首页 > 文献资料
-
HPLC测定芩百清肺浓缩丸中次黄嘌呤
目的:建立芩百清肺浓缩丸中次黄嘌呤的高效液相含量测定法.方法:采用HPLC-DAD法,色谱柱Diamonsil C18(4.6 mm×250 mm,5 μm);流动相甲醇-水(2∶98),检测波长254 nm,流速1.0 mL·min-1,柱温30℃.结果:次黄嘌呤在1.94～31.04μg呈良好线性关系,r＝0.999 9,平均回收率为99.14%,RSD 1.28%.结论:方法操作简便、灵敏度高、准确性和重复性好,可作为芩百清肺浓缩丸的质量控制方法.
-
芩百清肺浓缩丸对肺炎支原体感染模型小鼠和细胞肺表皮生长因子表达的影响
目的:探讨芩百清肺浓缩丸修复受损肺上皮细胞的机制.方法:实验分为空白对照组、模型对照组、芩百清肺浓缩丸低剂量组和高剂量组.感染模型对照组和两给药组细胞或小鼠后,两给药组分别给予低剂量和高剂量芩百清肺浓缩丸.利用Reverse Transcription-PCR和Western Blot方法测定各组细胞和小鼠的肺表皮生长因子(EGF)表达.结果:与模型对照组比较,芩百清肺浓缩丸高剂量组和低剂量组都能上调A549细胞和小鼠EGFmRNA和蛋白表达(P＜0.05),但高剂量组作用更加显著.结论:芩百清肺浓缩丸通过提高EGF修复受损肺上皮细胞.
-
芩百清肺浓缩丸对肺炎支原体感染大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞修复作用的研究
通过对转化生长因子-β(TGF-β)和表面活性相关蛋白A(SP-A)给药前后的表达变化及分布,探讨芩百清肺浓缩丸对肺炎支原体(MP)感染大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞的修复作用机制.取60只Wistar大鼠,雌雄各半,体重80～100 g,随机分为6组,每组10只,分别为空白组,模型组,阳性对照组,芩百清肺浓缩丸高、中、低剂量组,采用滴鼻法造模;给药10 d后收集大鼠肺泡灌洗液、血清、左肺及右肺组织中叶,采用免疫组化法检测肺组织中TGF-β及SP-A的蛋白表达及分布;实时荧光定量PCR法测定肺组织中TGF-β,SP-A mRNA的表达;酶联免疫法测定血清及肺泡灌洗液(BALF)中SP-A的含量.通过数据分析可知,芩百清肺浓缩丸能够下调肺组织中TGF-β的表达,增加SP-A的表达,其中TGF-β主要分布于肺间质,SP-A主要分布于AEC-Ⅱ及部分肺泡巨噬细胞内;同时,能够降低血清中SP-A含量,增加BALF中SP-A含量.通过以上结果可知,芩百清肺浓缩丸通过降低TGF-β的表达抑制AEC-Ⅱ发生上皮间质转化,并增加SP-A的表达,恢复肺的正常形态与功能;同时,对MP引起的肺组织毛细血管损伤具有一定的修复作用.
-
芩百清肺浓缩丸药物配伍对黄芩苷吸收的药动学比较
将芩百清肺浓缩丸按中药方剂理论拆方并分组,通过给大鼠灌胃各受试药物组,比较各组黄芩苷药动学参数的变化,阐明芩百组方的合理性及臣药在组方中的重要作用.对大鼠进行分组,分别灌胃君药组(黄芩粗提物,主要为黄芩苷)、与君药组黄芩苷含量相等的臣药组及芩百组(全方组),在28 h内于不同时间点采集大鼠血浆,应用HPLC测定大鼠血浆中的黄芩苷的药时曲线,用3P97实用药动学计算程序对所得数据进行处理.通过对数据分析得出,芩百全方组大鼠血浆中黄芩苷的Cmax是君药组的4倍,AUC是君药组的6倍;芩百全方组大鼠血浆中黄芩苷含量高,臣药组大鼠血浆中黄芩苷含量不及全方组,但明显高于君药组.通过以上药动学结果得知,芩百能明显增加黄芩苷的Cmax和AUC,芩百中的其他中药成分促进了黄芩苷在体内的吸收,表明芩百复方配伍的合理;臣药对黄芩苷的体内吸收有促进作用.
