首页 > 文献资料
-
中性粒细胞异常增殖相关的BCR/ABL-慢性白血病的临床特征
目的:探讨与中性粒细胞异常增殖相关的BCR/ABL-慢性白血病的临床特征.方法:报告3例不同类型与中性粒细胞异常增殖相关的BCR/ABL-慢性白血病并结合文献进行讨论.结果:3例均为老年男性,表现为以中性粒细胞为主的白细胞异常增多、BCR/ABL融合基因阴性.例1诊断为慢性中性粒细胞白血病(CNL),脾大,外周血以成熟中性粒细胞增高为特征,胞浆内中毒颗粒易见,无明显病态造血,中性粒细胞碱性磷酸酶(NAP)染色强阳性,骨髓粒系增生明显活跃.例2诊断为不典型慢性髓细胞白血病(aCML),血涂片示不成熟粒细胞比例增高伴粒系病态造血,尤其核染色质异常浓聚更为明显,骨髓象表现为髓系增生和病态造血,原始细胞轻度增多.例3诊断为慢性粒单核细胞白血病(CMML),外周血成熟单核细胞数量和比例异常偏高,粒系病态如核分叶过多、环状核和假性Pelger-Huet畸形等易见,骨髓髓系增生明显活跃伴病态造血,无原始细胞增多.结论:中性粒细胞异常增殖相关的BCR/ABL-慢性白血病较为少见,易于误诊,细胞形态学特征是诊断BCR/ABL-慢性白血病的基础.临床表现、多种实验室检查结果尤其是分子生物学等有助于正确诊断这类疾病.
-
荧光原位杂交技术检测BCR/ABL融合基因阳性的病例分析
目的:本研究应用快速、高敏感性和特异性的荧光原位杂交技术(fluorecence in situ hybridization,FISH)检测BCR/ABL融合基因并对阳性病例进行分析.方法:回顾性分析2010年4月至2012年4月用FISH法检测初诊考虑为慢性骨髓增殖性疾病(chronic myeloproliferative disease,CMPD)或骨髓增生异常/骨髓增殖性疾病(myelodysplastic myeloproliferative disorders,MDS/MPD)、急性淋巴细胞白血病患者(acute lymphocyte leukemia,ALL)及口服格列卫的慢性髓系白血病(chronic myeloid leukemia,CML)和ALL患者的BCR/ABL 融合基因的表达情况.结果:BCR/ABL融合基因阳性的病例共456例,其中经骨髓细胞学初诊为CML的350例,占总阳性病例的76.8％；CML复查病例为85例,占总阳性病例的18.6％；诊断为B细胞型ALL(B-ALL)的21例,占总阳性病例的4.6％.31例初诊为CMPD和MDS/MPD的患者中,有5例患者骨髓形态学诊断为CML,应用FISH法检测BCR/ABL融合基因均为阳性(100％)；另26例患者骨髓形态学诊断为非CML的CMPD及MDS/MPD,BCR/ABL融合基因均为阴性(100％).79例骨髓形态学诊断为ALL患者应用FISH法检测BCR/ABL融合基因,其中阳性病例为21例,占ALL病例的26.6％.45例初次口服格列卫的CML患者,6个月达到主要分子生物学缓解(major molecular response,MMR)或完全分子生物学缓解(complete molecular response,CMR)的为21例,占46.7％,12个月为40例,占88.9％.2例CML移植患者分别在91天和16个月发现融合基因阳性.结论:FISH法检测BCR/ABL融合基因快速、简单、特异性高、可靠,弥补了染色体检测报告需要时间长等不足.对CMPD和MDS/MPD的诊断及鉴别诊断有重要价值；可明确Ph+ ALL患者的诊断；在监测格列卫疗效和微小残留病灶(minimal residual desease,MRD)方面也有重要意义.
