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藏花素对H2O2诱导氧化应激细胞模型凋亡的影响
目的:文章通过观察藏花素对H2O2诱导的PC12细胞的保护作用和对凋亡的影响,探讨藏花素对阿尔茨海默病(AD)细胞模型保护作用的机制.方法:乳酸脱氢酶(LDH)活性测定观察藏花素对PC12细胞模型的影响,RT-PCR检测PI3K、AKT、Bcl-2和Bax mRNA表达水平,Western blotting检测PI3K、p-AKT、Bcl-2和Bax的蛋白表达.结果:藏花素预保护浓度在0.625μmol/L和5.000μmol/L之间,细胞存活率随着藏花素浓度的升高而升高;藏花素组和维生素E组与模型组相比,PI3K、AKT、Bcl-2 mRNA和蛋白表达增加(P＜0.05),Bax mRNA和蛋白表达降低(P＜0.05).结论:藏花素可能是通过上调PI3K、p-AKT和Bcl-2的表达,从而介导PC12细胞发挥抗氧化和细胞凋亡的生物学功能.
关键词： 藏花素 氧化应激 凋亡 磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B B淋巴细胞瘤-2 -
藏花素对膀胱移行细胞癌T24细胞增殖和凋亡的影响及作用机制研究
目的:研究藏花素(crocin)对膀胱移行细胞癌(TCCB)增殖、凋亡的影响及作用机制.方法:用crocin处理后,四甲基偶氮唑盐(MTT)法分析其对T24细胞增殖的影响;流式细胞术检测T24细胞周期动力学和凋亡诱导率.建立人膀胱癌T24细胞株裸鼠移植瘤动物模型.随机分为对照组和处理组.50 mmol·L-1 crocin处理后,观察其对肿瘤的抑制作用;电镜观察肿瘤组织形态改变;SP-免疫组织化学法分析Bcl-2,Bax,survivin,Cyclin D1蛋白表达.结果:Crocin能明显抑制人膀胱癌T24细胞的生长,并使T24细胞呈明显的G0/G1期阻滞现象;T24细胞早期凋亡率随crocin作用时间的延长而逐渐增加.Crocin对人膀胱癌裸鼠移植瘤的生长具有抑制作用,电镜观察可见细胞凋亡的形态学改变,免疫组化结果显示,经Crocin处理后Bcl-2,survivin,Cyclin D1的表达下调,而Bax的表达上调.结论:Crocin对人膀胱癌T24细胞株的体内外增殖均具有良好的抑制作用,其机制可能是改变细胞周期分布和诱导细胞凋亡,作用机制与下调Bcl-2,survivin,Cyclin D1基因表达和上调Bax的基因表达有关.
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藏花素对膀胱移行细胞癌T24细胞基因表达谱的影响
目的:应用基因表达谱芯片研究藏花素(crocin)对膀胱移行细胞癌T24细胞基因表达谱的影响.方法:MTT法测定藏花素对T24细胞的生长抑制率,选出藏花素佳作用时间和浓度,运用高通量的基因表达谱芯片检测藏花素作用T24细胞前后基因表达谱的变化,筛选差异表达基因.RT-PCR和免疫细胞化学验证上调基因p21WAF1和下调基因cyclinD1.结果:MTT实验结果显示3 mmol·L-1藏花素作用T24细胞48 h的抑制率与对照组相比有显著意义(P<0.05).基因芯片检测发现3 mmol·L-1藏花素作用T24细胞48 h引起该细胞系基因表达谱广泛地改变,其中表达差异2倍以上的基因共836个,这些差异表达基因的功能涉及多个方面,为明显的是与细胞生长调节相关的细胞周期调节基因、细胞凋亡调控基因、DNA复制相关基因等类型.RT-PCR检测其中的细胞周期调节相关基因p21WAF1和cyclinD1,结果与基因芯片相符.同时免疫细胞化学结果从蛋白表达水平上佐证p21WAF1和cyclinD1变化与芯片结果一致.结论:藏花素可以诱导T24细胞基因表达谱广泛的改变,并可能通过调控细胞周期相关基因的表达来抑制T24细胞的增殖.
