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宁波市鄞州区布鲁氏菌病监测结果
布鲁氏菌病(简称布病)是典型的人畜共患疾病[1].其流行地域广泛受威胁人群数量多,是世界性的传染病.我区从80年代至90年代末开展的布病人间监测始终未发现阳性病例.近年来由于西北和北方疫区畜间布病的输入,我区从奶牛中发现了布病.于是我们在接触病牛的职业人群中开展流行病学调查,现将监测结果报告如下.
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布鲁氏菌病2例报告
布鲁氏菌病(以下简称布病)是一种由布鲁氏杆菌引起的人畜共患传染病,其危害大、分布广、隐蔽性强,极易造成误诊.本院2005年收到2例由奶牛感染的布病,现报告如下.
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宁夏回族自治区奶牛感染贝氏柯克斯体的血清流行病学调查
目的 调查宁夏回族自治区奶牛感染贝氏柯克斯体状况.方法 通过酶联免疫吸附试验(ELISA)检出奶牛血清贝氏柯克斯体抗体,总体阳性率为11.37％(103/906).结果 吴忠市和青铜峡市奶牛贝氏柯克斯体抗体阳性率分别为12.28％和10.44％;不同年龄组的抗体阳性率为9.86％至13.21％;未生育过的奶牛抗体阳性率高为11.99％.结果显示地区、年龄和胎次均与贝氏柯克斯体感染无统计学差异(P＞0.05).结论 揭示了宁夏地奶牛贝氏柯克斯体感染普遍存在,对该地区人群健康构成潜在威胁.
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开封地区奶牛隐孢子虫种类及基因型鉴定
目的 探讨开封地区奶牛隐孢子虫感染情况和种类分布.方法 采用饱和蔗糖溶液漂浮法检查新鲜粪便样本的隐孢子虫卵囊,用18S rRNA基因对隐孢子虫进行PCR扩增和限制性片段长度多态性分析;基于gp60基因位点对微小隐孢子虫进行基因亚型鉴定.结果 粪便样本中隐孢子虫阳性率为8.4％ (52/622),不同调查点、年龄段和养殖条件下奶牛隐孢子虫感染率具有统计学意义(P＜0.01).基于18S rRNA基因位点成功扩增出50个样本,分别经Ssp Ⅰ和MboⅡ酶切进行鉴定,发现安氏隐孢子虫为优势虫种,为23份,微小隐孢子虫、牛隐孢子虫和芮氏隐孢子虫分别为5份、12份和6份,4份为牛隐孢子虫和芮氏隐孢子虫混合感染.序列分析显示5个微小隐孢子虫均为人兽共患基因亚型ⅡdA19G1.结论 开封地区奶牛感染人兽共患微小隐孢子虫基因亚型,具有人兽共患传播的可能性.
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哈尔滨一牛源赖氏隐孢子虫分离株的分子鉴定
目的 对来源于哈尔滨某奶牛场一头3月龄奶牛的一个隐孢子虫分离株进行了分子鉴定.选择隐孢子虫基因分型常用的18SrRNA和actin基因位点,设计引物,用巢氏PCR方法分别扩增出约840 bp和1 066bp目的片段.PCR产物经双向测序后用ClustlX、DNAstar和PHLIP软件进行序列分析.结果 表明在18SrRNA基因位点上,此分离株与报道的牛源C.Ryanae分离株(DQ871345、AY587166、EU410344)同源性高,达到100%.在actin位点,此分离株和美国牛源C.Ryanae分离株(EU410345)和隐孢子虫鹿样基因型(AY741309)同源性也为100%.种系发育分析显示所获得的分离株在两个基因位点上均和C.Ryanae处于同一进化分支.这些分析表明此次分离获得的隐孢子虫分离株为C.Ryanae.鉴定结果为研究我国牛源隐孢子虫种类分布以及评价其公共卫生意义提供了重要参考.
