首页 > 文献资料
-
Z-藁本内酯降解产物的UPCL-QTOF-MS和NMR结构鉴定
Z-藁本内酯是中药川芎中主要的苯酞类化合物,具有神经保护、抗炎、抗增值及扩张血管等多种药理作用.但Z-藁本内酯在自然条件不稳定且易于降解,限制其研究和应用.本文采用HPLC-UV、UPLC-QTOF-MS和NMR对Z-藁本内酯室温自然光照下的降解行为及降解产物进行考察和鉴定,Z-藁本内酯完全降解后生成5个降解产物,2个降解产物通过与对照品对比确定为洋川芎内酯Ⅰ和洋川芎内酯H,2个降解产物采用半制备HPLC分离后进行1H和13C NMR解析,确定其结构为(E)-6,7-反式-双羟基藁本内酯和(Z)-6,7-环氧藁本内酯.后推测了Z-藁本内酯的降解途径,氧化、水解和异构化是主要的降解反应.
关键词： Z-藁本内酯 降解产物 UPLC-QTOF-MS -
Z-藁本内酯对人脐静脉内皮细胞保护作用及其机制研究
目的 通过观察Z-藁本内酯对肿瘤坏死因子-α(TNF-α)诱导的人脐静脉内皮细胞(HUVEC)细胞间黏附分子-1(ICAM-1)、血管细胞黏附分子-1(VCAM-1)及核因子-κB (NF-κB)表达的影响,探讨其对炎性因子损伤内皮细胞的保护作用及其机制.方法 向体外培养的HUVEC中加入TNF-α10 ng/mL造成细胞损伤,同时加入不同浓度(5、10、20 μmol/L)的Z-藁本内酯,共同孵育24 h,MTT法检测各组细胞活力,ELISA法测定细胞培养液中 ICAM-1和VCAM-1的量,Westernblotting法检测各组细胞NF-κB蛋白表达.结果 与对照组比较,TNF-α可造成HUVEC明显损伤(P＜0.05、0.01),显著增加HUVEC中ICAM-1和VCAM-1的表达(P＜0.01).与模型组比较,Z-藁本内酯可以剂量相关地降低ICAM-1 (P＜0.01)和VCAM-1 (P＜0.05)的表达,显著减少细胞NF-κB蛋白 的表达(P＜0.05).结论 Z-藁本内酯可减轻TNF-α对HUVEC的损伤,其作用机制可能与通过抑制NF-κB的激活,进而减少ICAM-1和VCAM-1的表达有关.
-
当归药材热风-微波联合干燥方法研究
目的 研究热风-微波联合干燥方法加工当归药材的可行性,并对加工药材进行质量评价研究.方法 分别对热风干燥温度、热风干燥时间、微波干燥电流、微波干燥时间进行考察,根据《中国药典》2015年版当归项下指标对加工药材进行质量评价,结合微生物数量和产能,选出优工艺;分别检测优工艺加工样品、硫熏样品和阴干样品的微生物数量、重金属及有害元素量和10种活性成分(阿魏酸、阿魏酸松泊酯、洋川芎内酯I、洋川芎内酯H、洋川芎内酯A、E-藁本内酯、Z-藁本内酯、正丁烯基苯酞、riligustilide、欧当归内酯A)量.结果 终确定热风(70℃)干燥20 h+微波(100 mA)干燥6 min为优工艺.经新方法加工的样品微生物数量与硫熏样品相当,所加工样品重金属及有害元素均未超标,并且对药材活性成分无显著影响.结论 经新方法加工的当归药材各项理化指标均符合《中国药典》2015年版规定,热风-微波联合干燥技术可以作为当归药材产地加工中的一种快速干燥方法.
-
二次蒸馏-萃取耦合法提取颈复康制剂挥发油的研究
目的 优化颈复康制剂挥发油的提取方法.方法 以Z-藁本内酯、洋川芎内酯A、苍术素3个成分转移率为指标,对二次蒸馏-萃取耦合法和水蒸气蒸馏法提取颈复康制剂挥发油进行比较研究.结果 采用二次蒸馏-萃取耦合法提取颈复康制剂挥发油时,Z-藁本内酯和洋川芎内酯A的转移率是水蒸气蒸馏法的3倍；两种提取方法中苍术素的转移率没有变化.结论 采用二次蒸馏-萃取耦合法提取颈复康制剂挥发油类成分更为合理.