-
基于UPLC-Q-TOF-MS技术的芩百清肺浓缩丸血清药物化学初步研究
应用UPLC-Q-TOF-MS技术和血清药物化学理论分析检测芩百清肺浓缩丸的入血成分.灌胃给予大鼠芩百清肺浓缩丸溶液后,肝门静脉采血,血清经SPE处理,采用ACQUITY UPLC BEH C18色谱柱(2.1 mm×100 mm,1.7μm),0.1%甲酸水(A)-0.1%甲酸乙腈(B)流动相系统进行梯度洗脱,流速0.3 mL·min-1,柱温35℃.通过对比分析体外样品、空白血清及含药血清,同时结合Peakview和Metabolitepilot软件鉴定和表征其血中移行成分,在给药后的大鼠血清中分析鉴定了28个血中移行成分,其中18个原型成分,10个代谢产物.应用UPLC-Q-TOF-MS技术和血清药物化学理论较为全面地阐明了芩百清肺浓缩丸在大鼠血清中的移行成分,为进一步研究其体内代谢过程以及药效物质基础提供了科学依据.
关键词： 芩百清肺浓缩丸 血清药物化学 血中移行成分 UPLC-Q-TOF-MS -
芩百清肺浓缩丸对肺炎支原体感染BALB/c小鼠NLRP3炎性体的影响
目的 探讨芩百清肺浓缩丸对肺炎支原体(MP)感染BALB/c小鼠NLRP3炎性体蛋白表达及IL-1β分泌的影响.方法 实验分为健康对照组、MP模型组、罗红霉素治疗组(50 mg/kg体重)及芩百清肺浓缩丸治疗组(3.3 g/kg体重),每组32只.滴鼻法建立MP感染模型,连续给予相应的药物14 d,健康对照组及模型组给予等容量蒸馏水.分别于给药后7、14、28 d,抽取肺泡灌洗液,ELISA检测IL-1β含量;留取肺组织,Western blot检测NLRP3炎性体相关蛋白表达.结果 MP模型组小鼠造模后7、14 d肺组织NLRP3、ASC、Caspase1蛋白相对表达量分别为0.93±0.07、0.72±0.02、0.65±0.03;0.41±0.04、0.47±0.02、0.43±0.02,与健康对照组0.30±0.02、0.29±0.02、0.31±0.03;0.27±0.03、0.23±0.02、0.34±0.02比较差异有统计学意义(P＜0.01);芩百清肺浓缩丸治疗组给药后7d、14 d NL-RP3、ASC、Caspase-1蛋白相对表达量分别为0.56土0.07、0.52±0.04、0.44±0.02;0.32±0.02、0.33±0.02、0.35±0.02,与模型组比较差异有统计学意义(P＜0.05或P＜0.01).MP模型组小鼠给药后7、14 d肺泡灌洗液IL-1β分别为(69.98±8.97)pg/ml、(49.55土7.60)pg/ml,与健康对照组(37.39±4.28) pg/ml和(36.61±4.31)pg/ml比较,差异有统计学意义(P＜0.01);芩百清肺浓缩丸治疗组给药后7、14 d IL-1p分别为(59.70±8.16)pg/ml和(41.39±3.67)pg/ml与模型组比较差异有统计学意义(P均＜0.05).结论 芩百清肺浓缩丸治疗可下调MP感染小鼠肺组织NLRP3炎性体蛋白的表达及IL-1β分泌.
