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NKG2D及其配体在白血病免疫监视中的作用
NKG2D是免疫细胞表面的激活性受体,在机体的抗肿瘤免疫、抗感染免疫以及自身免疫病的发生中发挥重要作用.NKG2D识别肿瘤细胞表面的配体,激活效应细胞,产生有效的抗肿瘤免疫应答,是肿瘤免疫监视机制之一.近来研究发现白血病细胞表达多种NKG2D配体,参与白血病的免疫监视.本文就NKG2D及其配体对白血病免疫监视和免疫逃逸的作用作一综述.
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NKG2D在NK细胞杀伤血液肿瘤细胞中的作用
本研究旨在探讨NKG2D在NK细胞杀伤血液肿瘤细胞时是否发挥作用.将多种血液肿瘤细胞株作为靶细胞,并在靶细胞中检测NKG2D相应配体的表达,而后进行杀伤实验.将靶细胞与羧基荧光素二醋酸盐琥珀酰亚胺酯(CFSE)共孵育,同时将NK细胞系NK92MI分别与NKG2D特异性封闭抗体或同型对照抗体共孵育.之后将NK92MI分别与多种血液肿瘤细胞共同培养,2h后用流式细胞分析方法检测靶细胞的凋亡率.结果显示:加入NKG2D特异性封闭抗体后,NK细胞对于急性髓系白血病细胞Kasumi-1的杀伤作用减弱约30％,而在其他血液肿瘤细胞株中封闭NKG2D并未明显影响NK细胞对于靶细胞的杀伤.结论:在NK细胞作用于某些靶细胞时,NKG2D促进NK细胞的杀伤作用.
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NKG2D和NKG2A及相应配体MHC-I A/B和HLA-E在急性白血病的表达及意义
本研究旨在初步探讨NK细胞受体NKG2D和NKG2A在初发ALL和AML患者NK细胞、CD3+T细胞的表达其及相应配体MHC-I A/B和HLA-E在白血病细胞表达差异性和免疫学意义.用流式细胞术检测NK92细胞对8种白血病细胞系的杀伤效率,并检测60例初发急性白血病患者(ALL和AML各30例)骨髓中NKG2D和NKG2A在NK和CD3+T细胞的表达及其相应配体MHC-I A/B和HLA-E在白血病细胞的表达.结果表明,NK92对不同白血病细胞系的杀伤效率存在差异.ALL患者NK细胞和CD3+T细胞的NKG2D及NKG2A阳性表达率与AML患者相比均无显著差异(p>0.05),但是ALL患者白血病细胞MHC-I A/B和HLA-E阳性表达率均明显高于AML患者(p<0.05).结论:ALL与AML患者免疫细胞功能的差异性可能与白血病细胞配体表达的不同有关,而与本身NK及T细胞表达的杀伤和抑制性受体无关.
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NKG2D及其配体RAE-1、H60在移植物抗肿瘤中的作用
为探讨NKG2D及其配体RAE-1、H60在单倍体相合(haploidenncal)造血干细胞移植介导的移植物抗肿瘤效应中的作用,以皮下接种H22细胞的BABL/c×C57BL/6杂交F1代(CB6F1)小鼠为受鼠,以C57BL/6小鼠的骨髓+脾细胞为供者细胞,分别用抗CD90.2、NK1.1和NKG2D单克隆抗体清除供者T细胞、NK细胞和封闭NKG2D受体,进行单倍体相合细胞移植,观察移植后的抗肿瘤效应,并以半定量RT-PCR法检测移植后小鼠肿瘤组织RAE-1、H60的mRNA表达水平.结果发现:清除供者T细胞、NK细胞和封闭NKG2D的移植均导致移植物抗肿瘤效应的下降,MHC单倍体相合细胞移植后肿瘤细胞RAE-1、H60的mRNA表达水平上升.结论:NKG2D及其配体RAE-1、H60在移植物抗肿瘤效应中的起着重要的作用.
