Caveolin-1mRNA及蛋白在食管鳞状细胞癌中的表达及其与Cyclin-D1、P16的相关性研究

目的 研究小窝蛋白1(Caveolin-1)mRNA及蛋白在食管癌及癌旁正常食管黏膜中的表达及其意义,进一步探讨Caveolin-1与食管癌组织中细胞周期素-D1 (Cyclin-D1)、P16及临床病理学指标的相关性.方法 收集食管鳞癌及对应癌旁组织标本90例,分别采用RT-PCR、免疫组化方法检测Caveolin-1 mRNA及蛋白的表达情况,进一步分析Caveolin-1与食管癌组织中Cyclin-D1、P16及临床病理学指标的相关性.结果 Caveolin-1 mRNA及蛋白在食管癌中的表达均高于食管癌旁组织中的表达(P＜0.05),且C aveolin-1 mRNA的表达与Cyclin-D1和淋巴结转移有关.结论 Caveolin-1在食管癌中高表达,可能与食管鳞癌的发生、发展以及浸润转移有关.

尿路上皮癌中Caveolin-1的表达与ERK1/2的相关性研究

目的 观察Caveolin-1在正常尿路上皮组织及尿路上皮癌中的表达情况,初步探讨其与ERK信号通路的关系.方法 (1)免疫组织化学及RT-PCR检测正常尿路上皮组织及尿路上皮癌中Caveolin-1蛋白及mRNA的表达情况.(2) Westem blot方法检测Caveolin-1阳性组及阴性组中ERK1/2及P-ERK1/2的表达.结果 尿路上皮癌中Caveolin-1蛋白及mRNA的表达显著高于正常尿路上皮组织,两组相比差异具有显著统计学意义(P＜0.05);Western blot结果显示,Caveolin-1阳性组P-ERK1/2的相对表达量显著高于阴性组,而ERK1/2表达在两组之间差异无统计学意义.结论 Caveolin-1的表达上调可能通过激活ERK信号通路而发挥作用,有望为尿路上皮癌的预防和治疗提供新的靶点.

Caveolin-1在食管鳞癌中的表达及其意义

目的 研究正常食管黏膜和食管鳞癌组织中Caveolin-1蛋白的表达,探讨其与食管鳞癌发生发展的关系.方法 采用免疫组织化学法分析50例食管鳞癌组织及10例正常食管黏膜中Caveolin-1表达情况.结果 食管鳞癌中Caveolin-1的表达高于正常食管黏膜组织,Caveolin-1的表达与食管癌的淋巴结转移密切相关(P＜0.05),而与年龄、肿瘤大径、浸润深度无关(P＞0.05).结论 Caveolin-1促进了食管癌的生长和转移,可作为食管癌的预后评估因子.

Caveolin-1蛋白在银杏内酯B保护大鼠脑缺血再灌注损伤中的作用

目的 研究银杏内酯B(ginkgolidesB,GB)在减轻大鼠脑缺血再灌注(Ischemia/Reperfusion,I/R)损伤时质膜微囊结构蛋白-1(caveolin-1,Cav-1)的变化及这种变化对GB减轻大鼠脑缺血再灌注损伤的影响.方法 2017年2—7月,徐州医科大学麻醉学重点实验室,将240～260 g的S-D雄性大鼠48只随机分为4组,每组12只:假手术+生理盐水组(Sham+NS);假手术+GB组(Sham+GB);缺血再灌注+生理盐水组(I/R+NS);缺血再灌注+GB组(I/R+GB).采用Western blot检测各组Cav-1蛋白的表达变化.采用Zea Longa 5分制对各组大鼠进行行为学评分.结果 Western blot检测显示缺血再灌注组大鼠大脑中动脉支配区域Cav-1表达较假手术组明显降低[I/R+NS vs Sham+NS、Sham+GB,(0.744±0.4090)vs(1.8804±0.2780),(1.890±0.29180)(P<0.001)];灌胃给药GB 3 d能明显抑制Cav-1的减少[I/R+GB vs I/R+NS(1.3507±0.2143)vs(0.744±0.4090)(P<0.01)].神经行为学评分显示:GB不能逆转在大脑中动脉支配脑区行立体定位注射针对Cav-1的siRNA组大鼠神经行为学评分的升高[I/R+GB+siRNA-SC vs I/R+GB+siRNA-Cav-1,I/R+NS+siRNA-Cav-1,I/R+NS+siRNA-SC(1.5605±0.3125)vs(3.769±0.2345),(3.864±0.3542),(3.674±0.2789)(P<0.001)].结论 Cav-1在灌胃给GB的脑缺血再灌注组大鼠大脑中动脉支配脑区表达较对照组升高,在相应脑区干扰Cav-1后,GB不能改善缺血再灌注组大鼠的神经行为学表现,说明Cav-1蛋白在银杏内酯B保护大鼠脑缺血再灌注损伤中起重要作用.

