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电针对不同时程焦虑样行为大鼠海马神经元型一氧化氮合酶的影响
目的：：探讨电针对不同时程———应激中和应激后焦虑样行为大鼠海马神经元型一氧化氮合酶(neuronal nitric oxide synthase,nNOS)的影响。方法：SD 大鼠随机分为正常1组和正常2组、应激1组和应激2组、电针预处理组和电针后处理组,采用足底电击结合孤养的方法制备焦虑样模型。电针预处理组造模同时电针“百会”和“印堂”穴,电针后处理组造模后电针“百会”“印堂”穴,每次均刺激20 min,每日1次,连续治疗7 d。采用高架十字迷宫实验(EPM 评分)评价焦虑样行为,逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和免疫组化方法分别检测各组大鼠海马 CA 1、CA 3区 nNOS mRNA 和蛋白的表达。结果：大鼠足底电击7 d 后开臂/(开臂+闭臂)的时间百分比和次数百分比较正常组显著降低(P <0.01,P <0.05),不同时间电针干预均能够使其显著升高(P <0.05)；应激1组和应激2组大鼠海马 nNOS mRNA 表达高于正常组,电针处理均能降低其表达(P <0.05)；应激1组和2组大鼠海马 CA 1区 nNOS 平均吸光度值显著降低,而 CA 3区显著升高(P <0.01),电针处理可以使其逆转(P <0.01)。结论：电针预处理和后处理对不同时程———应激中和应激后焦虑样行为大鼠均具有明显抗焦虑作用,可能与其对海马内 nNOS 的表达调节相关。
关键词： 足底电击 焦虑 神经元型一氧化氮合酶 电针 高架十字迷宫 -
摩腹疗法对焦虑型睡眠障碍大鼠血清NE、EPI含量的影响
目的:通过检测焦虑型睡眠障碍大鼠血清中去甲肾上腺素(NE)和肾上腺素(EPI)含量,探讨摩腹疗法治疗睡眠障碍的作用机制,为临床应用提供实验依据.方法:将54只大鼠随机分为正常组(12只)、模型组(14只)、药物组(14只)、摩腹组(14只).模型组、药物组及摩腹组采用足底电击法制作焦虑型睡眠障碍模型.造模后,正常组不做任何治疗,模型组、药物组分别给予蒸馏水、艾司唑仑溶液灌胃,摩腹组给予手法治疗,每天1次,每次约15min,10次为1个疗程,共5个疗程.治疗后采用酶联免疫法检测各组大鼠血清中NE、EPI含量.结果:模型组、药物组及摩腹组的大鼠体质量较正常组大鼠增长缓慢,差异具有统计学意义(P＜0.05);大鼠血清中NE及EPI含量,模型组较正常组显著性增高(P＜0.05),药物组和摩腹组较模型组显著性降低(P＜0.05,P＜0.01);药物组和摩腹组之间差异无统计学意义.结论:摩腹和药物治疗均有明显抗焦虑改善睡眠的作用,可能与其对NE及EPI的表达调节有关.
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应激诱发吗啡条件性位置偏爱重现大鼠下丘脑和血浆中神经甾体水平的变化
目的检测吗啡条件性位置偏爱重现大鼠下丘脑和血浆中神经甾体含量的变化.方法建立大鼠对吗啡的条件性位置偏爱(conditioned place preference,CPP),CPP消退后用足底电击(footshock)诱发CPP的重现.将大鼠断头取血并取出下丘脑,制备组织匀浆,采用液-液萃取和固相萃取法提取下丘脑和血浆中的神经甾体,经衍生化后,采用高效液相色谱-质谱法测定神经甾体含量.结果与生理氯化钠溶液对照组相比,吗啡CPP重现组大鼠下丘脑中的PREG和PREGS的水平分别升高36%和60%(P《0.05).与CPP消退组相比,吗啡CPP重现组大鼠下丘脑中的PREGS水平升高60%(P《0.05);吗啡CPP重现组大鼠血浆中的DHEAS水平下降33%(P《0.01).结论足底电击应激诱发吗啡CPP重现时,大鼠下丘脑中的神经甾体PREG、PREGS和DHEAS水平不依赖于血浆中相应的甾体水平变化,其中枢作用可能与应激诱发的吗啡CPP重现行为有关.下丘脑中的PREG和PREGS可能通过其对GABA系统的作用参与足底电击应激诱发的大鼠吗啡CPP重现.