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IL-2促进PBMC来源的NK、NKT、CD8+T细胞高表达NKG2D
目的 观察大剂量IL-2活化的人外周血单个核细胞(PBMC)中,NKG2D在NK细胞、T细胞和NKT细胞表面的表达规律.方法 使用三重免疫荧光标记的流式细胞术检测NKG2D的表达情况.使用sMICA蛋白与人PBMC共同培养,之后使用流式细胞术分析NKG2D在NK细胞中的表达情况.使用半定量RT-PCR方法检测大剂量IL-2活化的人PBMC中NKG2D及其锚定蛋白DAP10mRNA的表达变化.结果 使用大剂量IL-2活化人PBMC细胞后,NKG2D在NK细胞、CD8+T细胞和NKT细胞表面的表达均增加,但是在CD4+T细胞表面始终不表达.同时IL-2可以拮抗sMICA对NKG2D的下调作用.半定量RT-PCR结果显示,使用大剂量IL-2活化人PBMC之后,NKG2D及其锚定蛋白DAP10的mRNA水平并不发生明显变化.结论 大剂量IL-2培养人PBMC之后,NKG2D在NK细胞、CD8+T细胞和NKT细胞表面的表达均增加,可能是PBMC活化并获得广谱抗肿瘤效应的机制之一.
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黄芩苷对BCG感染后巨噬细胞表达NKG2 D配体及NK细胞杀伤活性的影响
目的：探讨卡介苗(BCG)感染对巨噬细胞表面NKG2D配体(MICA、MICB、ULBP1和ULBP2)表达的影响，以及黄芩苷对配体表达及NK细胞杀伤活性的影响。方法佛波醇酯( PMA)诱导THP-1细胞分化为巨噬细胞，建立BCG感染巨噬细胞模型，进一步用黄芩苷干预感染模型，分别采用real-time PCR和Western blot检测MICA、MICB、ULBP1和ULBP2 mRNA水平和蛋白表达水平。人外周血单个核细胞( PBMC)诱导分化扩增的NK细胞与感染后巨噬细胞共孵育4 h后，采用RTCA DP实时无标记细胞分析仪检测NK细胞的杀伤活性。结果 BCG感染可上调MICA、MICB、ULBP1和ULBP2 mRNA水平和MICA、ULBP1蛋白表达水平。1 mg/L黄芩苷处理72 h后可显著促进MICA和ULBP1 mRNA和蛋白表达，并增加NK细胞对BCG感染后巨噬细胞的杀伤率。结论 BCG感染可诱导人巨噬细胞NKG2D配体表达增加，但不能有效活化NK细胞；黄芩苷可进一步上调感染后巨噬细胞表达NKG2D配体，进而促进NK细胞杀伤活性。
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传染性单核细胞增多症患儿NKG2D表达变化初探
目的 观察传染性单核细胞增多症(infectious mononucleosis,IM)患儿自然杀伤(NK)细胞和CD8+T细胞NKG2D表达,探讨导致Epstein-Barr病毒(EBV)感染免疫功能紊乱的可能机制.方法 传染性单核细胞增多症患儿29例,同龄健康对照组25例.流式细胞术检测外周血NK细胞、CD8+T细胞表面激活性受体NKG2D及抑制性受体NKG2A表达,CD14+单核细胞(MC)表面NKG2D配体MHC Ⅰ相关分子A(MICA)与人巨细胞病毒蛋白UL16的结合蛋白1(ULBP-1)表达；酶联免疫吸附试验(EHSA)检测血浆游离MICA (sMICA)、IL-7、IL-12、IL-15、IFN-γ及TGF-β等细胞因子浓度.结果 (1)IM组患儿NK细胞及CD8+T细胞表面NKG2D表达明显低于对照组(P＜0.05),其中3例拟诊EBV-相关噬血细胞综合征(EBV-HLH)患儿表达下调为显著；(2)IM组患儿CD14+ MC MICA与ULBP-1表达与对照组相比差异无统计学意义(P＞0.05)；(3)IM患儿细胞因子IL-15与TGF-β较对照组降低,IL-7、IL-12、IFN-γ及sMICA较对照组升高；(4)IM患儿NK细胞NKG2A表达明显高于对照组(P＜0.05),CD8+T细胞NKG2A表达与对照组相比无明显差异(P＞0.05).结论 EBV感染患儿NK细胞、CD8+T细胞NKG2D表达过度下调可能是导致免疫功能紊乱的原因之一,IL-15及IL-12等细胞因子调控失衡,sMICA血浓度增高等多种因素可能与其NKG2D表达下调有关.