-
GPI锚定修饰的慢粒白血病bcr/abl和鼠IL-12真核双表达质粒的构建及表达
目的:构建由糖基化磷脂酰肌醇(GPI)锚定修饰的bcr/abl和鼠IL-12(mIL-12)真核双表达质粒,在COS-7细胞中检测其基因和膜蛋白表达.方法:以含有慢粒白血病(b3a2型)migP210全长序列的质粒为模板,通过PCR扩增获得654 bp的bcr/abl融合基因片段,酶切后插入pBudCE4.1空载中,经鉴定获得重组质粒pBB.同时,RT-PCR扩增人外周血淋巴细胞CD24分子中的GPI锚定序列,酶切后克隆入pBB质粒中与bcr/abl基因片断羧基端相连,获得重组质粒pBBG并鉴定.然后扩增mIL-12基因片段并亚克隆入pBBG另一多克隆位点,构建重组质粒pBBGI.在多聚阳离子介导下将pBBGI质粒转染COS-7细胞,采用RT-PCR, Western Blot检测bcr/abl融合基因及其蛋白的表达,ELISA检测mIL-12的表达.结果:经酶切和测序鉴定证实,由GPI锚定连接的bcr/abl及mIL-12基因插入片段正确;转染细胞中有bcr/abl融合基因、转染细胞膜上有bcr/abl融合蛋白的表达,细胞培养上清中也有mIL-12的表达.结论:成功构建能在真核细胞中表达bcr/abl和mIL-12的重组质粒PBBGI,为进一步研究bcr/abl基因疫苗诱导肿瘤特异性细胞免疫奠定了基础.
关键词： Bcr/abl融合基因 糖基磷脂酰肌醇类 白细胞介素-12 真核双表达 -
bcr/abl融合基因与慢性粒细胞白血病急变
目的探讨bcr/abl融合基因的表达在CML急变中的意义。方法采用荧光定量逆转录多聚酶链反应(FQ-PCR)技术，对9例CML患者急变前后的血或骨髓进行bcr/abl检测。结果 CML患者从慢性期到急变期往往伴随着bcr/ablmRNA水平的明显升高。结论bcr/abl是CML发病的分子基础，定量检测bcr/abl融合基因对于CML急变的诊断，疗效观察及预后有重要意义。
关键词： Bcr/abl融合基因 PCR CML 急变 -
慢性粒细胞白血病异体外周造血干细胞移植术后Ph染色体分析与bcr/ablmRNA检测
慢性髓性白血病(CML)是一种起源于骨髓多能造血干细胞的恶性增殖性疾病,90%以上的病例具有CML特异的细胞遗传学标记,即Ph染色体.其分子生物学基础则是第9号和22号染色体长臂易位t(9;22)(q34;q11),形成bcr/abl融合基因,因此,在CML患者的诊断和治疗监测中,Ph染色体分析和bcr/abl融合基因检测具有重要意义.为了明确细胞遗传学分析与聚合酶链反应PCR方法在CML应用中的关系,我们用热变性姬姆萨显带法(RHG)和PCR技术对8例CML患者的25份样品进行分析,现报告如下.
关键词： 白血病 Ph染色体 Bcr/abl融合基因 -
外周血双色荧光原位杂交方法监测慢性粒细胞性白血病患者干扰素治疗前后bcr／abl融合基因的变化
目的：研究外周血双色荧光原住杂交(D-FISH)在慢性粒细胞性白血病(CML)患者干扰素治疗效果监测方面的应用价值。方法：用D-FISH方法对18例CML患者干扰素治疗前后的外周血36份样本进行bcr／abl融合基因检测，并且与骨髓D-FISH方法检测的结果进行比较。结果：治疗后外周血间期核细胞中bcr／abl融合基因的检出率较治疗前有所下降，并且外周血中的检出率比同一患者骨髓中的检出率要低。结论：D-FISH方法可以简便、灵敏、可靠地对CML患者干扰素治疗前后的外周血进行疗效监测，使得从取材上更加方便。
关键词： 双色荧光原位杂交 慢性粒细胞性白血病 Bcr/abl融合基因 -
Ph染色体与bcr/abl融合基因的检测在CML中的临床意义
目的:观察Ph染色体、bcr/abl融合基因与慢性粒细胞白血病(CML)诊断、疗效、预后的关系.方法:用姬姆萨G带显带法和反转录筑巢式聚合酶链反应(RT-nest-PCR)对41例初、复治CML患者的骨髓标本进行了分析.将Ph染色体及bcr/abl融合基因均为阳性的慢性期患者随机分成二组.分别以干扰素-α(IFN-α)、羟基脲(HU)及乌苯美司(Bestatin、BS)、HU治疗,6月后复查核型及bcr/abl融合基因.结果:41例病例中36例Ph染色体及bcr/abl融合基因均为阳性,Ph-、bcr/abl+5例,其中b3a2转录本29例,b2a2转录本12例;在可评价的20例病例中,两个治疗组各10例,IFN-α治疗组全部达CHR,2例获得部分细胞遗传学反应(PGR),5例获微小细胞遗传学反应(MiGR);3例无细胞遗传学反应;BS治疗组全部达CHR,6例达MiGR;全部病例均未获分子生物学反应;二组治疗均使CML获Ph染色体量的下降(P＜0.01),二组病例下降程度无差异(P＞0.05).结论:Ph染色体及bcr/abl融合基因均为CML重要的诊断指标,二者相结合意义更大;Ph染色体的量及其变化可判断疗效及预后;干扰素及乌苯美司治疗组均取得较好疗效,均能使患者获细胞遗传学反应,其细胞遗传学疗效无明显差别.
