首页 > 文献资料
-
慢病毒介导SOX9基因转染骨髓间充质细胞中的基因表达
目的:构建携带小鼠SOX9基因的慢病毒载体,体外转染小鼠骨髓间充质细胞,观察小鼠SOX9基因在小鼠间充质细胞中的表达.方法:从含有小鼠SOX9基因的质粒提取总RNA,利用RT-PCR方法扩增目的基因.连接目的基因与经Age-Ⅰ酶切线性化的慢病毒载体,转化感受态的大肠杆菌对质粒进行扩增,筛出阳性转化子,经293T细胞包装,收集病毒后,通过基因测序和限制性核酸内切酶酶切的方法对质粒进行鉴定.Lenti-SOX9-EGFP体外转染小鼠骨髓间充质细胞,利用倒置荧光显微镜观察转染是否成功,并通过流式细胞仪测定转染效率.同时利用RT-PCR和Western Blot检测小鼠SOX9基因的表达.结果:成功构建了携带SOX9基因慢病毒载体,Lenti-SOX9-EGFP能高效转染小鼠骨髓间充质细胞.RT-PCR和Western Blot检测显示经SOX9基因转染的小鼠骨髓间充质细胞表达目的基因产物.结论:利用慢病毒介导SOX9基因成功地转染小鼠骨髓间充质细胞,而且SOX9基因在小鼠骨髓间充质细胞中得到表达,这为SOX9修复软骨损伤的进一步研究奠定了基础.
-
艾滋病的免疫治疗
近来研发的抗艾滋病病毒(HIV)的新药有效地抑制了病毒的复制,部分患者机体免疫功能彻底恢复,症状缓解,存活时间延长.然而抗HIV-1化疗药物也有其缺陷,如产生药物毒性,出现耐药病毒株,部分患者治疗后无法完全抑制病毒复制.因此限制了药物的临床应用和实际效果.免疫治疗越来越受到人们的关注,治疗手段更多,艾滋病病人在治疗中获益良多.
-
IFNγ释放试验评价水痘减毒活疫苗的细胞免疫效果
目的 应用IFNγ释放试验评价水痘减毒活疫苗的细胞免疫效果.方法 利用IFNγELISA定量试剂盒检测不同灭活抗原(热灭活、紫外灭活、甲醛灭活)刺激、不同孵育时间(24、48、72 h)、不同个体(12人接种水痘减毒活疫苗前后)对IFNy释放水平的影响.结果 紫外灭活方式制备的刺激抗原及新鲜全血与刺激抗原共孵育48 h,IFNγ释放水平高;12人接种疫苗后全血中IFNγ释放水平均有不同程度提高,接种前后几何平均值(GMT)分别为6.13和234.75 pg/ml,增长倍数和GMT值在个体间均存在较大差异.结论 IFNγ释放试验操作简便、快速,可定量,适用于水痘疫苗细胞免疫效果的评价.
-
HIV感染或艾滋病的免疫治疗
1 引言艾滋病又称获得性免疫缺陷综合证(acquired immune deficiency syndrome, AIDS),是HIV所引起的致命性慢性传染病.自1978年在美国纽约发现第1例艾滋病患者以来,本病在世界范围内迅速传播蔓延,至令已经在189年国家中流行.
-
鼠肝大部切除术后肠粘膜细胞免疫功能的变化及其与肠道细菌移位的关系
目的探讨鼠肝大部切除术后空、回肠粘膜固有层细胞免疫功能的变化及其与肠道细菌移位的关系.方法将48只SD大鼠随机分为实验组和假手术组,每组24只.实验组切除70%肝脏,假手术组除不切除肝脏外,其余手术步骤同实验组.分别于术后6、12、24和72 h取两组大鼠(n=6)空、回肠粘膜冰冻切片,而后行免疫组化染色,观察不同时相肠粘膜固有层CD3+、CD4+、CD8+T淋巴细胞的数量及肝脏功能的变化.结果实验组术后24 h和72 h,其肠粘膜固有层CD3+、CD4+和CD8+T淋巴细胞的数量较假手术组明显下降(P＜0.05),而两组大鼠术后不同时相的ALT及AST变化,实验组明显高于假手术组(P＜0.05).结论鼠肝大部切除(70%)术后24 h,肠粘膜固有层CD3+、CD4+和CD8+T淋巴细胞数量明显降低.这种细胞免疫功能降低所导致的肠粘膜屏障功能受损,可能是造成肠道细菌移位的原因之一.
-
细胞介导免疫在小鼠抗假丝酵母菌感染中的作用
细胞介导免疫是一个复杂的系列反应过程,当抗原进入机体后,抗原呈递细胞呈递抗原信息给T细胞,使之被激活后变成辅助性T细胞(CD4+).此时,CD4细胞又可分为分泌白细胞介素-2和干扰素-γ的辅助性T细胞(Th1)及分泌白细胞介素-10的辅助性T细胞(Th2).在假丝酵母菌感染时,Th1反应激活中性粒细胞和巨噬细胞,促进宿主抗假丝酵母菌;Th2反应则抑制宿主的抗感染作用.细胞介导免疫在系统性假丝酵母菌感染中的作用一直存在争议,但在口腔黏膜抗假丝酵母菌感染中的作用是肯定的.
-
念珠菌性外阴阴道炎的免疫学研究
念珠菌性外阴阴道炎是一种由白色念珠菌引起的机会性真菌感染,目前认为阴道局部细胞介导免疫在宿主的抗念珠菌机制中发挥重要的作用,局部Th1和Th2细胞的协调作用决定了机体对真菌的易感性.另外,体液免疫和阴道上皮的天然抗念珠菌感染机制可能也发挥了抗念珠菌性阴道感染的作用.针对念珠菌特异抗原制成的疫苗、抗体、细胞因子等可望成为防治念珠菌性外阴阴道炎的新策略.
-
细胞介导免疫和体液免疫在梅毒“血清固定”致病机制中可能具有免疫病理作用
梅毒“血清固定”现象是抗梅毒治疗后患者血清学试验所显示的一种特殊表现.由于梅毒螺旋体不能在人工培养基上生长,无法体外培养,使得临床对“血清固定”现象的研究一直未取得突破性进展.随着对梅毒螺旋体全基因组序列的解析和分子生物学技术新的进展,有望为进一步探讨梅毒“血清固定”现象的致病机制、抗梅毒治疗拓展新的思路.笔者认为,细胞介导免疫和体液免疫在梅毒“血清固定”致病机制中可能具有重要的免疫病理作用.