-
阿奇霉素联合芩百清肺浓缩丸治疗儿童肺炎支原体感染的疗效分析
目的：探讨阿奇霉素联合芩百清肺浓缩丸对儿童肺炎支原体感染的临床疗效。方法2013年1月—2014年6月收治肺炎支原体感染患儿156例，随机分为3组：中药组、西药组、联合组，每组52例。选择同期52例健康体检儿童为健康对照组，西药组口服阿奇霉素，中药组口服芩百清肺浓缩丸，联合组口服阿奇霉素联合芩百清肺浓缩丸。比较4组血清炎性因子（ IL-6、IL-8、TNF-α、）和免疫球蛋白（ IgA 、IgG、IgM）水平。结果治疗2周后，联合组、西药组和中药组有效率分别为98灋．1％（51／52）、84．6％（44／52）、90．4％（47／52），联合组高于西药组、中药组，差异有统计学意义（ P ＜0．05）。与联合组比较，西药组、中药组的咳嗽消失时间、发热消失时间、肺部啰音消失时间、X线胸片浸润影消失时间和住院时间，差异均有统计学意义（ P ＜0．05），而西药组与中药组比较，差异无统计学意义（ P ＞0．05）。治疗前，3个病例组患儿血清炎性因子水平（IL-6、IL-8、TNF-α）明显高于健康对照组（ P ＜0．05）；与治疗前比较，治疗2周后，3组血清炎性因子水平均显著降低（ P ＜0．05）；且治疗后联合组血清炎性因子水平均显著低于西药组和中药组（ P ＜0．05），西药组与中药组比较差异无统计学意义（ P ＞0．05）。治疗前，3个病例组患儿IgA水平显著低于健康对照组，IgG、IgM水平明显高于健康对照组（ P ＜0．05）；与治疗前比较，治疗2周后，3组IgA水平显著增加，IgG、IgM水平明显降低（ P ＜0．05）；且联合组IgA水平明显高于西药组和中药组，IgG、IgM水平显著低于西药组和中药组（ P ＜0．05），西药组与中药组比较差异无统计学意义（ P ＞0．05）。结论芩百清肺浓缩丸联合阿奇霉素治疗儿童肺炎支原体肺炎可降低细胞炎性因子水平、改善免疫功能可较好地改善病情，提高疗效。
-
芩百清肺浓缩丸对肺炎支原体实验动物模型的影响
目的建立实验动物肺炎支原体感染模型,通过对模型药效实验证明芩百清肺浓缩丸具有抗肺炎支原体作用.方法BALB/c小鼠滴鼻法感染肺炎支原体,各组小鼠肺组织冲洗液培养,颜色改变测定各组中肺炎支原体.结果模型组培养基由红变黄,芩百组培养基颜色无变化表明.结论实验动物模型造模成功,芩百清肺浓缩丸具有治疗肺炎支原体感染作用.
-
芩百清肺浓缩丸对MP感染小鼠SP、NK-1R表达的影响
目的:探讨芩百清肺浓缩丸(芩百)对MP感染BALB/c小鼠肺组织SP、NK-1R表达的影响.方法:SPF级雌性BALB/c小鼠40只,随机分为正常组、MP模型组、罗红霉素组及芩百高、低剂量组,每组8只.滴鼻法复制MP感染模型,给予药物,给药后7天,脱颈椎处死小鼠,留取肺组织,ELISA方法检测SP分泌量、荧光实时定量PCR法检测NK-1R mRNA相对表达量.结果:与正常组比较,MP模型组BALF中SP分泌量增加、肺组织NK-1R mRNA相对表达量有升高的趋势;与模型组比较,芩百组均可降低SP分泌量、并有下调NK-1R mRNA相对表达量的趋势.结论:芩百抗MP的作用机制可能与调节肺组织SP及NK-1R mRNA相对表达量有关.