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应激诱发吗啡条件性位置偏爱重现大鼠伏隔核和血浆中神经甾体水平的变化
目的检测吗啡条件性位置偏爱(conditioned place preference,CPP)重现大鼠伏隔核和血浆中神经甾体水平的变化.方法建立大鼠对吗啡的CPP,CPP消退后用足底电击(footshock)诱发CPP的重现.将大鼠断头取血并取出伏隔核,制备组织匀浆,采用液-液萃取和固相萃取法提取脑组织和血浆中的神经甾体,经衍生化后,采用高效液相色谱-质谱法测定神经甾体含量.结果与对照组相比,重现组大鼠伏隔核中的脱氢表雄酮(dehydroepiandrosterone,DHEA)水平升高50%(P＜0.05).与消退组相比,重现组大鼠伏隔核中的别孕烯醇酮(allopregnanolone,AP)水平升高75%(P＜0.05);吗啡CPP重现组大鼠血浆中的脱氢表雄酮硫酸酯(dehydroepiandrosterone sulfate,DHEAS)水平下降33%(P＜0.01).结论足底电击应激所致的CPP重现时,大鼠伏隔核中的DHEA,AP和DHEAS水平的变化不依赖于外周血中相应甾体水平的变化,其中枢作用可能与应激诱发的吗啡CPP重现行为有关.足底电击使伏隔核DHEA和AP水平升高可能是应激诱发吗啡CPP重现的神经机制之一.
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足底电击应激时程对大鼠焦虑样行为的影响
目的 观察足底电击应激时程对大鼠高架十字迷宫及开场实验焦虑样行为的影响.方法 选取成年雄性SD大鼠按照体重分层随机分为对照组和足底电击组,每组12只.足底电击组予以不可逃避性足底电击(0.8 mA,电击10 s,休息20 s,共5 min,1次/d)结合孤养建立大鼠焦虑模型.分别在足底电击7d及14 d后测高架十字迷宫和开场实验,评估大鼠的焦虑行为.结果 7d及14 d足底电击后,足底电击组焦虑样行为增加,差异具有显著意义(P＜0.01),入臂总次数明显低于对照组,运动活性降低.开场实验足底电击组进入中心区次数及中心区逗留时间低于对照组(P＜0.01),运动总距离、直立次数及理毛次数足底电击组均明显低于对照组(P＜0.01),运动探索活性降低.比较7天及14天足底电击组行为学结果,可见随着造模天数的增加,大鼠闭臂时间比及闭臂次数比呈现下降趋势(P＜0.05),焦虑程度降低.开场实验运动总距离、直立次数及理毛次数14 d低于7d,差异具有显著性(P＜0.05),提示大鼠运动探索行为进一步减少,自我关注度降低,抑郁样行为增加.结论 不同时程的足底电击应激导致大鼠焦虑样行为,影响大鼠运动探索活性.随着造模天数的增加,大鼠行为可能从焦虑样向抑郁样改变.足底电击应激焦虑模型造模时程的选择7d优于14 d.