-
当归中5种成分同时测定与产地质量评价
目的 建立RP-HPLC法同时定量测定甘肃和云南当归药材中5种化学成分(阿魏酸、正丁基苯酞、正丁烯基苯酞、Z-藁本内酯、亚油酸),综合评价当归药材质量.方法 选用Waters X-Bridge C18(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,以甲醇-水溶液为流动相,梯度洗脱,体积流量为0.8 mL/min,检测波长为280 nm,柱温30℃,进样体积为10βL.采用主成分分析进行质量评价.结果 56批当归药材中5种化学成分在各自线性范围内呈良好的线性关系(r ＞0.999 8),方法平均回收率(n=9)在95.6％ ～ 104.3％之间.结论 本法的色谱条件能够将5种成分完全分离并同时定量测定.主成分分析显示“岷归”质量佳与道地药材结论一致,云南产当归(“云归”)质量亦佳.
-
GC测定颈复康颗粒中Z-藁本内酯和洋川芎内酯A的含量
目的 建立颈复康颗粒中Z-藁本内酯和洋川芎内酯A的GC含量测定法.方法 采用三氯甲烷-水溶剂萃取法提取川芎内酯类成分,采用气相色谱法,HP-5石英毛细管柱(30 m×0.32 mm×0.25 μm),FID检测器,程序升温系统进行检测.结果 藁本内酯和洋川芎内酯A的线性范围分别是4.095～65.51 μg·mL-1(r=0.999 9),2.249～44.98 μg·mL-1(r=0.999 8).回收率分别为96.7％,97.2％.结论 该方法简便快速,样品使用量少,可用于颈复康颗粒中Z-藁本内酯和洋川芎内酯A的含量测定.
-
波长变换高效液相色谱法测定逍遥丸中6种活性成分
目的 建立同时测定逍遥丸中6种成分(绿原酸、芍药苷、甘草苷、阿魏酸、甘草酸和Z-藁本内酯)的高效液相色谱分析方法.方法 色谱柱为Kromasil C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm);乙腈(A)-0.1％磷酸水溶液(B)为流动相,梯度洗脱:0～10 min,5％A;10～25 min,5％A→15％A;20～70 min,15％A→60％A;波长:0～27.0 min为326 nm(绿原酸),27.0～30.5 min为230 nm(芍药苷),30.5～36.0 min为280 nm(甘草苷、阿魏酸),36.0～52.0 min为276 nm(甘草酸),52.0～70.0 min为350 nm(Z-藁本内酯);体积流量1.0 mL?min-1;柱温35℃;进样量10μL.结果 绿原酸、芍药苷、甘草苷、阿魏酸、甘草酸和Z-藁本内酯分离度良好,质量浓度分别在27.09～270.90,30.22～302.23,12.45～124.48,9.79～97.92,6.89～68.92,7.46～74.56μg?mL-1线性关系良好,均r>0.9990,平均加样回收率为97.9％～100.8％(RSD在0.55％～1.83％).6批样品中绿原酸、芍药苷、甘草苷、阿魏酸、甘草酸和Z-藁本内酯分别在12.25～12.30,10.38～10.45,5.58～5.64,5.07～5.14,2.01～2.08,2.67～2.74 mg?g-1.结论 本方法专属性好、灵敏度高、准确度高,为逍遥丸的质量控制提供依据.
-
一测多评法同时测定逍遥丸中6种指标性成分的研究
目的:建立一测多评(QAMS) 的方法用来测定逍遥丸中6种成分的含量.方法:以甘草酸为参照物,采用HPLC法,以Kromasil C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5 μm);流动相为乙腈(A)-0.1%磷酸水溶液(B)为流动相,梯度洗脱:0 ~10 min, 5% A;10 ~ 25 min,5 % A→15 % A;20 ~ 70 min,15 % A→60 % A;流速:1.0 ml·min-1;检测波长:280 nm;柱温:35℃;进样量:10 μl.应用QAMS法的方法测定6种指标性成分之间的相对校正因子,分别采用外标法和一测多评法测定逍遥丸中的6种指标性成分的含量,并对2种方法计算结果进行对比分析,以验证一测多评法的实用性与稳定性.结果:建立QAMS法用于测定逍遥丸中6种指标性成分的含量,并对6批逍遥丸进行测定,其计算值与测定值的差异无统计学意义(P > 0.05).结论:QAMS 法用于测逍遥丸中6种指标性成分的含量,方法简单、有效、结果准确,可用于逍遥丸的质量控制,并为后续的一测多评的研究提供参考价值.