固本健脑法对Alzheimer病模型大鼠海马区树突棘及P-tau的影响

目的:本课题在成功建立AD大鼠模型基础上,观察固本健脑法治疗AD的作用及机制.方法:12月龄衰老大鼠行脑立体定位手术于双侧海马注射Aβ1-42,制备复合AD大鼠模型,并用固本健脑液灌胃干预,以安理申组为对照.4周后,高尔基染色法观察大鼠海马区神经元树突棘形态及密度;Western Blot法检测大鼠海马区Caveolin-1、P-tau(Thr231、Ser396位点)蛋白表达改变.结果:高尔基染色法结果显示:固本健脑液高、低剂量组神经元细胞及树突棘形态明显改善,数目及密度显著增加(P＜0.01).Western Blot法检测结果显示:固本健脑液高、低剂量组可使Caveolin-1的表达不同程度的升高,而tau磷酸化水平下降,差异有显著性(P＜0.01).结论:固本健脑法能显著改善AD大鼠海马神经元树突棘形态及密度,显著提高AD模型大鼠海马区Caveolin-1的表达,抑制tau蛋白过度磷酸化.

caveolin-1、GPR30和vimentin在乳头状甲状腺癌中的表达

甲状腺癌是发病率较高的内分泌系统恶性肿瘤,其中80％为乳头状甲状腺癌(papillary thyroid carcinoma,PTC)[1].PTC具有分化高、恶性度低、预后较好的特点.但在分化程度较高的PTC中,仍有50％发生颈部淋巴结转移或远处转移,严重影响预后.甲状腺癌的发病与患者的激素水平密切相关,雌激素在甲状腺癌的发病中扮演重要角色.小窝蛋白(caveolin-1)是一种整合膜蛋白,研究表明,caveolin-1能够与雌激素受体G蛋白耦联受体30(G-protein-coupled receptor 30,GPR30)相互作用,参与肿瘤细胞的增殖、迁移、侵袭过程[2].

Caveolin-1在慢性肝炎、肝硬化和肝癌组织中的表达

目的:Caveolin-1作为候选抑癌基因,在多种肿瘤均有异常表达,本研究探讨Caveolin-1在乙型肝炎、肝硬化和肝癌组织的表达特点.方法:采用免疫组织化学(immunohistochemistry,IHC)染色,在完全相同的实验条件下检测22例乙型肝炎、16例肝硬化和11例肝癌组织中Caveolin-1的表达状况.结果:免疫组化结果显示Caveolin-1在乙型肝炎、肝硬化和肝癌组织的阳性率分别为77.3%、68.8%和27.3%;肝癌与其它两组间(慢性肝炎、肝硬化)的阳性率有显著性差异(x2=-2.868,P=0.007;x2=-2.296,P=0.03).肝硬化较肝炎的Caveolin-1阳性率低,但无统计学意义(x2=-0.512,P=0.612).结论:Caveolin-1在肝细胞中的表达水平随着肝癌的发生呈进行性下调乃至缺失.

Caveolin-1与组织再生

Caveolae (little cave)是1953年Palade在电子显微镜下发现的细颈瓶状的细胞膜内陷结构,当时命名为plasmalemmal vesicles.1955年,Yamada将其命名为Caveolae[1].该结构含有胆固醇、鞘磷脂(sphingomylin)、鞘糖脂(glycosphingolipids),是一个不溶于去垢剂的膜区域,约50～100 nm,可单个或葡萄串状成簇出现,或由多个Caveolae融合而成长管状结构,并以Caveolin蛋白为标志分子[2].