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奶牛流产鹦鹉热衣原体ompA基因的克隆与原核表达
目的 表达奶牛源鹦鹉热衣原体ompA基因,探索其作为诊断抗原的可能性.方法 采用套式PCR方法扩增出了奶牛源鹦鹉热衣原体ompA基因完整片段,此扩增产物经过双酶切后克隆到表达载体pGEX-4T-1中,转化大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG诱导表达后采用SDS-PAGE和Western-blot检测重组目的蛋白的表达结果.结果 重组蛋白经奶牛衣原体阳性血清鉴定正确.结论 ompA基因在原核表达系统中得到正确表达.
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我国首株牛源贾第虫的分子鉴定
目的 通过16S及内转录间区(ITS)rDNA基因序列的扩增、克隆以及序列分析,从分子水平对首次在我国分离腚的一株牛源贾第虫进行种类及基因型鉴定.方法 根据GenBank中登录的贾第虫rRNA基因序列,设计引物,采用热启动-降落PCR方法从牛源贾第虫基因组DNA中扩增出目的片段,经TA克隆至pMD18-T载体后测定其核苷酸序列,然后进行序列分析.结果 成功地扩增出该株牛源贾第虫的16S rRNA全基因及rDNA ITS序列,大小为1 715 bp,包括1 447 bp的16S rDNA全长序列和243 bp的ITS间区序列,以及25 bp的26S rDNA基因5末端.序列分析表明此牛源贾第虫为E型蓝氏贾第虫.结论 本研究从分子水平鉴定我国首株牛源贾第虫为蓝氏贾第虫(E型),并首次报道了该虫株的rDNA 16S及ITS序列,为牛源贾第虫的进一步研究奠定了基础.
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抗奶牛γ-干扰素特异性单克隆抗体的研制及其特性
利用IPTG诱导大肠杆菌表达牛-γ干扰素融合蛋白(GST-BovIFN-γ),经聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)后,切取融合蛋白条带作为抗原免疫BALB/c小鼠.利用杂交瘤技术研制抗牛-γ干扰素(BovIFN-γ)的特异性单克隆抗体(mAb).采用间接酶联免疫吸附试验(ELISA)方法筛选、Western-blotting、间接免疫荧光(IFA)方法进行鉴定,筛选出2株分泌特异性抗BovIFN-γ的杂交瘤细胞株,分别命名为BovIFN-γ-4A3和BovIFN-γ-4G5.该单抗可以与重组GST-BovIFN-γ和真核细胞表达的rBovIFN-γ反应,但不能与GST和鸡IFN-γ反应,说明单抗具有很好的特异性.进一步研究表明单抗能中和BovIFN-γ对水泡性口炎病毒(VSV)对牛肾细胞的致病变作用.这些单抗可用于奶牛结核病的监测和防治.
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规模化引种场进口奶牛隐孢子虫种类、基因亚型鉴定及其生物安全评价
目的 为了解进口奶牛寄生的隐孢子虫对引种场污染情况及是否影响隐孢子虫种类和基因型在当地的分布.方法 采用PCR方法检测河南省某规模化引种场奶牛隐孢子虫感染情况.结果 基于18S rRNA基因位点进行PCR检测,奶牛隐孢子虫总感染率为17.8％(90/507),鉴定出4种隐孢子虫,分别为微小隐孢子虫、牛隐孢子虫、芮氏隐孢子虫和安氏隐孢子虫,隐孢子虫感染率随牛年龄增长而呈递减趋势,差异有统计学意义(P＜0.01).断奶前犊牛以微小隐孢子虫为优势感染种,断奶前犊牛腹泻与微小隐孢子虫感染呈正相关性,差异有统计学意义(P＜0.01).基于gp60基因位点,43份微小隐孢子虫阳性样品成功扩增出35份,序列分析显示35个微小隐孢子虫均为人兽共患基因亚型ⅡdA19G1,而奶牛引种地(澳大利亚)的牛源微小隐孢子虫均为Ⅱa亚型家族存在显著不同.结论 证实微小隐孢子虫为犊牛腹泻病原之一,Ⅱd亚型为中国独特分布的微小隐孢子虫亚型,其基因亚型存在地理隔离遗传特征,引种青年牛和成年牛不影响当地重要人兽共患虫种微小隐孢子虫基因亚型分布,从这个角度考虑不具有生物安全重要性.