-
SPE-HPLC制备色谱法从当归挥发油中分离纯化Z-藁本内酯
采用固相萃取(SPE)预处理,HPLC制备色谱法从当归挥发油中分离制备Z-藁本内酯.二次色谱纯化所得Z-藁本内酯的纯度达99.6%.
-
一测多评法测定川芎中7种成分含量
目的:建立一测多评法(QAMS)测定川芎中绿原酸、川芎嗪、阿魏酸、洋川芎内酯A、正丁基苯酞、Z-藁本内酯、欧当归内酯A7种成分的含量,并验证该法在川芎质量控制中应用的可行性.方法:以结构稳定的阿魏酸为内参物,确定其余6种化学成分的相对校正因子(fk/s),实现一测多评;同时采用外标法测定各化学成分的含量,比较其与QAMS法的差异.结果:确定了6种化学成分的相对校正因子(fk/s);6批川芎中7种成分QAMS法与外标法测定值间无显著差异.结论:QAMS法能准确地分析川芎中7种化学成分的含量,可用于川芎中多指标质量控制.
-
HPLC法测定不同贮藏条件下川芎中10种化学成分的含量
目的:建立同时测定不同贮藏条件下川芎中绿原酸、川芎嗪、阿魏酸、洋川芎内酯I、洋川芎内酯H、阿魏酸松柏酯、洋川芎内酯A、正丁基苯酞、Z-藁本内酯、丁烯基苯酞含量的方法.方法:采用高效液相色谱法.色谱柱为Boston C18,流动相为乙腈-0.5％醋酸溶液(梯度洗脱),流速为1.0 mL/min,检测波长为285 nm,柱温为30℃,进样量为5μL.结果:绿原酸、川芎嗪、阿魏酸、洋川芎内酯I、洋川芎内酯H、阿魏酸松柏酯、洋川芎内酯A、正丁基苯酞、Z-藁本内酯、丁烯基苯酞检测进样量线性范围分别为0.03053～0.51901μg(r=0.9995)、0.00102～0.01734μg(r=0.9999)、0.01283～0.21811μg(r=0.9995)、0.00763～0.12971μg(r=0.9997)、0.00176～0.02992μg(r=0.9995)、0.05474～0.93058μg(r=0.9999)、0.21580～3.66860μg(r=0.9999)、0.01802～0.30634μg(r=0.9997)、0.23250～3.95250μg(r=0.9999)、0.00240～0.04080μg(r=0.9995);定量限分别为2.0737、0.5566、0.7538、0.2315、0.3069、0.9252、2.2953、4.6240、3.2153、0.9105 ng,检测限分别为0.6221、0.1670、0.2261、0.0694、0.0921、0.2776、0.6886、1.3872、0.9646、0.2731 ng;精密度、稳定性、重复性试验的RSD均小于5％(n=6);加样回收率分别为95.90％～103.28％(RSD=2.99％,n=6)、88.24％～107.84％(RSD=4.89％,n=6)、95.06％～102.08％(RSD=3.97％,n=6)、93.67％～101.05％(RSD=1.02％,n=6)、94.81％～104.33％(RSD=2.34％,n=6)、94.41％～105.59％(RSD=4.32％,n=6)、92.76％～104.83％(RSD=1.95％,n=6)、87.22％～102.56％(RSD=2.89％,n=6)、94.04％～99.52％(RSD=0.92％,n=6)、88.51％～103.83％(RSD=4.89％,n=6).5、15℃贮藏条件下,药材药品未见明显变质;室温条件下,部分样品出现虫蛀、霉变;6批药材样品各成分含量分别为0.0477％～0.1608％、0.0061％～0.0227％、0.0482％～0.1722％、0.0233％～0.1452％、0.0046％～0.0307％、0.0852％～0.8354％、0.1826％～2.1127％、0.0099％～0.0983％、0.6149％～3.1762％、0.0057～0.0369％,均呈下降趋势,且下降速率为5℃<15℃<室温;在相同贮藏温度下的下降速率为聚乙烯塑料袋<聚丙烯编织袋.结论:该方法准确、可行,可用于同时测定川芎中10种成分的含量.建议川芎药材密封包装后于干燥、阴凉处贮藏,且贮藏时间不宜过长.