关键词： Ph染色体 Bcr/abl融合基因 CML 干扰素-α 乌苯美司 -
BCR/ABL基因对PTEN介导的信号通路在K562细胞增殖和凋亡中的影响
目的:探讨BCR/ABL融合基因对抑癌基因P7芑_Ⅳ介导的信号传导通路在K562细胞增殖和凋亡中的影响.方法:用不同浓度的格列卫(0.5、1、2、5、10 μg/ml)干预K562细胞不同时间,观察其对细胞增殖的影响.用1μg/ml浓度的格列卫干预K562细胞不同时间(12、24、36、48、72 h)后,通过荧光定量PCR检测细胞BCR/ABL、FIEN、mTOR mRNA水平的变化,并分析它们之间的相互关系.Western blotting检测细胞Akt和p-Akt水平,分析BCR/ABL融合基因对FIEN mRNA表达的影响.结果:1 μg/ml格列卫作用K562细胞后随着BCR/ABL融合基因表达减低,FIEN mRNA表达上调,mTOR mRNA表达下调,p-Akt表达下调.48h后随着BCR/ABL融合基因的抑制减弱,FIEN mRNA表达进而减低,而mTOR mRNA表达升高,p-Akt持续降低.BCR/ABL mRNA表达与PTEN mRNA表达呈负相关(r=-0.881,P<0.05),与mTOR mRNA及p-Akt表达呈正相关(依次为r=0.961,r=0.879,P均<0.05).结论:BCR/ABL融合基因可以通过抑制PTEN基因表达,调控PI3K/Akt、mTOR信号传导通路,参与细胞增殖、凋亡及细胞周期调控等生物学特性.
关键词： Bcr/abl融合基因 PTEN mTOR AKT -
Bcr/abl融合转录子阳性成人急性淋巴细胞白血病bcl-2基因表达研究
目的:探讨在bcr/abl融合转录子阳性(bcr/abl+)成人急淋患者中bcl-2基因的表达特征,初步研究bcl-2基因的预后价值.方法:采用巢式逆转录多聚合酶链反应(NT-PCR)技术对36例成人急性淋巴细胞白血病(ALL)病例的骨髓或外周血的bcr/abl融合基因、bcl-2基因mRNA进行检测.结果:所有患者均有不同水平的bcl-2基因表达,ALL组总体表达水平为明显高于正常对照组(1.29±0.73)vs(0.18±0.14),P<0.05.bcr/abl阳性组患者bcl-2表达水平明显高于bcr/abl阴性组(1.81±0.39)vs(0.97±0.71),P<0.05.相对于治疗成功的缓解患者而言,未缓解患者往往具有较高的bcl-2基因表达(2.02±0.22)vs(0.87±0.56),P＜0.05.结论:检测ALL患者的bcl-2基因表达,有助于观察疗效和判断预后.bcr/abl融合基因阳性患者bcl-2基因表达水平显著增高,提示两基因间存在一定的相关性.
