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白花丹参及其提取物中总丹酚酸含量测定方法研究
目的:建立并测定白花丹参及其提取物中总丹酚酸的含量.方法:采用亚硝酸钠-硝酸铝配位显色法,以供试品溶液和对照品溶液紫外-可见吸收图谱一致性为依据,比较丹酚酸B、丹参素钠和原儿茶醛作对照品的合理性;对亚硝酸钠-硝酸铝配位显色法中各显色剂加入量、加入显色剂后放置时间进行了考察,进行方法学考察.结果:丹酚酸B更适合作对照品,佳显色条件为:精密加入1％NaNO2 2.5 mL,暗处放置10 min,再精密加入20％ Al(NO3)3 0.25 mL,暗处放置10 min,再精密加入1 mol· L-1 NaOH 4 mL,暗处放置15 min.丹酚酸B在0.028 ～0.309 mg线性关系良好(r=0.999 9),白花丹参和提取物的回收率分别为96.29％,99.53％.5个批次白花丹参总丹酚酸的含量在5.65％ ～6.19％,提取物中总丹酚酸的含量在61.03％ ～61.96％.结论:建立了亚硝酸钠-硝酸铝配位显色法测定白花丹参及其提取物中总丹酚酸含量的方法.
关键词： 白花丹参 提取物 总丹酚酸 含量测定 亚硝酸钠-硝酸铝配位显色法 -
白花丹参提取工艺优选
目的:优选白花丹参提取工艺.方法:以丹酚酸B、总丹酚酸、丹参酮ⅡA及总丹参酮含量为指标,采用高效液相色谱法、紫外-可见分光法及比色法测定指标成分含量,选取乙醇体积分数、提取时间、加醇量、药材粒度和提取次数等为考察因素,采用正交试验法优选白花丹参乙醇回流提取工艺.结果:佳提取工艺为白花丹参切段后用10倍量60％乙醇提取3次,每次2h.结论:优选工艺对白花丹参药材中的脂溶性成分和水溶性成分均有较高提取率,且稳定、节能.
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萃取与工业色谱相结合批量制备丹参中丹酚酸B
中药丹参是唇形科鼠尾草属多年生草本植物丹参的干燥根及根茎[1],作为一种传统中药在我国沿用已久,具有祛瘀止痛,活血通经,清心除烦的功效[2].现代药理研究证明:水溶性丹酚酸类化合物是丹参主要有效成分[3].其中丹酚酸B含量高,约占总丹酚酸的70%,且活性高,具有强烈的清除自由基和抗氧化作用[4].
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总丹酚酸对过氧化氢诱导内皮细胞损伤的抑制作用
目的研究总丹酚酸对过氧化氢(H2O2)诱导血管内皮细胞损伤的影响.方法培养的人脐静脉内皮细胞,用MTT法测定内皮细胞的存活率.用碘化丙啶(PI)染色和TUNEL法测定H2O2诱导内皮细胞的凋亡作用.用荧光法测定半胱天冬酶(caspase)-3的活性.用Fura-2/AM测定内皮细胞内游离钙离子浓度([Ca2+]i).结果 100 μmol*L-1 H2O2可使内皮细胞的存活率下降40.2%,提前1 h给予总丹酚酸10 和100 mg*L-1使存活率分别增加8.4%和28.6%.100 μmol*L-1 H2O2还可引起内皮细胞的凋亡,PI染色的结果显示,H2O2处理内皮细胞18 h后,凋亡率从(7.1%±0.7)%升至(38.1±4.0)%.总丹酚酸100 mg*L-1提前处理内皮细胞1 h,可使内皮细胞凋亡率降至(13.6±0.8)%.TUNEL方法检测结果显示,H2O2处理内皮细胞后,TUNEL染色阳性的细胞从(3.0±0.8)%升至(30.5±2.9)%,总丹酚酸100 mg*L-1可使TUNEL阳性细胞率降至(19.0±3.7)%.此外,H2O2处理细胞后,内皮细胞半胱天冬酶-3的活性增加176%, [Ca2+]i升高101%,而总丹酚酸可以抑制H2O2引起的半胱天冬酶-3活性的增加和[Ca2+]i升高.结论总丹酚酸对H2O2引起的内皮细胞损伤具有明显的抑制作用.