-
UPLC测定川芎地上部分中的3种活性成分
目的 研究川芎地上部分中3种活性成分的含量及其在生长过程中的变化.方法 采用UPLC法分别测定川芎茎及叶中绿原酸、3,5-O-二咖啡酰奎宁酸、Z-藁本内酯的含量.采用Waters BEH C18色谱柱(50mm×2.1 mm,1.7 μm),流动相为乙腈-0.1％磷酸水溶液,梯度洗脱,流速0.4 mL· main-1,柱温35℃,检测波长325 nm.结果 绿原酸、3,5-O-二咖啡酰奎宁酸、Z-藁本内酯的线性范围分别为0.78 ～113.64 ng(r =0.9999)、0.37～94.38 ng(r =0.9999)、0.52 ～67.08 ng(r=0.9998),3个化合物的平均回收率分别为103.54％、100.44％、103.15％,RSD分别为1.35％、1.98％、2.91％.结论 所用方法准确、简便、重复性好,适用于川芎地上部分中绿原酸、3,5-O-二咖啡酰奎宁酸、Z-藁本内酯的含量测定;川芎茎及叶中3种成分在生长过程中的变化趋势基本相同,约在五月中旬达到高含量.
-
QNMR法测定川芎药材中的有效成分
目的 采用QNMR法测定川芎药材中有效成分Z-藁本内酯和洋川芎内酯A的含量.方法 以1,4-二硝基苯作为内标,采用5 mm SEI探头,探头温度298.2 K,扫描次数(NS) 32次,延迟时间(dl)20 s.定量特征信号选择为Z-藁本内酯C6-H和洋川芎内酯A的C3-H峰.结果 Z-藁本内酯和洋川芎内酯A的含量分别为0.7383％、0.5268％.结论 QNMR法快速、准确、不需参照物、样品制备简单、操作简便.
关键词： 定量核磁共振(QNMR) 川芎 Z-藁本内酯 洋川芎内酯A 含量 -
当归挥发油中Z-藁本内酯的分离纯化及其制剂的稳定性
目的 建立当归挥发油中主要成分Z-藁本内酯的快速分离纯化方法 ,并考察其在制剂中的稳定性.方法 采用中压柱色谱法和GC-MS结合计算机分离鉴定当归挥发油中的Z-藁本内酯,以色谱峰面积归一化法进行定量,并考察其在当归挥发油,Z-藁本内酯纯品,当归挥发油自乳化微乳制剂中的稳定性.结果 得到了纯度大于98%的Z-藁本内酯纯品;Z-藁本内酯纯品在室温及低温下均不稳定,总油中Z-藁本内酯于室温缓慢降解,其挥发油的自乳化制剂在室温下稳定.结论 分离方法 适合当归中Z-藁本内酯的快速制备;当归挥发油的自乳化微乳制剂可改善其中Z-藁本内酯的不稳定性.
-
烟熏加工当归药材的薄层色谱鉴别研究
目的 建立烟熏加工当归药材的薄层色谱(TLC)鉴别方法,探讨烟熏温度及烟熏时间对当归薄层色谱的影响.方法 采用硅胶GF54薄层板,以甲苯-乙酸乙酯-冰乙酸(90∶10∶2)为展开剂,阿魏酸、Z-藁本内酯为对照品,采用薄层色谱法对8批不同烟熏条件加工的当归药材进行定性鉴别.结果 建立的方法药材用量少,薄层色谱信息丰富,操作简便、快速.结论 不同烟熏条件加工的当归药材主要化学成分无明显差异,该法为烟熏加工当归药材的质量控制提供了科学依据.
