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粗叶悬钩子石油醚部位化学成分研究
目的:研究粗叶悬钩子石油醚部位的化学成分.方法:采用硅胶柱和Sephadex LH-20柱色谱技术对粗叶悬钩子根和茎的石油醚部位化学成分进行分离纯化,运用波谱分析技术分离鉴定化合物结构.结果:从粗叶悬钩子根和茎中分离得到了9个化合物,分别鉴定为:大黄酚(1)、大黄素甲醚(2)、β-谷甾醇(3)、3-oxotirucalla-7,24-dien-21-oic acid(4)、杨梅二醇(5)、19-α-羟基-3-乙酰乌索酸(6)、N-benzoylphenylalaninyl-N-benzoylphenylalaninate (7)、橙酰胺乙酸酯(8)、蔷薇酸(9).结论:其中,化合物1、4～8为首次从该植物中分离得到,化合物4～8为首次从该属植物中分离得到,罕见地从该属植物中分离到一个四环三萜类化合物(化合物4)和两个苯丙胺类生物碱(化合物7、8).
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大孔吸附树脂分离纯化泽泻中4种三萜类化合物的工艺研究
目的 研究大孔吸附树脂分离纯化泽泻中4种三萜类化合物的工艺.方法 以泽泻中的24-乙酰泽泻醇A、泽泻醇B、23-乙酰泽泻醇B及11-去氧-23-乙酰泽泻醇B为考察指标,采用静态吸附和动态吸附2种方法,优选出对4种三萜类化合物的吸附性能佳的大孔吸附树脂,并对其工艺进行筛选,确定了纯化泽泻4种三萜类化合物的佳工艺参数.结果 D-4020型大孔吸附树脂用于同时分离纯化泽泻中4种三萜类化合物,其吸附洗脱性能良好.佳工艺参数:上样液生药质量浓度为0.50 g/mL,D-4020型树脂与生药量质量比为1∶1(g∶g),分别用蒸馏水、50％(体积分数)乙醇各5 BV洗去杂质,然后用90％(体积分数)乙醇8 BV洗脱,洗脱流速为2 BV/h.收集90％乙醇洗脱液,烘干,所得固体样品中4种三萜类化合物的总质量分数为18.68％.结论 在所确定的工艺条件下,D-4020型大孔吸附树脂用于同时富集泽泻4种三萜类化合物的效果佳.
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油橄榄叶中三萜类成分的提取、分离与结构鉴定
目的:提取、分离油橄榄叶中的三萜类成分并进行结构鉴定,为油橄榄叶的开发利用提供参考.方法:采用硅胶柱色谱等方法对油橄榄叶乙醇提取物的乙酸乙酯部位进行洗脱、柱层析、重结晶,并通过核磁共振等技术对分离出的化合物进行结构鉴定.结果:从油橄榄叶乙酸乙酯部位分离得到6个化合物,分别鉴定为β-香树素、高根二醇、2α,3β-二羟基乌苏烷-12-烯-28-酸(化合物3)、齐墩果酸、Camaldulenic acid(化合物5)、3α-山楂酸.其中,化合物3和化合物5首次从油橄榄叶中分离得到.结论:本研究为油橄榄叶的进一步开发和合理应用提供了试验基础.
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超微粉碎技术对灵芝中三萜类成分溶出的影响
目的:研究超微粉碎技术对灵芝中三萜类成分溶出的影响.方法:采用紫外-可见分光光度法测定灵芝中三萜类成分总提取率,高效液相色谱法(HPLC)测定灵芝中9种三萜类成分(灵芝酸A、灵芝酸B、灵芝酸C、灵芝酸C1、灵芝酸C2、灵芝酸D、灵芝酸E、灵芝酸G、灵芝酸H)含量,比较30、50、80目灵芝普通粉和300目灵芝超微粉中三萜类成分总提取率及9种三萜类成分的含量.结果:30、50、80、300目灵芝粉中三萜类成分总提取率分别为(0.74±0. 08)％、(0. 75±0. 06)％、(0. 78±0. 06)％、(1. 09±0. 10)％ (RSD<2％, n=3);随着灵芝粉目数的增大,三萜类成分含量逐渐增大,其中300目含量大,显著高于灵芝普通粉(P<0. 05).结论:灵芝经超微粉碎后三萜类成分的溶出增加.