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牛源贾第虫套式PCR检测方法的建立
目的 建立牛源贾第虫套式PCR检测方法 .方法 根据牛源贾第虫TPI基因序列,设计1对保守引物和1对特异性引物,建立套式PCR检测方法 ;通过阳性参照摸索出该检测方法 的佳反应条件,进行特异性和敏感性试验;并用临床样品进行验证.结果 该套式PCR能特异性地扩增出牛源贾第虫基因组DNA中相应片段,与艾美耳球虫、隐孢子虫、环孢子虫、弓形虫、毛首线虫和纤毛虫等10种相关原虫基因组DNA无交叉反应;低能检测到0.395 fg的阳性参照DNA.结论 建立的套式PCR方法 具有高度的特异性和敏感性,可以用于临床样品的检测.
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长春地区奶牛隐孢子虫感染情况调查
隐孢子虫病是一种人兽共患寄生虫病，其病原为隐孢子虫。本病感染途径是饮食被患病动物排泄物污染的食物和水等。为了解长春地区奶牛隐孢子虫的感染情况，我们于1998年7月至1999年7月对长春地区3个奶牛厂和23个养牛专业户进行了隐孢子虫感染情况的调查，报道如下。1 材料和方法1.1 材料1.1.1 奶牛选择在长春地区随机选取东郊2个奶牛厂90头奶牛；北郊养牛专业户12户，共68头奶牛；西郊7户共66头奶牛；南郊一个奶牛厂、1个养牛户共76头奶牛。1.2 方法1.2.1 粪样采集将待检牛逐头登记，内容包括畜主姓名、奶牛年龄、体况、产奶量与粪便外观等。用一次性手套采集新鲜粪便编号后带回实验室检查。1.2.2 检查方法将10g粪样加入适量饱和硫酸锌溶液搅碎，过60目筛网，2500r／min离心10min后用白金丝环蘸取表面液体，放于载玻片上，后进行抗酸染色镜检，并测量其卵囊大小。1.2.3 结果判定及处理经抗酸染色后卵囊阳性并与隐孢子虫抗酸染色标准阳性片一致者判为奶牛隐孢子虫感染阳性，并对长春东郊、西郊、北郊和南郊奶牛隐孢子虫感染率进行统计学处理。
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奶牛布鲁氏杆菌病的检测
布鲁氏杆菌病是由流产布鲁氏杆菌寄生在细胞内引起的人兽共患病.通过与动物的分泌物、排泄物直接或间接接触,由呼吸道、破损皮肤、消化道引发感染.家畜主要表现为流产、不育的症状,入主要出现高烧、盗汗、心内膜炎、关节炎、骨髓炎等症状.因此,被世界动物卫生组织(OIE)规定强制性报道的疫病.
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奶牛副结核的病例报道
2004年4月份在丹东市元宝区蛤蟆塘镇黑沟村,一成年奶牛出现间歇性腹泻,后变成经常性的顽固性腹泻.粪便稀薄、恶臭,带有气泡,混有粘液和血液,精神不振,产乳量逐渐下降.体温无明显变化,通过直肠检查可以摸到肠粘膜增厚,形成脑回样皱褶.通过实验室皮内变态反应试验,结果阳性.直接采取粪便中的粘液、直肠粘膜刮取物,制成涂片,经萋-尼氏抗酸染色,镜下见大量细小杆菌,确诊为副结核杆菌.
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口蹄疫能传染人吗?