关键词： EB病毒 传染性单核细胞增多症 NKG2D -
吡罗昔康提高γδT细胞杀伤胃癌细胞的机理探讨
目的 探讨吡罗昔康提高γδT细胞杀伤胃癌细胞的作用机理.方法 按常规方法培养γδT细胞,以不同浓度吡罗昔康诱导,收集培养上清液用于细胞因子IFN-γ、TNF-α、IL-12检测,沉淀细胞用流式细胞仪测定穿孔素、粒酶B和NKG2D,并用乳酸脱氢酶释放法检测γδT细胞杀伤胃癌细胞活性.结果 培养前γδT细胞数为5.12%,培养后γδT细胞数为91.27%.吡罗昔康浓度为0.04 mmol/L时诱导的γδT细胞穿孔素和粒酶B表达高且明显高于对照组,差异均有统计学意义(P均<0.05);吡罗昔康能显著抑制γδT细胞NKG2D的表达,并随着药物浓度的增加抑制作用越明显;经吡罗昔康诱导的γδT细胞能抑制TNF-α的分泌,并且随着药物浓度的增加抑制作用越明显.吡罗昔康各浓度组诱导的γδT细胞对SGC-7901细胞杀伤活性与对照组比较差异无统计学意义(P＞0.05),但是对BGC-823细胞的杀伤活性,浓度在0.04mmol/L时作用强(76%),明显高于对照组(58%),与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05).结论 经吡罗昔康诱导后γδT细胞杀伤胃癌细胞BGC-823活性明显增高的机制可能与γδT细胞表达较高浓度的穿孔素和粒酶B有关.这些结果从细胞免疫方面为吡罗昔康能够防治胃癌提供了一定的实验依据.
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NKG2A、NKG2D在食管鳞癌不同病理分期的表达及其相关性分析
目的 分析不同病理分期食管鳞癌患者血清中自然杀伤细胞表面抑制性受体A(NKG2A)和自然杀伤细胞表面活化性受体D(NKG2D)表达水平的特点,探讨NKG2A和NKG2D在食管鳞癌不同病理分期的表达意义,并研究NK细胞、NKG2A、NKG2D与病理分期的相关性.方法 用流式细胞仪分析92例食管鳞癌患者及50例健康志愿者外周血NK细胞数量及其NKG2A和NKG2D的表达情况.结果 与正常对照组相比,食管鳞癌患者外周血NK细胞表达增加[(9.97±4.25)% vs.(16.22±8.91)%,t′=-5.646,P<0.01],NK细胞表面NKG2A的表达水平升高[(35.19±17.73)% vs.(47.35±18.88)%,t=-3.742,P<0.01],NKG2D的表达水平降低[(83.20±3.85)% vs.(80.60±9.09)%,t′=1.925,P=0.019];食管鳞癌患者NKG2A/NKG2D的比值与其病理分期呈正相关性(r=0.333,P<0.01),行线性回归分析得F=7.413,P=0.008,按α=0.05水准,回归方程为:Y(NKG2A/NKG2D的比值)=0.105X(食管鳞癌病理分期)+0.347;R2=0.276.结论 食管鳞癌患者机体NK细胞数目增多,NKG2A/NKG2D比值与食管鳞癌病理分期进展呈正相关;降低NKG2A,提高NKG2D的表达水平,能增强NK细胞对肿瘤的杀伤活性,从而为食管鳞癌的免疫治疗开创新的思路.