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复方丹参缓释片总丹酚酸体外释放度的研究
目的:建立复方丹参缓释片总丹酚酸释放度的紫外测定方法,评价其释药行为.方法:用紫外分光光度法和释放度试验,以丹酚酸B为对照品,测定复方丹参缓释片中总丹酚酸在不同释放时间的累积释放度.结果:丹酚酸B对照品在286 nm有大吸收,在4.9～98μg/mL范围内与吸收度呈良好的线性关系(A=0.020 7C-0.032 1,r=0.9998),总丹酚酸体外释药行为符合Higuchi方程:Mt/M∞=0.340 8t1/2-0.117,r=0.996 6.结论:本法简便、快速,可用于控制复方丹参缓释片的质量.
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总丹酚酸胃内滞留缓释片的研制
目的:研究总丹酚酸胃内滞留缓释片的制备工艺及释放机理.方法:采用均匀设计优化处方,以羟丙基甲基纤维素为缓释骨架,十八醇为助漂剂,乳糖和微晶纤维素为稀释剂,湿法压片.结果:筛选出体外释放8h,漂浮达12h的优处方,其释放机理符合零级释放动力学.结论:为制备总丹酚酸胃内滞留片提供依据.
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总丹酚酸对脑缺血再灌注损伤的保护作用
目的研究总丹酚酸对脑缺血再灌注损伤的保护作用. 方法采用跳台法和断头法,观察总丹酚酸对缺血再灌注小鼠学习记忆功能障碍的作用和耐缺氧能力的影响.采用化学法,观察总丹酚酸对缺血再灌注小鼠脑组织中超氧化物歧化酶的(SOD)活性,丙二醛(MDA)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH)的含量.结果总丹酚酸改善缺血再灌注引起的学习记忆障碍,缩短被动回避反应时间,减少错误次数,延长潜伏期,延长断头后呼吸持续时间.总丹酚酸亦增强缺血再灌注小鼠脑组织SOD的活性,降低MDA含量,增加GSH的含量.结论总丹酚酸对脑缺血再灌注损伤有显著的保护作用,其机制与总丹酚酸抗氧化作用有关.
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总丹酚酸对脑缺血再灌注损伤的保护作用
目的研究总丹酚酸对脑缺血再灌注损伤的保护作用. 方法采用跳台法和断头法,观察总丹酚酸对缺血再灌注小鼠学习记忆功能障碍的作用和耐缺氧能力的影响.采用化学法,观察总丹酚酸对缺血再灌注小鼠脑组织中超氧化物歧化酶的(SOD)活性,丙二醛(MDA)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH)的含量.结果总丹酚酸改善缺血再灌注引起的学习记忆障碍,缩短被动回避反应时间,减少错误次数,延长潜伏期,延长断头后呼吸持续时间.总丹酚酸亦增强缺血再灌注小鼠脑组织SOD的活性,降低MDA含量,增加GSH的含量.结论总丹酚酸对脑缺血再灌注损伤有明显的保护作用,其机制与总丹酚酸抗氧化作用有关.
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总丹酚酸滴丸的成型工艺研究
目的 将从丹参提取液中分离纯化得到的总丹酚酸制成滴丸,并优选其成型工艺.方法 采用正交试验法.以滴丸的丸重差异、溶散时限、圆整度为评价指标,优选滴丸成型的药液温度、滴头内径、滴距、滴速的工艺条件.结果 佳工艺条件为:药液温度90℃,滴头内径4.5 mm,滴距6 cm,滴速50滴/min.结论 确立的成型工艺可行,所制滴丸符合质量标准.
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丹参总酚酸抑制酪氨酸酶机理研究
目的:研究丹参总酚酸、总丹参酮对酪氨酸酶的抑制作用机理.方法:采用紫外-可见分光光度法测定490nm处酪氨酸酶催化产生的多巴醌的吸光度,并通过Lineweaver-Burk双倒数作图法计算酪氨酸酶的Km和Vm值,考察丹参总酚酸、总丹参酮对酪氨酸酶的抑制作用及作用机理.结果:酪氨酸酶的Km=0.2067mg·ml-1,Vm=0.0222·min-1,总丹参酮在浓度为2mg·m1-1抑制率为0.00％,丹参总酚酸浓度达到10mg·ml-1后Km变大,Vm变小.结论:总丹参酮对酪氨酸酶无抑制作用;丹参总酚酸对酪氨酸酶具有可逆抑制作用,抑制类型属于混合Ⅰ型.
关键词： 丹参 酪氨酸酶 总丹参酮 总丹酚酸 紫外-可见分光光度法