编辑同志：口蹄疫是动物的传染病，不知能否传染人，请予答复为谢!83695部队 蒋洪达蒋洪达同志：口蹄疫俗称口疮、蹄癀、脱靴症，是由口蹄疫病毒引起的急性、热性、高度接触性传染病。主要侵害偶蹄兽，如黄牛(尤其是奶牛)、水牛、牦牛、猪、绵羊、山羊、骆驼及象等。野生偶蹄兽也能感染发病，如黄羊、野牛、野猪、鹿等。该病毒传染性极强，易变异，故型多。
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布氏杆菌病的检验与防治
布鲁氏杆菌病是人畜共患的慢性传染病,简称布氏杆菌病.特别是饲养奶牛、奶山羊、生猪及饮用鲜奶的人易感染.动物中常见的有牛型、猪型、羊型三种,各型对人都有易感性.在同一种内,依其生物学性状不同,羊分为3个生物型,牛分为9个生物型,猪分为4个生物型.近几年又有专家从森林鼠类中分离出森林鼠布氏杆菌;从狗群中分离到犬布氏杆菌.现代生活食用奶质制品量的提高,常将奶和奶制品搬上餐桌或作为饮料,接触机会增多了,因此,更应进一步了解布氏杆菌病的传染方式,扑灭方法和检验必要手段.
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1起布鲁氏菌病疫情的调查
布鲁氏菌病(布病)是由布鲁氏杆菌引起的人畜共患传染病.2003年6月,淄博市周村区北郊镇孙寨村1个奶牛养殖场发生布病疫情,对有关情况进行了调查处理.
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1起发生在奶牛养殖场内的布鲁氏菌病调查
2006年6月,淄博市周村区南郊镇苏孔村奶牛养殖场出现3例布鲁氏菌病(布病)病人,并检出9例布鲁氏杆菌感染者,经流行病学调查和实验室检查,确认是1起由于奶牛感染布鲁氏杆菌而引起的人间布病疫情.
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挤奶人结节1例
患者女,39岁.因左手背紫红色结节伴瘙痒2周来我院就诊.患者家中饲养奶牛.1个月前发现奶牛乳房处有豌豆大暗红色结节,2周前发现自己左手背出现2个暗红色丘疹,逐渐增大,伴瘙痒.无发热.既往身体健康,有病牛接触史.否认药物过敏史.皮肤科检查:左手背中央、尺侧缘见豌豆至蚕豆大的紫红色半球形结节2个,皮疹中央略凹,绕白色环,表面破溃,结痂,周围绕以红晕,质地较硬,有触痛.局部浅表淋巴结无肿大(图1).
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吉林省三种主粮中杂色、构巢曲霉及杂色曲霉素污染状况的研究
杂色曲霉素(简称ST)主要是由杂色曲霉、构巢曲霉产生的一类真菌毒素.几年来,英国、加拿大、美国及我国均有因摄入含ST的饲料导致鸡、奶牛、羊、马等畜禽发生急性中毒而死亡的事件,动物实验表明,ST导致动物发生肝癌、肺癌.
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实时荧光定量PCR检测奶牛类人乙型肝炎病毒DNA
目的:对实时荧光定量PCR测定的188例HBV-DNA结果进行分析,以探讨其临床价值.方法:对188份临床血清标本用ELISA法进行定性检测,并依据乙肝两对半定性结果进行归类分组,再用实时荧光PCR定量检测.同时对ELISA检测HBsAg阴性的血清进行实时荧光PCR定量检测.结果:50份HBsAg(+)、HBeAg(+)、HBcAb(+)标本中有49份HBV-DNA为阳性,阳性率为97.9%,其PCR定量拷贝数(3.23±1.45)×105/ml;20份HBsAg(+)、HBeAg(+)标本有19份HBV-DNA阳性,阳性率达到93.8%,PCR定量拷贝数为(3.65±2.10)×105/ml;24份HBsAg(+)、HBcAb(+)标本中有16份HBV-DNA为阳性,阳性率为67.5%,PCR定量拷贝数(3.23±1.45)×104/ml;94份HBsAg全阴性的标本HBV-DNA阳性18例,阳性率为19%,PCR定量拷贝数为(3.65±1.3)×103.结论:PCR定量测定HBV-DNA可以真实反映奶牛体内乙肝病毒感染和复制及病毒载量情况,特别是HBsAg全阴性的奶牛血清中也能检出18份HBV DNA阳性,阳性率为19%,更有利于临床治疗和疗效观察.