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NKG2D及其配体在消化系肿瘤中的研究进展
NKG2D为NK细胞表面的C型凝集素样活化性受体,其配体主要表达于炎性细胞和肿瘤细胞表面,在正常细胞表面很少表达甚至不表达.近来实验证实肿瘤细胞中,NKG2D表达下调,而其可溶性配体的表达明显增加,NKG2D介导的抗肿瘤反应在天然免疫中起重要作用.越来越多研究者认为NKG2D及其配体对肿瘤的早期识别、诊断及治疗研究具有重要意义.本文就NKG2D及其配体的介绍、信号传导、肿瘤免疫,特别是消化系肿瘤中的研究现状和诊治中的应用等方面作一综述.
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双阴性T细胞在肿瘤免疫治疗中的研究进展
双阴性T细胞(即DNT细胞)是一种细胞表型为TCR+ CD3+ CD4-CD8-的特殊的调节性T细胞,分为αβT和γδT两群,在调节免疫反应中起着十分重要的作用.既往人们对DNT细胞研究主要局限于自身免疫性疾病和器官移植免疫方面.近年来,DNT细胞的过继免疫治疗作为一种新型的抗肿瘤方法逐渐走进公众的视野.本综述主要对DNT细胞来源分群、抗肿瘤作用及其可能的作用机制进行描述.
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肺癌患者外周血NKG2A和NKG2D表达及其临床意义的研究
目的:通过研究肺癌患者外周血中自然杀伤细胞(NK)表面抑制性受体NKG2A和活化性受体NKG2D表达,分析探讨NKG2A与NKG2D表达失衡与肿瘤免疫逃逸的关系及其临床意义.方法:采用流式细胞术检测101例肺癌患者(肺癌组)和81例健康对照者(对照组)外周血中NK细胞含量及其表面受体NKG2A、NKG2D表达情况,分析NKG2A、NKG2D的表达与肺癌临床生物学特征之间的关系.结果:肺癌组外周血中NK细胞含量高于对照组,差异有统计学意义,t=2.25,P=0.025;肺癌组外周血中NKG2A表达高于对照组,差异有统计学意义,t=-3.66,P=0.001；肺癌组中NKG2A/NKG2D比值高于对照组,差异有统计学意义,t=-3.98,P=0.001;在肺癌组中随着TNM分期(F=4.99,P=0.009)和PS评分(t=-2.01,P=0.041)的增加,NKG2A表达也表现逐渐增加,差异有统计学意义,t=-2.01,P=0.041.结论:肺癌患者外周血中NK细胞表面受体NKG2A、NKG2D表达失衡,可能是肺癌发生免疫逃逸的机制之一.
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晚期肺癌患者外周血Treg细胞与NK细胞及其活化受体检测临床意义的探讨
目的:观察CD4+CD25highCD127low调节性T细胞(Treg细胞)、NK细胞及其活化受体(NKG2D)在初诊晚期肺癌患者外周血中的变化,探讨它们在肺癌发病中的作用及临床意义.方法:流式细胞术检测90例初诊晚期肺癌患者及45位健康人外周静脉血CD4+CD25highCD127olwTreg细胞、NK细胞及NKG2D的水平,并就其中27例患者化疗前后数据对比.结果:与对照组比较,肺癌组CD4+CD25highCD127lowTreg细胞比例明显升高,t=3.500,P=0.001；NK细胞比例及NKG2D的表达明显降低,t值分别为-3.534和-5.228,P值均为0.001.Ⅳ期患者CD4+CD25highCD127lowTreg细胞比例较ⅢA期患者明显升高,F=3.657,P=0.030.化疗后患者NK细胞及NKG2D较化疗前明显降低,t值分别为3.176和2.771,P值分别为0.004和0.01.化疗前后患者CD4+CD25highCD127lowTreg细胞水平差异无统计学意义,t=1.419,P=0.168.肺癌患者外周血CD4+CD25highCD127lowTreg细胞比例与NK细胞比例变化成负相关,r=-0.222,P=0.036.结论:Treg细胞增多可能是晚期肺癌患者免疫功能受抑的重要原因之一,其与NK细胞及NKG2D联合检测可作为监视晚期肺癌患者免疫状态的参考指标.