鱼蛇逍遥汤对宫颈癌Hela细胞增殖及Caveolin-1表达水平的影响

目的 该研究目的在于探讨鱼蛇逍遥汤对人类宫颈癌Hela细胞增殖的影响及其分子机制.方法 取处于对数生长期的人类宫颈癌Hela细胞,分为对照组、鱼蛇逍遥汤处理组.以不同浓度鱼蛇逍遥汤(2,5,10,20 μM)处理48 h,MTT方法检测细胞增殖,Western blot、反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测窖蛋白(Caveolin-1)的蛋白和mRNA表达.结果 鱼蛇逍遥汤处理组细胞活性较对照组明显降低,差异有统计学意义(P＜0.05).同时,鱼蛇逍遥汤各处理组Hela细胞的Caveolin-1蛋白和mRNA表达明显降低.结论 鱼蛇逍遥汤对于人类宫颈癌Hela细胞增殖具有抑制作用,其可能是通过抑制宫颈癌细胞Caveolin-1的表达来实现的.

Caveolin-1对胃癌细胞系MGC803细胞生长的影响

目的:研究Caveolin-1对胃癌细胞增殖、分化的影响,以探讨Caveolin-1作为基因治疗的候选基因的可能性.方法:运用基因重组技术,将人全长Caveolin-1基因稳定转染胃癌细胞系MGC803,建立能稳定表达Caveolin-1的胃癌细胞系,同时建立空载体转染的MGC803细胞系作为空白对照,另用PD98059处理48 h作为阳性对照.以重组细胞系作为研究模型,通过免疫细胞化学及Western blot确认Caveolin-1蛋白在被转染细胞中的稳定表达.运用光学显微镜观察转染前后MGC803细胞形态的变化;另运用细胞计数检测了Caveolin-1对MGC803细胞生长的影响,流式细胞术分析了Caveolin-1对MGC803细胞周期分布的影响.结果:Western blot结果显示,基因转染组及阳性对照组细胞中Vaveolin-1表达比未处理组细胞中明显增强(P＜0.001,q值分别为23.067与13.3376),且基因转染组中Caveolin-1表达比阳性对照组更强(P＜0.001,q=9.7294);基因转染后的MGC803细胞形态发生明显变化,由异形性明显、核大、胞质很少、核分裂明显变得形态较一致、胞质丰富、核/质比明显变小、核分裂相很少见;基因转染后细胞的群体倍增时间明显延长,由46.67 h延长至65.46 h,差异有统计学意义(P＜0.05,q=4.8695);基因转染后细胞周期分布发生了明显变化,G0/G1期细胞数明显增多(P＜0.01,q=9.1824),S期细胞数明显减少(P＜0.01,q=7.827),G2/M期细胞数无明显变化(P＞0.05),Caveolin-1基因转染组与阳性对照组间细胞周期分布的变化也有明显差异性(其中G0/G1期P＜0.01,q=4.9323;S期P＜0.05,q=3.3295).结论:Caveolin-1既能诱导MGC803细胞分化又能将其阻滞于G0/G1期,通过延长细胞群体倍增时间而抑制胃癌细胞的体外增殖.

胃癌组织中Caveolin-1,nm23及MMP-2的表达及其意义

目的:探讨正常胃黏膜、不典型增生胃黏膜及胃癌组织中Caveolin-1,nm23及MMP-2蛋白的表达.方法:应用免疫组化S-P法检测25例正常胃黏膜,65例不典型增生胃黏膜及71例胃癌组织中的Caveolin-1,nm23及MMP-2蛋白的表达.结果:正常胃黏膜、不典型增生胃黏膜及胃癌组织中,Caveolin-1和nm23阳性率有递减趋势,组间差异性有统计学意义(x2=106.303,P＜0.05;X2=64.254,P＜0.05);MMP-2蛋白阳性表达率有递增趋势,组间差异性有统计学意义(X2=35.247,P＜0.05).Fisher精确概率检验显示在不同的浸润深度和淋巴结转移Caveolin-1,nm23及MMP-2阳性表达率组内差异有统计学意义(P＜0.05),而在年龄、性别和脉管侵犯组内差异无统计学意义(P＞0.05).Spearman等级相关分析显示Caveolin-1与nm23表达呈正相关(r=0.957,P＜0.05),Caveolin-1与MMP-2表达呈负相关(r=-0.975,P＜0.05),nm23与MMP-2表达呈负相关(r=-0.987,P＜0.05).结论:Caveolin-1与nm23的缺失以及MMP-2的过表达可能是胃癌发生、发展以及浸润转移的重要原因之一,Caveolin-1可以作为一种候选抑癌基因.