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栀子中藏花素的药理学和药代动力学研究进展
栀子为茜草科植物栀子(Gardenia Jasminoides Ellis)的干燥成熟果实,具有广泛的用途.藏花素是从栀子果实中提取出来的一类天然色素.实验研究发现藏花素具有多种药理学活性,如神经保护作用、抗肿瘤等.本文综述藏花素的药理学及药代动力学方面的研究进展,以期为藏花素的研发和临床应用提供依据.
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藏花素对氧化应激细胞模型的保护作用及PI3K/Akt通路的影响
目的 通过观察藏花素对H2O2诱导的PC12细胞氧化应激模型的保护作用和对PI3K/Akt的影响,探讨藏花素对氧化应激细胞模型保护作用的机制.方法 细胞分为正常组,模型组,藏花素组,维生素E组.MTT法测定细胞存活率,RT-PCR检测PI3K/Akt mRNA表达水平,Western blot检测PI3K、pAkt的表达.结果 藏花素预保护浓度在0.625 μM和5μM之间,细胞存活率随着藏花素浓度的升高而升高.藏花素组PI3K、Akt与β-actin的mRNA平均光密度值比分别为(0.435±0.044)和(0.375±0.034),与模型组相比表达增加,差异具有统计学意义(P＜0.05).藏花素组PI3K、pAkt与GAPDH的蛋白表达平均光密度值比分别为(0.378±0.038)和(0.386±0.043),与模型组相比表达增加,差异具有统计学意义(P＜0.05).结论 藏花素通过激活了PI3K/Akt通路,从而介导PC12细胞发挥抗氧化和细胞凋亡的生物学功能.
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高效液相色谱法测定食品中栀子黄
目的:建立食品中栀子黄的高效液相色谱测定方法.方法:样品经处理后,采用乙腈、水洗脱,用带有紫外检测器的高效液相色谱仪测定.结果:方法检测限为12.5 ng,相对标准偏差藏花酸为3.2%,藏花素为1.6%.回收率为92.0～98.0%.结论:本方法前处理简便,检测灵敏度高,色谱峰分离效果好,具有良好的稳定性和重现性,适用于食品中栀子黄色素的测定.
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藏花素调控deltaNP63基因抑制膀胱肿瘤细胞生长的研究
目的：探讨藏花素对膀胱肿瘤细胞5637的生长抑制作用及调控机制。方法用3 mmol/L藏花素处理膀胱肿瘤细胞5637细胞株，采用反转录PCR（RT-PCR）检测细胞犱犲犾狋犪犖犘63基因表达的变化，光镜下检测细胞形态改变，流式细胞术检测细胞周期改变，四甲基偶氮唑盐法（MTT）检测细胞增殖改变。结果在一定浓度的藏花素作用下，可见5637细胞生长缓慢，del-taN-P63基因表达下降，G0/G1期细胞数量增加，G2/M期细胞数量减少，MTT检测显示细胞增殖受到抑制。结论藏花素可以抑制膀胱肿瘤细胞增殖和生长，其机制可能与通过下调犱犲犾狋犪犖犘63基因的表达有关。
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藏花素对膀胱移行细胞癌T24细胞VEGF-C表达水平的影响
目的:研究藏花素(Crocin)对膀胱移行细胞癌T24细胞血管内皮生长因子C(Vascular endothelial growth factor,VEGF-C)表达水平的影响.方法:采用MTT法测定不同浓度及不同时间藏花素对T24细胞抑制率,选出佳药物浓度和佳作用时间.用RT-PCR和基因芯片分别检测佳作用时间和佳药物浓度作用前后T24细胞VEGF-C的表达.结果:MTT显示藏花素抑制T24细胞生长具有时间和剂量依从性,3mmol/L藏花素作用48h对T24细胞的抑制率高.RT-PCR显示藏花素组VEGF-C表达明显减少,基因芯片扫描结果中藏花素组VEGF-C表达也显著下调.结论:藏花素抑制T24细胞增殖,可能与下调VEGF-C的表达,从而减少肿瘤血管的生成有关.