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食管癌患者外周血自然杀伤T细胞及其表面受体NKG2A与NKG2D检测的临床意义
目的 研究外周血中自然杀伤(NK)T细胞及其CD+8NKT细胞亚群在食管癌患者与健康人中的表达水平及NKT细胞活性改变.探讨NKT细胞受体与临床病理分期的相关性及其临床意义.方法 采用流式细胞术分析53例食管癌患者及39名健康对照者外周血中NKT细胞及CD+8NKT亚群,检测NKT细胞受体NKG2A和NKG2D的表达并结合临床病理因素作比较分析.结果 与健康对照组相比,食管癌患者外周血NKT细胞表达增加[(4.32±0.73)%,(5.97±1.29)%](t=3.562,P<0.01),NKT细胞表面NKG2D的表达水平降低[(17.56±5.92)%,(15.12±1.56)%](t=3.892,P<0.05),而NKG2A的表达水平升高[(4.02±1.41)%,(5.99±4.59)%](t=4.015,P<0.05),且其变化与食管癌的病情进展有关.结论 NKT细胞及其CD+8NKT亚群在食管癌患者中表达增加,提示患者机体抗肿瘤效应的免疫反馈增强;NKT细胞表面活化性受体NKG2D表达减少与其表面抑制性受体NKG2A表达增加可能是致使NKT细胞活性降低及食管癌患者免疫逃逸的机制之一,且这种NKT细胞表面受体的变化和食管癌病情的发展有一定的相关性.
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肺癌患者调节性T细胞与NK细胞活化受体NKG2D的相关性及其临床意义
目的 分析肺癌患者外周血中CD+4 CDHi25 CDLo127调节性T细胞及自然杀伤细胞(NK细胞)活化受体NKG2D的表达水平之间的关系,探讨其在肿瘤免疫逃逸机制中的作用及临床意义.方法 选择70例肺癌患者,均经病理确诊.采用流式细胞术(FCM)检测患者外周血中CD+4 CDHi25 CDLo127调节性T细胞、NK细胞及NKG2D表达水平,并以50名健康人为对照.结果 肺癌患者外周血中CD+4 CDHi25 CDLo127调节性T细胞比例较健康对照组明显升高[(8.4±4.1)％与(6.7±1.7)％],差异有统计学意义(t=3.09,P＜0.05)；肺癌组NK细胞比例与健康对照组比较[(15.6±8.3)％与(17.2±4.2)％],差异无统计学意义(t=-1.33,P＞0.05)；肺癌组NKG2D较健康对照组明显降低[(83.3±4.9)％与(87.4±2.9)％],差异有统计学意义(t=3.16,P＜ 0.05).CD+4 CDHi25 CDLo127调节性T细胞与NKG2D呈负相关性(r=-0.302,P＜0.05).结论 在肺癌患者外周血中调节性T细胞可能通过下调NKG2D,参与肿瘤免疫逃逸机制,二者可作为评估肺癌患者免疫功能状态及预后的参考指标.