siRNA沉默caveolin-1基因对胰腺癌细胞迁徙和侵袭影响及其机制的探讨

目的:探讨caveolin-1对胰腺癌细胞PANC1在体外迁徙和侵袭的影响并初步探讨其机制.方法:用siRNA技术抑制胰腺癌PANC1细胞中caveolin-1的表达,构建细胞株PANC1/siRNA作为实验组,空载体细胞株PANC1/shuffle 作为对照组.蛋白质印迹法检测细胞内caveolin-1和MMP-7的表达.流式细胞仪分析细胞失巢凋亡指数,黏附实验检测细胞黏附定植的能力,侵袭小室实验检测细胞迁徙和侵袭的能力.结果:PANC1/siRNA细胞的caveolin-1表达被抑制,表达量低于PANC1/shuffle和PANC1细胞株(P＜0.01)；PANC1/siRNA细胞的抗失巢凋亡的能力强于PANC1/shuffle细胞,凋亡指数分别为((9.24±1.61)％vs (17.32±1.79)％,P＜0.01),PANC1/siRNA的黏附能力强于PANCl/shuffle(0.867±0.153 vs 0.523±0.072,P＜0.01)；PANC1/siRNA迁入膜内的细胞数多于PANC1/shuffle (142.6±24.35 vs 106.5±10.81,P＜0.05),PANC1/siRNA细胞侵袭破坏基质胶进入膜内的能力强于PANC1/shuffle (88.9±8.07 vs61.3±7.23,P＜0.01)；PANC1/siRNA中MMP-7表达量明显高于PANC1/shuffle(P＜0.01).结论:caveolin-1通过对MMP-7的调控抑制PANC1细胞的体外迁徙和侵袭.

miR-103与胃癌多药耐药作用机制探讨

目的 既往研究肿瘤耐药均集中在DNA水平,而DNA又影响mRNA及蛋白质表达.但是mRNA与编码蛋白质的表达并不成比例,而非编码RNA恰好能解释两者之间的不平衡.非编码RNA即微小RNA(microRNA,miRNA),是一类内源性短链非编码小分子核糖核苷酸,长度约18~25个核糖核苷酸,是转录后基因表达调节的关键分子,参与胃癌的发生发展.本研究旨在探讨miR-103在胃癌多药耐药中作用及其分子机制.方法 miRNA芯片筛选SGC7901/ADR及SGC7901细胞差异表达miRNA,应用qRT-PCR验证miR-103表达;将miR-103的拟似物及抑制物分别转染SGC7901/ADR及SGC7901细胞,MTT法检测转染前后对多柔比星敏感性变化;蛋白质印迹法检测miR-103对caveolin-1表达的影响.结果 miR-103在SGC7901/ADR细胞中表达(0.32±0.04)显著低于SGC7901细胞.miR-103拟似物转染SGC7901/ADR细胞后对多柔比星的敏感性较对照组显著提高,IC50由(18.83±0.32) μg/mL下降到(4.54±0.29) μg/mL,t=1.04,P<0.05;而miR-103抑制物转染SGC7901细胞后对多柔比星的敏感性显著降低,IC50由(1.65±0.03) μg/mL上升到(15.27±0.26) μg/mL,t=1.25,P<0.05.miR-103靶向作用于caveolin-1的3''-UTR,并在转录后水平负向调控caveolin-1表达.结论 miR-103通过靶向负调控caveolin-1表达,增加SGC7901/ADR细胞对多柔比星敏感性,从而逆转胃癌多药耐药.

喉鳞癌组织Caveolin-1表达及其与HPV病毒感染相关性的研究

目的:研究喉鳞状细胞癌组织 Caveolin-1的表达情况及其与HPV感染之间关系,探讨两者对喉鳞癌生物学行为的影响.方法:分别应用免疫组织化学和原位杂交方法检测喉鳞癌组织中Caveolin-1蛋白及HPV感染的情况,统计学分析两者之间的相关性.结果:Caveolin-1蛋白在喉鳞癌和癌旁组织中的表达率分别为71.2%和9.5%,两者表达差异有统计学意义,P＜0.05;Caveolin-1蛋白的表达程度与病理类型、TNM分期、转移相关.喉鳞癌组织HPV感染阳性率为55.1%,癌旁组织为21.4%,两者表达差异有统计学意义,P＜0.05;HPV感染与患者年龄、病理类型、TNM分期和转移均无关.喉鳞癌Caveolin-1表达与HPV感染之间呈正相关表达(r=0.62,x2=10.40,P＜0.05).结论:喉鳞癌组织Caveolin-1表达明显增高并与肿瘤的浸润和转移行为有关,Caveolin-1为判断喉鳞癌生物学的指标之一;HPV感染是喉鳞癌发生的高危因素,并且Caveolin-1与HPV两者之间存在协同作用.