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靖州茯苓三萜类成分对A549细胞中Nrf2信号通路的调控机制研究
目的 研究靖州茯苓三萜类成分体外对A549细胞增殖的影响及对核因子E2相关因子2(Nrf2)、谷胱甘肽巯基转移酶(GST)、人醌NADH脱氢酶1(NQO1)蛋白表达的影响.方法 采用噻唑盐比色(MTT)法检测A549细胞的存活率,Western blot法测定Nrf2,GST,NQO1蛋白表达水平.结果 茯苓三萜质量浓度大于15μg/mL时,A549细胞存活率开始降低,且质量浓度与存活率呈负相关;质量浓度大于30μg/mL时,A549细胞中Nrf2,GST,NQO1蛋白表达水平显著升高(P<0.05),且此时质量浓度与蛋白表达水平呈正相关.结论 靖州茯苓三萜类成分可通过下调Nrf2信号通路相关蛋白的表达抑制A549细胞的增殖.
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比色法测定琐琐葡萄中总三萜类成分的含量
琐琐葡萄(Vitis amurensis Pupr)系葡萄科葡萄属植物,主产于新疆、甘肃等省,以果实入药,具有清热、活血和抗病毒等功效[1].参考文献[2]并加以改进,建立了测定琐琐葡萄中总有效成分三萜类成分含量的比色法.该方法简便、快速,可供琐琐葡萄质量控制.
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琐琐葡萄三萜类成分在体外对大鼠免疫性肝损伤的保护作用
目的:观察琐琐葡萄三萜类成分总三萜(VTT)和齐墩果酸(OA)在体外对大鼠免疫性肝损伤的保护作用,为阐明维药琐琐葡萄抗病毒作用的物质基础及其可能的作用机制提供理论依据,也为充分利用新疆葡萄的资源优势开发出安全、价廉、有效的抗病毒民族新药奠定基础.方法:Sprague-Dawley (SD)雄性大鼠6只,随机分为正常组与模型组,模型组采用卡介苗(BCG)整体致敏,脂多糖(LPS)离体攻击法建立大鼠原代肝细胞免疫损伤模型,模型组肝细胞分别加入DMEM培养液配制的200 μg/ml二甲基亚砜溶液(DMSO),5、10、20 μg/ml联苯双酯(DDB)溶液,5、20、80 μg/ml VTT溶液或OA溶液,测定并比较不同培养时间(3、6、12、24 h)各组肝细胞培养上清液中谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)的活性和一氧化氮(NO)的含量.结果:正常大鼠肝细胞上清ALT、AST和NO基本未见改变,BCG+LPS损伤后大鼠肝细胞上清ALT、AST和NO在6、12和24 h较正常大鼠明显升高(P＜0.01),而VTT和OA (5、20、80 μg/ml)均可程度不同地使升高的ALT、AST和NO明显下降(P＜0.01).琐琐葡萄三萜类成分VTT和OA的以上作用与阳性对照药物DDB相似.结论:琐琐葡萄三萜类成分VTT和OA在体外对大鼠免疫性肝损伤具有明显的保护作用.
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UFLC法测定当归芍药散中6个活性成分的含量
目的:建立测定当归芍药散中芍药苷、芍药内酯苷、阿魏酸、24-乙酰泽泻醇A、23-乙酰泽泻醇B和白术内酯Ⅰ含量的超快速液相色谱法.方法:采用Shim-Pack XR-ODS色谱柱(75 mm×3.0 mm,2.2 μm),以0.1％磷酸水溶液(A)-乙腈(B)为流动相,测定芍药苷、芍药内酯苷、阿魏酸、24-乙酰泽泻醇A和23-乙酰泽泻醇B时采用梯度洗脱(0～10 min,14％B;10～11 min,14％B→80％B;11～20 min,80％B),平衡时间为2 min,测定白术内酯Ⅰ时采用等度洗脱(0～6 min,38％B),流速0.4 mL· min-1,柱温为35℃,检测波长为232 nm(芍药苷、芍药内酯苷、阿魏酸、白术内酯Ⅰ)和208 nm(24-乙酰泽泻醇A和23-乙酰泽泻醇B),进样量为5 μL.结果:芍药苷、芍药内酯苷、阿魏酸、24-乙酰泽泻醇A、23-乙酰泽泻醇B和白术内酯Ⅰ质量浓度分别在10～500 μg· mL-1(r=0.999 9)、2～100 μg· mL-1(r=0.999 9)、0.2～10μg·mL-1(r=0.999 9)、2～100 μg·mL-1(r=0.999 7)、2～100 μg·mL-1(r=0.999 3)和0.1～5 μg·mL-1(r=0.999 8)范围内与峰面积呈良好的线性关系;平均回收率(n=9)分别为98.6％,96.8％,97.7％,96.9％,97.0％和97.6％.6批当归芍药散样品测定结果:芍药苷0.91％～0.98％,芍药内酯苷0.20％～0.23％,阿魏酸0.034％～0.052％,24-乙酰泽泻醇A 0.041％～0.043％,23-乙酰泽泻醇B 0.020 1％～0.024 9％,白术内酯Ⅰ 0.002 6％～0.003 0％.结论:该方法可为当归芍药散的质量控制研究提供科学依据.