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肺癌患者外周血CD+8自然杀伤T细胞表面受体NKG2D和NKG2A表达的临床意义
目的 检测肺癌患者外周血CD+8自然杀伤(NK)T细胞表面受体NKG2D和NKG2A的表达,探讨二者表达失衡与肺癌免疫逃逸的关系.方法 选择95例原发未治疗的肺癌患者,采用流式细胞术检测CD+8NKT细胞表面受体NKG2D和NKG2A的表达,以50名健康人为对照.结果 肺癌组CD+8NKT细胞NKG2D+表达率[(77.07±5.77)%]明显低于对照组[(84.13±4.49)%],差异有统计学意义(t=8.14,P<0.05);在TNM分期中,Ⅰ～ⅢA、ⅢB、Ⅳ期患者CD;NKT细胞NKG2D+表达率依次为(81.07±5.02)%、(76.95±4.70)%、(72.80±5.16)%,差异有统计学意义(F=18.74,P<0.05).肺癌组CD+8NKT细胞NKG2A+表达率[(33.58±8.82)%]明显高于对照组[(25.31±8.38)%],差异有统计学意义(t=-5.46,P<0.05);在TNM分期中,Ⅰ～ⅢA、ⅢB、Ⅳ期患者CD+8NKT细胞NKG2A+的表达率依次为(25.10±6.93)%、(33.24±3.76)%、(43.64±6.10)%,差异有统计学意义(F=75.73,P<0.05).结论 肺癌患者CD+8 NKT细胞表面NKG2A和NKG2D表达失衡可能抑制该细胞的杀伤功能,而这可能是肿瘤免疫逃逸的机制之一.
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食管癌、贲门癌患者外周血CD+8NKT细胞活化受体NKG2D及其分泌性配体sMICA检测的临床意义
目的 探讨外周血CD+8 NKT细胞活化受体NKG2D及其分泌性配体sMICA检测在食管癌、贲门癌诊断及术后疗效评价中的临床意义.方法 对53例患者确诊后(29例手术患者术前14 d及术后14 d)及30名健康对照组采用流式细胞术对外周血CD+8NKT细胞中活化受体NKG2D阳性细胞百分比测定,应用酶联免疫吸附法进行sMICA含量测定,并各自进行差异性分析,同时对两者进行依从性分析.结果 患者外周血CD+8NKT细胞中NKG2D阳性细胞百分比为(77.632±8.972)%,明显低于对照组的(89.053±6.515)%(t=-6.113,P＜0.05);TNM分期Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ期患者依次降低(F=99.251,P＜0.01);有区域淋巴结转移者均低于无区域淋巴结转移者(沁-10.384,P＜0.01);鳞状细胞癌高于腺癌(t=9.899,P＜0.01);术前均低于术后(t=-4.319,P＜0.01).患者血清sMICA的含量为(326.28±85.407)pg/ml,明显高于对照组的(210.00±22.560)pg/ml(t=7.292,P＜0.01);Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ期患者依次增高(F=63.355,P＜0.01);有区域淋巴结转移者均高于无区域淋巴结转移者(t=7.770,P＜0.01);鳞状细胞癌低于腺癌(t=-7.593,P＜0.01);术前均高于术后(t=7.027,P＜0.01).血清sMICA对外周血CD+8NKT细胞活化受体NKG2D有抑制作用(F=142.773,P＜0.05),决定系数R2=0.7368.结论 外周血CD+8NKT细胞活化受体NKG2D及其分泌性配体sMICA含量的测定有助于食管癌、贲门癌分期的临床辅助诊断,对判断其生物学行为及预后有重要临床意义,并可作为患者手术治疗效果指标.