-
芩百清肺浓缩丸对感染后咳嗽大鼠SP、CGRP、NEP的影响
目的:观察芩百清肺浓缩丸(芩百)对感染后咳嗽(PIC)大鼠肺泡灌洗液和血清SP、CGRP及NEP含量及肺组织SP及NEP表达的影响,探讨芩百清肺浓缩丸对感染后咳嗽气道神经源性炎症的干预作用.方法:40只大鼠随机分为正常组、模型组、阳性对照组(孟鲁司特)和中药芩百组.采用烟熏加内毒素(LPS)滴鼻以及辣椒素雾化吸入法建立PIC大鼠模型.各组大鼠给予相应处理10d,观察大鼠3 min咳嗽次数变化,ELISA法检测BALF、血清中SP、CGRP和NEP含量,免疫组化检测肺组织SP、NEP蛋白表达并进行半定量评分,HE染色光镜观察支气管和肺组织病理改变.结果:1)咳嗽次数比较:阳性对照组和中药组咳嗽次数低于模型组,差异有统计学意义(P＜0.05),两药物组间比较,差异无统计学意义(P＞0.05).2) SP、CGRP及NEP含量比较:中药组BALF、血清中SP和CGRP含量均低于模型组和阳性对照组,差异有统计学意义(P＜0.05);中药组BALF中NEP含量接近正常组水平,高于模型组和阳性对照组,差异有统计学意义(P＜0.05);各组血清中NEP含量比较,差异无统计学意义(P＞0.05).3)肺组织SP与NEP免疫组化检测结果显示:与模型组比较,中药组SP表达明显减弱、NEP表达增强,差异有统计学意义(P＜0.05);阳性对照组与模型组比较,差异无统计学意义(P＞0.05).结论:芩百清肺浓缩丸能够降低感染后咳嗽大鼠血清及BALF中SP、CGRP的含量及肺组织SP的表达,提升BALF中NEP的含量及表达至接近正常水平.芩百清肺浓缩丸能够且不仅仅是通过NEP-SP途径来降低感染后咳嗽的气道神经源性炎症.
-
芩白清肺浓缩丸对肺炎支原体作用
目的 观察芩百清肺浓缩丸(黄芩、百部、桔梗、地龙、麦冬、紫菀)对肺炎支原体ATCC 15531的作用.方法 肺炎支原体给予低剂量和高剂量的芩百清肺浓缩丸后,利用Real-time PCR、Reverse Transcription-PCR、WesternBlot方法测定肺炎支原体黏附蛋白P1、P30的表达.结果 与空白组比较,芩百清肺浓缩丸高剂量组和低剂量组都能下调P1、P30 mRNA和P1蛋白表达,但高剂量组作用更加显著.结论 芩百清肺浓缩丸通过降低P1、P30肺炎支原体蛋白的表达,从而妨碍肺炎支原体在呼吁道上皮细胞的定植达到抗肺炎的作用.
-
芩百清肺浓缩丸含药血清抗甲型流感病毒的实验研究
目的:观察芩百清肺浓缩丸(黄芩.百部等)含药血清(S-QQCP)对甲型流感病毒的抑制作用.方法:应用体外细胞培养技术进行MDCK细胞培养,运用血清药理学方法制备芩百清肺浓缩丸(QQCP)低、中、高剂量含药血清,观察S-QQCP对甲型流感病毒生物合成、吸附和直接杀伤的作用.结果:与空白血清比较,QQCP各剂量含药血清对甲型流感病毒生物合成均有抑制作用(P＜0.01);高剂量含药血清对甲型流感病毒吸附MDCK细胞有明显的抑制作用(P＜0.01);各剂量含药血清对甲型流感病毒未显示出直接杀伤作用(P＞0.05).结论:S-QQCP对甲型流感病毒生物合成和吸附有一定的抑制作用.
-
UPLC-Q-TOF-MS法分析芩百清肺浓缩丸中的化学成分
目的 建立超高效液相色谱-质谱联用(UPLC-Q-TOF-MS)法分析芩百清肺浓缩丸(黄芩、百部、紫菀等)中的化学成分.方法 分析采用Acquity UPLC BEH C18色谱柱(2.1 mm×100 mm,1.7 μm);流动相为0.1％甲酸水(A)-0.1％甲酸乙腈(B),梯度洗脱;体积流量0.3 mL/min;柱温35℃.结果 共鉴定出78个化合物,14个来自黄芩,29个来自百部,10个来自麦冬,13个来自紫菀,3个来自桔梗,9个来自地龙.结论 该方法准确快速,可用于芩百清肺浓缩丸的鉴定分析.