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足底电击诱导树鼩条件恐惧记忆模型的建立及抹除
目的 探索足底电击诱导树鼩条件恐惧记忆模型的建立及抹除方法. 方法 测定在无刺激条件下,树鼩在明暗箱中的活动规律;然后用梯度刺激实验测定合适的足底电击电压;后用合适的电压通过足底电击诱导并建立实验组树鼩条件恐惧记忆模型并抹除其记忆. 结果 正常条件下,树鼩(n=4)在暗箱中的停留时间明显多于明箱中的停留时间(P<0. 01);在两明箱中,足底电压梯度刺激实验显示,随着刺激电压的增加,树鼩(n=6)在有刺激的隔间中的停留时间逐渐减少. 12 V以后树鼩在有刺激隔间与无刺激隔间的停留时间差异有统计学意义[12 V(P <0. 05)、16 V(P <0. 01)、20 V(P<0. 01)];实验组(n=4)暗箱用16 V刺激电压足底电击能够形成明显的恐惧记忆( P<0. 001 ). 在形成明显的恐惧记忆后,在明箱中给予相应的足底电击4 d,实验组(n=4)树鼩在明箱中停留的时间逐渐减少,与对照组比较差异无统计学意义. 结论 树鼩更趋于停留在暗箱中;16 V为较为适合的足底电击电压;条件恐惧记忆能够被诱导并且被新的刺激完全抹除.
关键词： 树鼩 足底电击 条件恐惧记忆形成和抹除 明暗箱 -
放血对焦虑样行为大鼠海马eNOS的影响
目的 探讨放血治疗足底电击致大鼠焦虑样行为的影响及其作用机制.方法 将23只健康雄性SD大鼠分为正常组(7只)和造模组(16只).造模组采用足底电击结合孤养的方法制备焦虑样模型大鼠,正常组不干预;将造模成功的14只大鼠按行为学评分随机分为模型组与放血组,放血组尾静脉放血(15滴,1次),模型组不干预.治疗第7天高架十字迷宫实验评价焦虑样行为,逆转录聚合酶链反应RT-PCR方法和免疫组织化学方法分别检测各组大鼠海马内皮源型一氧化氮合酶(eNOS) mRNA和CA1区蛋白的表达结果.结果 大鼠接受足底电击后在开臂/(开臂+闭臂)的时间百分比和次数百分比显著降低(P＜0.01),放血升高(P＜0.01),升高幅度与正常组相当(P＞0.05).足底电击刺激大鼠后海马内eNOS mRNA和CA1区eNOS蛋白表达降低(P＜0.05),放血反之(P＜0.05),上调结果与正常组无差异(P＞0.05).结论 放血可以改善焦虑样行为,可能是通过调节海马内eNOS起作用的.
关键词： 足底电击 焦虑 放血 内皮源型一氧化氮合酶 -
足底电击加强大鼠凝血功能的研究
目的 研究足底电击对大鼠凝血系统的影响及机制.方法 以SD雄性大鼠足底电击建立模型,分为对照组、电击组、假手术组、去神经电击组和注射抗氧化剂电击组,每组6只大鼠.尾套法测量大鼠的收缩压,凝血分析仪测定血浆凝血酶原时间(pT)、活化部分凝血活酶时间(APTT)及血浆凝血酶(TT),血小板聚集仪测定二磷酸腺苷(ADP)介导血小板聚集和胶原介导血小板聚集,酶联免疫吸附法(ELISA)测定血浆中脂质过氧化产物、谷胱甘肽、皮质酮浓度,观察各项指标的变化.结果 足底电击大鼠7d后,电击组和假手术组收缩压明显高于对照组(P＜0.05).足底电击14d后,电击组和假手术组血浆中谷胱甘肽活性较对照组降低(P＜0.05),电击组和假手术组血浆中脂质过氧化物、皮质酮浓度相对于对照组升高(P＜0.05),与对照组比较,电击组和假手术组PT缩短,TT延长(P＜0.05),电击组和假手术组的ADP和胶原介导血小板聚集率高于对照组(P＜0.05),电击组和假手术组比较差异无统计学意义.与电击组比较,去神经电击组和注射抗氧化剂电击组收缩压、血浆中脂质过氧化物、皮质酮浓度、ADP和胶原介导血小板聚集率降低(P＜0.05).结论 足底电击通过激活肾交感神经和增加氧化应激使大鼠凝血功能增强.
