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川芎嗪对腹膜间皮细胞CD40表达的影响
目的:探讨川芎嗪对腹膜间皮细胞CD40表达的影响.方法:分离、培养大鼠腹膜间皮细胞,分别用4.25%腹透液、4.25%腹透液加γ-干扰素(IFN-γ,100u/ml)、4.25%腹透液加川芎嗪40mg/L、4.25%腹透液加IFN-γ 100u/ml加川芎嗪40mg/L刺激细胞30min,以DMEM/F12培养基为对照组.通过逆转录-多聚酶链反应(RT-PCR)及流式细胞仪(FACS)检测间皮细胞CD40表达.结果:4.25%腹透液刺激后腹膜间皮细胞CD40mRNA及其蛋白的表达明显高于对照组(P＜0.01);4.25%腹透液加IFN-γ联合刺激后,间皮细胞CD40mRNA及其蛋白的表达明显高于对照组及单纯4.25%腹透液组(P＜0.01).加入川芎嗪后,可显著减低单纯4.25%腹透液及4.25%腹透液加IFN-γ引起的CD40mRNA及其蛋白的高表达(P＜0.01).结论:单纯腹透液及腹透液加IFN-γ可显著增加腹膜间皮细胞CD40的表达,而川芎嗪对腹膜间皮细胞CD40的表达有显著的抑制作用.在长程腹膜透析(CAPD)过程中,加入川芎嗪可能有助于减轻透析液引起的慢性炎症反应,从而防止或延缓腹膜纤维化的发生、发展.
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CD40、血管内皮生长因子、S100阳性树突状细胞在胃腺癌中表达及临床意义
可溶性白细胞表面分化抗原CD40属于肿瘤坏死因子受体超家族成员,经研究证实CD40广泛表达于上皮性肿瘤,且与肿瘤的侵袭、转移等生物学行为密切相关.近期研究发现,CD40在胃癌中也呈现高表达.有学者发现在人多发性骨髓瘤细胞和人神经胶质瘤细胞中,CD40信号活化可诱导肿瘤细胞表达、分泌血管内皮生长因子(VEGF),从而调节肿瘤血管新生[1-2],但目前尚未见有关CD40与胃肿瘤微环境的研究报道.本研究以免疫组织化学法检测128例胃腺癌及相应癌旁组织中CD40、VEGF和S100阳性树突状细胞(DC)的表达水平,初步探讨其在胃癌发生发展中的意义.
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CD40信号介导同种反应中CD4+T细胞生物学功能的研究
目的 探讨CD40信号在血管内皮细胞(ECV)与人外周血CD4+T细胞体外共培养的同种反应中的生物学功能.方法 采用免疫磁珠阴性选择法分离获得人外周血CD4+T细胞,将纯化的CD4+T细胞与高表达CD40分子的ECV体外共培养,同时应用功能型CD154单克隆抗体阻断CD40信号,通过检测不同时间点的共培养上清IL-2、IFN-γ水平及CD4+T细胞的增殖来评价CD40信号在同种反应中的生物学效应.结果 CD4+T细胞与ECV共培养组上清中的IL-2和IFN-γ水平高于含有CD154单克隆抗体的阻断效应组,差异有统计学意义(P＜0.05);此外,CD154单克隆抗体通过阻断CD40共信号,能有效地抑制CD4+T细胞活化,并使之对同种抗原的刺激,维持在较低的应答水平,在共培养的第6天差异为显著(P＜0.05).结论 CD40信号参与ECV介导的CD4+T细胞分泌IL-2和IFN-γ,并介导CD4+T细胞对同种抗原的免疫反应;CD154单克隆抗体等多种干预CD40信号的生物制剂可能在移植排斥的免疫负性调节中具有潜在的应用价值.
关键词： CD40信号 同种反应 CD154单克隆抗体 细胞因子 -
人B淋巴母细胞系体外培养方法的优化及其影响因素
目的 探讨体外建立健康人外周血B淋巴母细胞样细胞系(B-LCLs)的优化方法及其影响因素.方法 用EB病毒感染健康人外周血中分离的单个核细胞(PBMC),加入CD40激发型抗体(5C11)、CpG DNA免疫调节基因序列以诱导B淋巴细胞增殖,环胞菌素A(CysA)抑制T淋巴细胞的活性.光学显微镜下观察B-LCLs的形态特征,利用流式细胞术分析B-LCLs膜表面分子CD19的表达水平.结果 PBMC经EBV感染3周后转化成永生化B-LCk.转化后的B淋巴母细胞体积增大积聚成团,可进一步分裂增殖并长期传代培养.CD40激发型抗体(5C11)及CpG免疫调节基因序列联合EBV感染人PBMC,明显地提高了转化效率,转化后的LCLs保持了成熟B淋巴细胞的生物学特征.结论 CD40信号激发和CpG免疫调节基凶序列联合运用能有效地促进EBV对人B淋巴细胞的转化及体外建系.
关键词： EB病毒 CpG免疫调节基因序列 CD40信号 B淋巴母细胞系 -
CD40在大鼠腹膜间皮细胞的表达及其功能研究
目的研究腹膜间皮细胞CD40的表达、调节因素及其活化后与细胞间黏附分子1(ICAM-1)分泌的相关性.方法分离、培养大鼠腹膜间皮细胞,用IFN-γ、TNF-a、IL-1刺激24 h,通过逆转录-多聚酶链反应(RT-PCR)及流式细胞仪(FACS)检测分析间皮细胞CD40表达.通过CD40单克隆抗体(CD40mAb)活化间皮细胞CD40,用FACS检测分析间皮细胞ICAM-1的表达.结果间皮细胞结构性表达低水平的CD40.IFN-γ、IL-1可显著增加间皮细胞表面CD40mRNA及其蛋白的表达,而以IFN-,γ增幅大.TNF-a对间皮细胞C940mRNA及其蛋白的表达无显著增加作用.用IFN-γ增加间皮细胞CD40表达的同时,加入CD40mAb活化CD40受体可显著增强间皮细胞ICAM-1的表达.结论腹膜间皮细胞功能性表达CD40,其与腹腔中阳性CD40配体(CD40L+)细胞相互作用,可能在腹腔局部防御中发挥重要作用,其结果对于限制炎症的发生和发展具有积极意义.
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冠状动脉粥样硬化斑块内的炎症反应与CD40信号传导
冠状动脉粥样硬化斑块内的炎症反应促使冠状动脉内不稳定斑块的形成和破裂,在此基础上发生细胞成分的活化并介导血栓形成,是绝大多数急性冠状动脉综合征发生的主要原因.近年来的研究发现,白细胞分化抗原40(CD40)信号通路参与了动脉粥样硬化斑块内主要细胞成分炎症反应的调节,本文对CD40信号与冠状动脉粥样硬化斑块内炎症反应的相关问题作一综述.
