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川芎内酯A预处理对心肌微血管内皮细胞缺氧/复氧损伤保护作用及机制研究
目的:探讨川芎内酯A预处理对心脏微血管内皮细胞缺氧/复氧(H/R)损伤的保护作用及作用机制.方法:采用体外培养的大鼠乳鼠心脏微血管内皮细胞,空白组不加任何处理;单纯H/R组缺氧4 h/复氧2 h;单纯预处理组低氧25 min/复氧30 min,然后缺氧4 h/复氧2 h,各给药组分别加1×10-7,1×10-9,1×10-11 mol·L-1的川芎内酯A孵育55 min,然后缺氧4 h/复氧2 h;实验结束后取细胞上清液测一氧化氮(NO),一氧化氮合酶(NOS),内皮素(ET),取造模后的且固定在盖玻片的细胞,用原位杂交法检测iNOSmRNA和ETmRNA的基因表达.结果:H/R组细胞存活数降低明显,细胞培养液中NO和NOS活性显著降低,ET的活性明显升高,iNOSmRNA表达量减少,ETmRNA表达量增加;川芎内酯A 3个剂量组与H/R组比较,细胞存活数均明显增加,细胞培养液中NO和NOS活性增加,ET活性降低,iNOSmRNA表达量增加而ETmRNA表达量则减少.结论:川芎内酯A预处理能减轻内皮细胞损伤,对心脏微血管内皮细胞缺氧/复氧损伤可能具有保护作用,其作用机制可能与上调内皮细胞中iNOSmRNA的表达和下调ETmRNA的表达有关.
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川芎内酯A预处理对体外培养乳鼠心肌细胞缺氧/复氧损伤的保护作用
目的:观察川芎内酯A预处理对体外培养乳鼠心肌细胞缺氧/复氧(hypoxia/reoxygenation,H/R)损伤的保护作用.方法:单纯低氧/再给氧为心肌细胞低氧2小时、复氧1 小时.低氧预处理为心肌细胞低氧25min/复氧30min后,再低氧2小时、复氧1小时.川芎内酯A预处理为心肌细胞经药物孵育55min后,低氧2小时,复氧1小时.实验结束后取上清液测乳酸脱氢酶(LDH)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD);β液体闪烁计数仪测心肌细胞中丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)活性.结果:川芎内酯A预处理可使上清液中LDH漏出明显减少,MDA含量降低,SOD活性提高.还可降低心肌细胞内MAPK活性与H/R组比较.结论:川芎内酯A预处理对体外培养的乳鼠心肌细胞缺氧/复氧损伤具有保护作用,MAPK信号传导途径可能参与这一保护作用.
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川芎内酯A预处理对大鼠离体心脏缺血再灌注损伤的保护作用
目的:观察川芎内酯A预处理对离体心脏缺血再灌注损伤的保护作用.方法:采用Langendorff离体心脏恒压灌流方法,以0.5ml/min的灌流速度、浓度分别为0.0125mg/ml、0.025mg/ml和0.05mg/ml的川芎内酯A,与K-H灌流液同时灌流心脏10min,然后全心停灌30min,复灌60min.结果:川芎内酯A预处理可提高心脏缺血再灌期的冠脉流量和心肌收缩力,降低室颤和室速的发生率,使心肌匀浆的乳酸脱氢酶、丙二醛含量降低,超氧化物歧化酶活性增强.结论:川芎内酯A预处理对离体心脏缺血再灌注所致损伤可能具有保护作用.
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气相色谱法测定川芎挥发油中Z-藁本内酯及川芎内酯A的含量
目的:建立川芎挥发油中Z-藁本内酯和川芎内酯A的气相色谱含量测定法.方法:采用SE-54(50 m×0.2mm)石英毛细管柱,以邻苯二甲酸二乙酯为内标,柱温240℃,汽化室及检测器温度均为280℃,分流比1:30,检测器FID.结果:Z-藁本内酯、川芎内酯A线性范围分别为5.23～26.15 mg·mL-1(r=0.9999)及3.25～16.26mg·mL-1(r=0.9987);精密度实验的RSD(n=5)分别为0.72%和1.0%;重复性实验的RSD(n=5)分别为0.81%和2.1%;平均回收率(n=5)分别为100.2%(RSD=2.0%)和97.29%(RSD=2.6%).结论:该方法准确、重现性好、简便易行,可用于质量控制.
