首页 > 文献资料
-
灵杆菌素的分离纯化研究
灵杆菌素是从粘质沙雷氏菌菌体中提取的生物药物,其主要成分是脂多糖,大量临床实验证明灵杆菌素是一种可诱导免疫抗体产生的超抗原,在预防和治疗某些疾病具有巨大的应用价值.然而目前关于灵杆菌素基础研究工作进行的还是比较少,其生产工艺和质量控制手段也比较陈旧,制约灵杆菌素的发展.其中如何进行高效率的纯化并尽可能的减少杂质的引入是首要问题.本实验采用科学筛选过的凝胶过滤层析法对灵杆菌素进行分离纯化,以提高药效组分的含量和质量,同时形成一套科学评价质量稳定性的检测体系,并确定本实验方法的可行性.
-
大孔树脂-凝胶柱层析法大规模制备纯品羟基红花黄色素A
目的:以大孔树脂-凝胶柱层析法制备羟基红花黄色素A(HSYA).方法:室温浸提法提取红花水提液,大孔树脂柱层析法制备HSYA粗品,Sephadex LH-20凝胶柱层析法制备HSYA纯品,HPLC法分析HSYA纯品纯度,观察该HSYA抑制ADP诱导家兔体外血小板聚集的作用.结果:红花水提液经大孔树脂-凝胶柱层析法获得HSYA的纯度为95.3%,该成分抑制ADP诱发的家兔血小板聚集呈量效关系.结论:大孔树脂-凝胶柱层析法制备HSYA的方法为一简便、有效的技术.
-
超滤法提取六味地黄汤活性多糖的工艺研究
建立用超滤法快速分离六味地黄汤中免疫活性多糖的工艺。方法利用两支不同孔径中空纤维超滤柱截留活性多糖部位;采用凝胶柱层析结合硫酸-苯酚显色法,测定多糖的分子量;利用酸水解和TLC测定多糖的主要糖组成。结果得到相对分子量3万左右的多糖组分。结论超滤法分离多糖是一种有效的方法。工艺简单,生产周期短。
-
柱层析法纯化传代Vero细胞狂犬病疫苗上样量的选择
传代Vero细胞狂犬病疫苗较原代地鼠肾细胞狂犬病疫苗具有效价高,工艺简单,无外源因子污染,易于大规模生产的优点.其浓缩液经过Sepharose 4FF凝胶柱层析纯化后[1],其杂蛋白去除率可达99%以上,一、二期临床试验证明副反应率极低,且免疫效价可达4.5IU/ml以上,高于<中国生物制品规程>所规定的2.5IU/ml要求.在深入研究纯化工艺佳条件时,发现待纯化的浓缩疫苗上样量的多少直接影响纯化后疫苗的质量.对此,我们做了研究,结果报告如下.
-
肾综合征出血热灭活疫苗的纯化
目的为提高肾综合征出血热(HFPS)疫苗的免疫效果和减少副反应.方法用ELISA检测HFBS病毒抗原的方法,比较疫苗原液通过不同孔径滤膜的浓缩效果;比较离子交换和凝胶过滤的纯化效果.结果用孔径30万相对分子质量滤膜浓缩时,过滤液中仍有部分病毒抗原检出,经10万相对分子质量滤膜过滤后,过滤液中检测不到病毒抗原;用Sepharose 4FF凝胶柱层析浓缩时,经波长280nm检测到3个吸收峰,其中仅在第1峰中检测到病毒抗原,收集第1峰,几乎回收全部病毒抗原,去除杂蛋白约90%左右.结论本纯化方法适合于HFBS疫苗的规模化生产.
-
凝胶层析分离蛋白质的实验改进
凝胶层析分离蛋白质实验是生物化学教学中一个基本的实验.为了让学生在短暂的4学时课堂上能了解凝胶层析法的原理、应用并掌握凝胶柱层析分离蛋白质的基本方法,我们将原有的实验做了改进,使用15cm长的层析柱(原来使用60cm的层析柱),利用较少的样品(1ml混合样品可供24人实验用)及试剂和器材就可在规定时间圆满完成此实验,使其更适合课堂教学.
-
马钱子碱脂质体包封率测定方法的考察
目的 建立测定马钱子碱脂质体包封率的方法.方法 采用紫外分光光度法测定马钱子碱的浓度,凝胶柱层析法分离马钱子碱脂质体和游离的马钱子碱.结果 紫外分光光度法测定脂质体中马钱子碱浓度的回收率为100.61%~101.75%,日内精密度≤0.59%,日间精密度≤1.99%.凝胶柱层析法可以实现基线分离,马钱子碱脂质体上柱后的回收率为95.54%~99.84%.结论 本方法准确度高,可以满足马钱子碱脂质体质量控制的需要.
-
脊髓灰质炎减毒活疫苗的高效纯化及特性研究
应用Q-Sepharose Fast Flow对Vero细胞基质制备的I型口服脊髓灰质炎减毒活疫苗悬液进行纯化.病毒液经滤过澄清和超滤浓缩,获得85%的病毒感染性滴度回收率,而经Q-Sepharose F.F.纯化的病毒悬液,病毒感染性滴度回收率达100%.纯化后的病毒液用α-32P dATP标记DNA探针膜杂交法测定,宿主Vero细胞基质DNA残余含量远低于100 pg/剂量的标准;rct/40特征、病毒形态及病毒衣壳蛋白组份等生物学性状无显著变化.研究结果提示,Q-Sepharose F.F.是Vero细胞制备口服脊髓灰质炎减毒疫苗的理想纯化材料.
关键词: 脊髓灰质炎减毒活疫苗 凝胶柱层析 高效纯化