-
气相色谱法测定川芎挥发油中Z-藁本内酯及川芎内酯A的含量
目的:建立川芎挥发油中Z-藁本内酯和川芎内酯A的气相色谱含量测定法.方法:采用SE-54(50 m×0.2mm)石英毛细管柱,以邻苯二甲酸二乙酯为内标,柱温240℃,汽化室及检测器温度均为280℃,分流比1:30,检测器FID.结果:Z-藁本内酯、川芎内酯A线性范围分别为5.23～26.15 mg·mL-1(r=0.9999)及3.25～16.26mg·mL-1(r=0.9987);精密度实验的RSD(n=5)分别为0.72%和1.0%;重复性实验的RSD(n=5)分别为0.81%和2.1%;平均回收率(n=5)分别为100.2%(RSD=2.0%)和97.29%(RSD=2.6%).结论:该方法准确、重现性好、简便易行,可用于质量控制.
-
川芎中洋川芎内酯A和Z-藁本内酯的分离提取及鉴定
目的:应用中压柱色谱分离提取川芎中2个主要内酯类化合物,并对其进行定性检测和结构鉴定.方法:利用中压柱色谱分离内酯类化合物,采用120g Biotage SNAP Cartridge KP-C18-HS色谱柱,以乙腈-0.5％醋酸作为中压柱色谱分离的溶剂体系,流速30 mL·min-1,检测波长280 nm,柱温30℃,进样量800 mg;利用高效液相色谱-电喷雾质谱联用技术进行定性检测和结构鉴定,采用SunFireTMC18(250 mm×4.6 mm,5μm)反相色谱柱,流速0.5 mL·min-1,正离子模式电喷雾电离,扫描范围m/z 50～1000,喷雾电压4.5 kV,金属毛细管温度250℃,金属毛细管电压20 V.结果:应用中压柱色谱技术一次性从800 mg川芎的60％乙醇提取物中分离得到2个单体化合物,洋川芎内酯A(11.3 mg)和Z-藁本内酯(20.1 mg),其纯度均达到95％.结论:应用中压柱色谱分离川芎中单体化合物洋川芎内酯A和Z-藁本内酯的方法简单、快捷.
-
当归不同药用部位活性成分含量的HPLC分析方法及特征图谱研究
目的:建立同时测定当归不同药用部位中绿原酸、阿魏酸和Z-藁本内酯含量的HPLC分析方法及特征图谱,研究当归不同药用部位成分差异并加以区别.方法:含量测定,采用Agilent ZORBAX SB-C18色谱柱(5 μm,4.6 mm×250 mm),以0.05％乙酸水溶液(A)-甲醇(B)为流动相,梯度洗脱(0 ～5 min,15％ B→40％ B;5 ～ 14 min,40％B;14～ 25 min,40％ B→65％B;25 ～ 35min,65％B;35 ～ 40 min,65％ B→90％B;40 ～ 45 min,90％ B→100％B;45 ～ 57 min,100％B),流速0.6 mL·min-1,采用变波长检测模式(0 ～30 min,326 nm;30～57 min,350 nm),柱温35℃;特征图谱色谱的建立,采用Agilent ZORBAX SB-C18色谱柱(5μm,4.6mm×250 mm),以0.05％乙酸水溶液(A)-甲醇(B)为流动相,梯度洗脱(0～5 min,15％ B→35％ B;5 ～ 30 min,35％B→65％B;30～45 min,65％B;45 ～ 58 min,65％ B→90％B;58 ～ 63 min,90％ B→100％B;63～75 min,100％B),流速0.6 mL·min-1,检测波长254nm,柱温25℃.结果:不同产地不同批次当归不同药用部位中绿原酸的含量为0.020％ ～0.079％,阿魏酸含量为0.025％ ～0.134％,Z-藁本内酯含量为0.273％～1.46％,有较大差异.特征图谱共确定21个特征峰,对样品特征图谱进行聚类分析、偏小二乘法分析和主成分分析,样品分为3类.结论:所建立的含量测定方法简单、快速、灵敏、准确,能够用于当归不同药用部位中活性成分的含量测定.所建立的特征图谱方法能较好地反映当归药材的整体情况.两者结合可以更好地对当归药材的质量进行综合评价.当归不同药用部位化合物成分有明显差异,本文研究结果为当归分部位用药提供了一定的理论依据.