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藏花素对膀胱移行细胞癌的增殖抑制作用
目的:研究藏花素(Crocin)对膀胱移行细胞癌是否具有增殖抑制作用.方法:MTT法检测藏花素对T24细胞增殖的影响;应用形态学手段观察细胞形态学的改变;流式细胞术检测肿瘤细胞周期动力学.荷瘤小鼠模型建立,测定藏花素处理后荷瘤小鼠体内抑瘤率.结果:藏花素能明显抑制T24细胞的增殖.并可导致其形态学的改变;藏花素作用后G0/G1期细胞比例逐渐增加,S期和G/M期细胞比例逐渐减少;对照组裸鼠肿瘤的平均体积明显大于藏花素处理组裸鼠肿瘤的平均体积,其差异具有显著性(P<0.05).裸鼠生长抑制率为27.8%.结论:体内外实验证明,藏花素对膀胱移行细胞癌的增殖有抑制作用.
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hepaCAM与藏花素联合应用对前列腺癌细胞增殖的影响
目的:研究肝细胞黏附分子(hepatocyte cell adhesion molecule,hepaCAM)与藏花素联用对前列腺癌(prostate cancer,PCa)细胞DU145增殖的影响.方法:四甲基偶氮唑盐(methylthiazolyldiphenyl-tetrazolium bromide,MTr)法检测细胞增殖效应;克隆形成实验检测细胞克隆形成率;实时荧光定量PCR、Western blot法检测细胞周期调节因子cyclinD1及增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)的表达变化.结果:hepaCAM过表达腺病毒与藏花素单独使用均能抑制PCa细胞DU145的增殖[48 h抑制率分别为(12.0±2.0)％,(22.0±1.0)％],但两者联用比单独应用效果更加明显[48 h抑制率为(54.0±1.0)％,P=0.000].Real-time PCR结果显示,hepaCAM过表达腺病毒及藏花素联合作用与藏花素单独使用相比,cycliuD1 mRNA表达下调(P=0.048);两者联合应用与hepaCAM过表达腺病毒或藏花素单独使用相比,PCNA mRNA水平下调(P=0.047,P=0.006).Western blot结果显示,与单独使用hepaCAM过表达腺病毒或藏花素相比,两者联用组cyclinD1蛋白表达明显降低(P=0.002,P=0.002),同时PCNA蛋白表达也降低(P=0.000,P=0.003).结论:hepaCAM基因过表达腺病毒与藏花素联用对PCa DU 145细胞增殖的抑制有明显的协同作用,作用机制与下调cyclinD1和PCNA的表达有关.
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藏花素促膀胱移行细胞癌T24细胞凋亡的研究
目的 研究藏花素诱导膀胱移行细胞癌T24细胞凋亡的作用及分子机制. 方法 通过MTT比色法分析藏花素对T24细胞增殖的影响;应用光镜观察细胞形态学的改变;Annexin V-FITC/PI荧光双标流式细胞术检测T24细胞周期动力学和凋亡诱导率的影响,RT-PCR 和Western blot检测凋亡相关基因Bcl-2、Bax的表达变化.结果 藏花素能明显抑制T24细胞的增殖,并可导致其形态学的改变;随藏花素作用时间的延长, G0/G1 期细胞比例逐渐增加, S 期和G2/M 期细胞比例逐渐减少,早期凋亡细胞逐渐增多,同时可以上调Bax和下调Bcl-2的基因表达水平.结论 藏花素可明显抑制T24细胞的生长,诱导肿瘤细胞凋亡,可能与Bcl-2和Bax等凋亡调控基因有关.
关键词： 藏花素 膀胱移行细胞癌T24细胞 细胞凋亡 Bcl-2 Bax
