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bcl-xL纳米微粒的制备及其对大鼠心肌细胞的高效转染
目的:制备包载含人类抗凋亡基因bcl-xL的纳米微粒,评价其转染大鼠心肌细胞的能力. 方法:用超声双乳化蒸发法制备包载bcl-xL的纳米微粒,扫描电镜观察纳米的形态和大小,DNase I消化酶试验检测其抗核酸酶能力;转染体外培养的大鼠心肌细胞后RT-PCR和Western-blot法检测基因表达. 结果:制备的纳米微粒直径约200~260 nm,包封完好,性能稳定并对基因有缓释作用;转染1 wk后bcl-xL表达高于对照组(P<0.05). 结论:成功制备包载真核表达质粒的纳米微粒,并能够高效转染大鼠心肌细胞. 纳米微粒是心肌细胞转染较理想的基因载体之一.
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荧光素三元共聚纳米微粒的合成及其荧光性质
目的: 合成苯乙烯(St)、丙烯酰胺(AAm)和丙烯酸(AA)三元共聚荧光高分子微球并对其性质进行研究.方法: 采用无皂乳液聚合法合成三元共聚荧光微球.利用正交设计表L18 (37)考察温度、搅拌速度、pH值、离子强度和反应时间对聚合物性能的影响. 用透射电镜和原子力显微镜观察微球形态及其分布,并测定其粒径大小.用荧光分光光度计测定荧光性质.结果: 在75℃,搅拌速度300 r/min,pH 7.5,0.5 g NaCl ,反应4 h时合成的胶乳呈单分散性,稳定性高,荧光性能好,其荧光大激发波长为551.7 nm,发射波长为554.2 nm.当pH值为6.0时荧光微球的荧光强度强.荧光素缓释实验显示胶乳在4℃下比25℃更稳定.结论: 荧光素三元共聚纳米微粒的荧光性质良好.
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构建人补体膜辅助调节蛋白真核表达载体并通过壳聚糖介导转染NIH 3T3细胞
目的:构建人补体膜辅助调节蛋白(membrane cofactor protein,MCP)真核表达载体并利用壳聚糖(Chitosan)转染小鼠NIH 3T3细胞.方法:应用PCR方法,从MCP-pGEM-T Easy Vector克隆相关的DNA序列,插入到具有相应酶切位点的真核表达载体pSecTag2/HygroB中,构建pSecTag2/HygroB-MCP真核表达质粒,并进行酶切鉴定及序列测定;利用壳聚糖包裹质粒,转染小鼠NIH 3T3细胞,并对转染细胞进行抗MCP免疫组织化学染色.结果:MCP基因大小为1 065 bp,与Genebank中记载的人MCP cDNA序列结果基本一致;抗MCP免疫组织化学染色显示转染细胞胞浆弥漫阳性.结论:成功构建了人MCP真核表达载体并通过壳聚糖介导转染NIH3T3细胞,为进一步探讨及研究转基因肝脏奠定了基础.
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纳米材料及其检测技术
由于许多独有的特性,作为新世纪三大主导技术之一的纳米技术,在电子、材料、生物、信息、化工等许多领域表现出了诱人的应用前景,甚至对社会发展将产生深远影响.特别是以纳米微粒作为添加剂而形成的纳米复合材料,在提升传统产业竞争力方面表现出了广阔的前景,事实上,纳米颗粒在涂料、抗菌清洁、橡胶、塑料、陶瓷等领域的使用已经产品化并显示出了明显的优势.
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白蛋白纳米粒在荷瘤裸鼠体内的分布和代谢研究
目的 本研究探讨牛血清白蛋白纳米微粒的制备及其在荷人乳腺癌SK-BR3细胞的裸鼠体内的分布和代谢.方法 采用超声乳化-化学交联制备白蛋白纳米颗粒,通过125I进行标记探讨其在荷人乳腺癌SK-BR3细胞裸鼠体内的分布和代谢.结果 制备的牛血清白蛋白纳米颗粒平均粒径为34nm,90%的粒径小于38nm.牛血清白蛋白纳米颗粒与牛血清白蛋白在肿瘤、肝、胃、肠等器官的分布有显著的靶向性,差异有统计学意义(P<0.05).在脑的分布均较少,没有发现明显的靶向作用.结论 牛血清白蛋白纳米颗粒具有对肿瘤、肝、胃肠等器官的良好器官靶向性,同时具备成为中枢神经系统给药的比较理想的载体的条件.