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NK细胞活化性受体NKG2D及其配体MICA在胃肠道肿瘤免疫逃逸机制中的作用
目的 了解胃肠道肿瘤患者血清可溶性MICA(SMICA)的水平及其与自然杀伤(NK)细胞活化性受体NKG2D的关系,探讨NKG2D-MICA在胃肠道肿瘤免疫逃逸机制中的作用,为胃肠道肿瘤免疫治疗打下实验和理论基础.方法 选择123例胃肠道肿瘤患者,均经病理证实.ELISA法检测血清sMICA含量,同时检测患者NK细胞活化性受体NKG2D表达水平.取30名健康人血清作对照.结果 健康人sMICA水平(225.46±36.65)pg/ml,胃癌无远处转移患者(337.59±60.20)Pg/nd(P<0.01),肠癌无转移患者(372.68±53.61)pg/ml也明显高于健康人(P<0.01).有远处转移的胃癌患者血清sMICA(391.52±51.68)Pg/nd高于无转移患者(P<0.05),同样有远处转移肠癌患者血清中sMICA含量(452.45±56.13)pg/ml高于无转移患者(P<0.05).患者NK细胞活化性受体NKG2D表达率,在无转移的胃癌患者中为(78.95±3.39)%,肠癌中为(76.00±7.22)%,均低于健康人(82.58±4.36)%(P<0.05),而有远处转移的胃癌患者表达率为(73.65±5.38)%,低于无转移的患者(P<0.01),有远处转移的肠癌患者表达率为(70.14±5.62)%,低于无转移的肠癌患者(P<0.05).结论 胃肠道肿瘤患者sMICA水平明显增高,可能是肿瘤细胞表面MICA脱落所致.NKG2D的表达低于健康对照组,提示患者NK细胞的NKG2D-MICA杀伤肿瘤细胞效应减弱,这可能是肿瘤免疫逃逸的重要机制之一.
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IL2、IL15对NK细胞KIR3DL1、NKG2D表达的影响
目的 研究细胞因子IL-2、IL-15对人外周血来源的自然杀伤细胞(Nature Killer,NK)细胞表面功能相关分子杀伤细胞免疫球蛋白样受体(Killer Cell Imnmoglobulin-like Receptor,KIR3DL1)、NKG2D表达的影响.方法 采用miniMACS免疫磁珠从外周血单个核细胞(PBMNC)分选得到纯化的NK细胞,在IL2、IL15作用下培养15d,检测培养前后在不同效靶比下对靶细胞(K562)的杀伤作用变化,之后流式细胞仪检测培养前后NK细胞KIR3DL1、NKG2D表达变化;结果经IL2、IL15培养15d后的NK细胞对K562细胞的杀伤率在不同效靶比下均较培养前增强(P＜0.01);同时NK细胞KIR3DL1表达下降约10%(P＜0.05),NKG2D在培养前后均高表达(99%);结论经IL2和IL15长期体外培养后,KIR3DL1表达轻微下调,是NK细胞杀伤功能增强的原因之一.
关键词： 自然杀伤细胞 白介素2 白介素15 杀伤细胞免疫球蛋白样受体 NKG2D -
RhIL-21对NK-92MI细胞生物学活性的影响
目的 探讨rhIL - 21对NK -92MI细胞免疫功能的影响.方法 以不同浓度(25～100ng/ml)的rhIL - 21培养NK-92MI细胞24 - 72h,观察NK -92MI细胞的增殖.以50ng/ml的rhIL - 21处理NK -92MI不同时间后,FACS检测NK -92MI细胞的凋亡,NK -92MI细胞表面NKG2D受体及胞内颗粒酶-B蛋白的表达；细胞杀伤试剂盒检测NK - 92MI细胞对靶细胞K- 562的细胞毒效应；RT - PCR检测NK -92M1受体NKG2D,效应分子颗粒酶-B、穿孔素及细胞因子IFN -γ基因mRNA的表达；ELISA检测其分泌IFN -γ的水平.结果 RhlL - 21虽能抑制NK - 92 MI细胞的增殖(P＜0.05),但不会促进细胞的凋亡(P＜0.05).RhIL - 21能促进NK-92MI细胞穿孔素、IFN -γ、颗粒酶-B、NKG2D受体基因及相应蛋白质的表达上调(P＜0.05).rhIL - 21预处理组NK -92MI对K- 562细胞的细胞毒效应也明显增强(P＜0.05).结论 RhIL -21能增强NK - 92 MI细胞的细胞毒效应,IL -21在肿瘤的免疫治疗中有潜在临床应用价值.