关键词： 芩百清肺浓缩丸 化学成分 UPLC-Q-TOF-MS -
芩百清肺浓缩丸对肺炎支原体感染大鼠肺组织中TGF-β和SP-A表达的影响
目的：探讨芩百清肺浓缩丸对肺炎支原体感染大鼠肺组织的修复作用机制。方法60只Wistar大鼠,♀♂各半,体质量80~100 g,随机分为6组,每组10只,分别为空白、模型、阳性对照组,芩百清肺浓缩丸高、中、低剂量组,采用滴鼻法造模；给药10 d后,腹主动脉采血分离血清,测定血清中IL-6、IL-8及TNF-α的水平；采集大鼠左肺及右肺组织中叶,常规HE染色,显微镜下观察肺组织病理改变；实时荧光定量PCR法测定肺组织中转化生长因子-β( TGF-β)及表面活性相关蛋白A ( SP-A) mRNA的表达；免疫印迹法检测肺组织中TGF-β、SP-A的蛋白表达。结果芩百清肺浓缩丸能够明显减轻 MP感染大鼠肺组织炎症,可下调肺组织中TGF-β的表达,并增加SP-A的表达。结论芩百清肺浓缩丸通过降低TGF-β,抑制肺泡Ⅱ型上皮细胞发生上皮间质转化,并增加SP-A的表达,恢复肺的正常形态与功能。
-
芩百清肺浓缩丸含药血清对肺炎支原体感染RAW264.7细胞NLRP3炎性体表达的影响
目的:观察芩百清肺浓缩丸含药血清对肺炎支原体(Mycoplasma pneumoniae,MP)感染RAW264.7细胞NLRP3炎性体及IL-1β的影响.方法:试验分为空白对照组、模型组和芩百清肺浓缩丸含药血清组.常规培养RAW264.7细胞、肺炎支原体菌株,制备芩百清肺浓缩丸含药血清,用10 MOI MP感染RAW264.7细胞,分别于8、16、24 h收集细胞.FQ-PCR检测NLRP3、ASC、Caspase-1 mRNA表达;Western-blot检测NLRP3、ASC、Caspase-1 p20 蛋白表达;ELISA检测细胞上清液IL-1β含量.结果:与空白对照组比较,MP感染RAW264.7细胞后8、16、24 hNLRP3、ASC、Caspase-1 mRNA表达显著上调(P＜0.05或P＜0.01);感染后16、24 h NLRP3、ASC、Caspase-1 p20蛋白表达显著上调(P ＜0.05或P＜0.01);感染后24 h细胞上清液IL-1β含量显著升高(P＜0.01).与模型组比较,芩百清肺浓缩丸含药血清可显著下调MP感染RAW264.7细胞16、24 h NLRP3、ASC、Caspase-1 mRNA的表达(P＜0.05或P＜0.01);显著降低感染后24 h NLRP3、ASC、Caspase-1p20蛋白表达和细胞上清液IL-1β的分泌(P ＜0.05或P＜0.01).结论:芩百清肺浓缩丸抗肺炎支原体作用的机制可能与下调NLRP3炎性体表达有关.
-
基于NEP-SP调控通道分析芩百清肺浓缩丸治疗感染后咳嗽大鼠的量效关系
目的 分析不同剂量芩百清肺浓缩丸治疗感染后咳嗽模型大鼠的量效关系.方法 80只鼠随机分为空白组(予0.9％氯化钠溶液)、模型组(予0.9％氯化钠溶液)、对照组(复方甲氧那明水溶液,相当于成人每次2粒,每日3次)、芩百1组(相当于成人每次3 g,每日2次)、芩百2组(相当于成人每次3 g,每日3次)、芩百3组(相当于成人每次6 g,每日2次)、芩百4组(相当于成人每次6 g,每日3次)、芩百5组(相当于成人每次9 g,每日3次),每组10只.采用烟熏联合LPS鼻腔滴注法及辣椒素雾化吸入诱导模拟革兰阴性菌感染的方法进行造模,造模成功后连续灌胃10d.观察造模后2 min内、给药后第5天和第10天咳嗽次数.采用ELISA法检测BALF和血清中速激肽P物质(SP)和中性内肽酶(NEP)水平.结果 芩百1组血清SP低于对照组,差异有统计学意义(P＜ 0.05).芩百2组咳嗽次数与对照组比较,差异无统计学意义(P＞0.05),BALF中SP低于对照组,NEP高于对照组,差异有统计学意义(P＜0.05).芩百4组的咳嗽次数和SP均低于对照组,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 芩百2组剂量能肺内抗炎和有效止咳,芩百4组剂量能明显缩短咳嗽缓解时间,止咳效果优于复方甲氧那明水溶液.芩百清肺浓缩丸治疗感染后咳嗽作用效果存在正相关的量效关系.
