫状神经营养因子对大鼠脑缺血后髓鞘再生的影响

目的:研究睫状神经营养因子(CTNF)对脑缺血大鼠胼胝体髓鞘再生的影响.方法:48只雄性SD大鼠随机分为假手术组(Sham)、双侧颈总动脉结扎(2-VO)组和CTNF治疗组(CTNF).利用2-VO法制备大鼠脑缺血损伤模型,在术后24h内用0.4μg/kg的CTNF或生理盐水分别给予CTNF治疗组、2-VO组和Sham组大鼠尾静脉注射.给药7d后通过神经缺损功能评分(NSS)和转棒实验(Rota-Rod)检测各组大鼠神经功能,电镜观察胼胝体内髓鞘超微结构的变化,通过免疫荧光染色观察少突胶质细胞转录因子2(O1ig-2)的表达,Western Blot检测髓磷脂碱性蛋白(MBP)的表达.结果:与Sham组相比,2-VO组大鼠神经功能显著受损(P＜0.05);电镜下可观察到大鼠胼胝体髓鞘变薄、完整性差;胼胝体部位Olig-2表达显著减少;MBP表达显著下降(P＜0.05).经CTNF治疗后7d的大鼠出现神经功能明显改善(P＜0.05),胼胝体髓鞘结构明显恢复,Olig-2表达明显增加,MBP表达明显增加(P＜0.05).结论:CTNF处理能够改善脑缺血大鼠神经功能,促进髓鞘再生.

银杏叶提取物对实验性自身免疫性脑脊髓炎大鼠的作用研究

目的:建立雌性Wistar大鼠实验性自身免疫性脑脊髓炎(experimental autoimmune encephalomyelitis,EAE)模型,观察银杏叶提取物EGb761腹腔注射对EAE大鼠的可能疗效及神经保护作用和机制.方法:建立Wistar大鼠EAE模型,腹腔注射EGb761(70mg/kg),连续7d,于免疫后第14d和第31d取颈膨大,分别进行HE、LFB和改良BLS染色,观察各组大鼠炎细胞浸润、髓鞘脱失和轴突缺失情况.结果:(1)EGb761组与EAE组相比临床评分明显减低(P＜0.05);(2)HE染色显示:EGb761组炎症浸润与EAE组相比明显减低(P＜0.01);(3)LFB染色显示:EGb761脱髓鞘评分与EAE组相比明显降低(P＜0.05);(4)改良Bielschowsky染色显示:EGb761组高峰期轴突平均缺失而积与EAE组相比明显下降(P＜0.01).结论:EGb761通过减轻炎细胞浸润、促进髓鞘再生和防止轴突缺失,从而对EAE大鼠临床症状的改善起到一定作用.