胃癌组织中Caveolin-1基因突变的检测及意义

目的 探讨胃癌组织中Caveolin-1基因异常的可能原因及该候选抑癌基因Caveolin-1在胃癌发生发展过程中的作用.方法 通过PCR-RFLP技术分析和PCR扩增产物进行基因测序,检测胃癌中Caveolin-1基因的突变情况.结果 PCR扩增产物经纯化回收后测序结果 证明了132位密码cct突变为cat,即由脯氨酸(Pro)的密码子突变为亮氨酸(Leu)的密码子.结论 DNA测序结果 显示,第132位脯氨酸密码子突变为亮氨酸密码子,这种突变可能是导致胃癌组织中Caveolin-1基因表达降低的可能原因.

Caveolin-1蛋白与肿瘤的侵袭和转移

一、Caveolin蛋白家族概述生物膜是生命活动的主要结构基础,与细胞的恶变及肿瘤的进展也息息相关.1972年Singer和Nicolson提出的"液态双层脂质镶嵌模型"多年来一直被奉为经典.近10年来的研究认为,双层脂质在膜的各部分是不均一的,一些区域富含胆固醇和鞘质,这些区域比膜其他区域排列更加有秩序且不易流动,命名为脂质筏(rafts).

Caveolin-1及EGFR在膀胱移行细胞癌中的表达及其临床意义

目的 探讨Caveolin-1、表皮生长因子受体(EGFR)在膀胱移行细胞癌中的表达及其判断膀胱癌预后的价值.方法 采用免疫组织化学方法检测了89例膀胱移行细胞癌标本Caveolin-1、EGFR的表达及其协同表达情况.结果 89例标本中,33例(37.1%)Caveolin-1表达阳性,EGFR阳性表达率为50.6%(45/89),二者表达在膀胱移行细胞癌不同分级间有明显差异,高分级组阳性表达率明显高于低分级组(P＜0.025,P＜0.05);89例中8例为Caveolin-1(+)EGFR(+),该组病例治疗效果及预后均较差,且该组病例均为T2～4G3.结论 Caveolin-1和EGFR的异常表达与膀胱癌的恶性程度及复发密切相关,可作为判断其预后和复发的一项指标.

Caveolin-1 is involved in the regulation of synaptic plasticity, but the relationship between its pression and cognitive function during aging remains controversial. To explore the relationship be-tween synaptic plasticity in the aging process and changes in learning and memory, we examined caveolin-1 expression in the hippocampus, cortex and cerebel um of rats at different ages. We also examined the relationship between the expression of caveolin-1 and synaptophysin, a marker of synaptic plasticity. Hippocampal caveolin-1 and synaptophysin expression in aged (22-24 month old) rats was significantly lower than that in young (1 month old) and adult (4 months old) rats. pression levels of both proteins were significantly greater in the cortex of aged rats than in that of young or adult rats, and levels were similar between the three age groups in the cerebel um. Linear regression analysis revealed that hippocampal expression of synaptophysin was associated with memory and learning abilities. Moreover, synaptophysin expression correlated positively with caveolin-1 expression in the hippocampus, cortex and cerebel um. These results confirm that caveolin-1 has a regulatory effect on synaptic plasticity, and suggest that the downregulation of hippocampal caveolin-1 expression causes a decrease in synaptic plasticity during physiological aging.

siRNA下调Caveolin-1表达对体外培养C6胶质瘤细胞影响

目的 观察siRNA下调Caveolin-1(Car1)表达的效果及对体外培养C6胶质瘤细胞侵袭和迁移能力的影响.方法 构建Car1 mRNA质粒,转染体外培养c6胶质瘤细胞,利用Transwell体外侵袭实验和"划痕"实验分别检测细胞的侵袭和迁移能力,采用Western blot和RT-PCR的方法检测Cav1、EGFR、Pyk2的表达情况.结果 所构建的Cav1 siRNA质粒转染体外培养C6胶质瘤细胞可明显下调Cav1的表达,干扰成功后C6胶质瘤细胞的侵袭能力和迁移能力明显下降,同时EGFR和Pyk2的表达明显减少.结论 siRNA下调Cav1可降低体外培养C6胶质瘤细胞的侵袭和迁移能力.