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支气管哮喘小白鼠支气管肺泡灌洗液中TGF-β含量的变化
气道重构(airway remodeling)是难治性支气管哮喘气道发生不可逆性气流阻塞及持续性非特异性气道高反应性的重要原因之一.TGF-β是分子量约25kD的蛋白质,近报道TGF-β具有刺激纤维母细胞促进纤维结合素及胶原的等间质成分的产生[1],于是推测TGF-β在支气管哮喘气道重构中可能起重要的作用.
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应用纤维结合素建立新型兔腰椎间盘退变模型
目的 应用兔椎间盘内显微注射纤维结合素片段(Fn-f)的方法建立新型动物椎间盘退变模型.方法 34只新西兰大白兔随机分为3组:实验组(16只),L1～2,L2～3,L3～4,L4～5椎间盘髓核内显微注射30 kDa的Fn-f 25 μl；对照组(16只)相应髓核内注射磷酸盐缓冲液(PBS) 25 μl;空白组(2只)不做处理.术后4、8、12周处死实验组及对照组各4只兔,对髓核组织切片行番红O染色和HE染色,采用35S整合分析法检测髓核蛋白多糖合成.实验组和对照组中各取4只兔分别于术前及术后4、8、12和16周行腰椎数字化X射线摄影(DR)检查,测量计算椎间盘高度指数(DHI),术后16周处死,行番红O染色、HE染色和蛋白多糖合成测定.空白组2只兔处死后检测髓核蛋白多糖合成.结果 实验组兔椎间盘髓核细胞数目进行性减少,内层纤维环结构紊乱、破坏；髓核区4周后出现进行性缩小,术后16周髓核区消失,与内层纤维环组织不能分辨.实验组兔椎间盘蛋白多糖合成率进行性下降(F =263.241,P=0.000)；术后各时间点,实验组兔椎间盘蛋白多糖合成率均较对照组显著降低(t=-27.010～-2.833,P＜0.05).术后8周DR示造模椎间隙开始出现明显狭窄,进行性加重,12周时椎间盘及临近椎体前方出现骨赘,16周时骨赘增生明显.术后4周,实验组与对照组DHI百分比(DHI％)分别为96.5％±1.7％和97.4％±1.2％,差异无统计学意义(P＞0.05)；术后8、12和16周,实验组DHI％分别为85.6％±3.8％、77.2％±3.5％和65.5％±5.6％,均较对照组明显减低(t=-21.225 ～-10.795,P＜0.01).结论 显微注射Fn-f可使兔腰椎间盘发生缓慢的、进行性的、与人椎间盘自然退变过程相似的退变,具有较好的模拟性和重复性,为椎间盘退变分子水平的研究提供了一种新型的、实用的动物模型.
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纤维结合素对HBV感染原代培养人胎肝细胞的影响
目的研究纤维结合素对HBV体外感染原代培养人胎肝细胞的影响.方法用纤维结合素包被培养皿,利用从HBV阳性血清纯化的HBV病毒颗粒感染体外培养的人胎肝细胞.应用ELISA法检测培养上清中HBsAg和HBeAg,免疫组化法检测细胞核中HBcAg,荧光定量PCR法检测细胞中HBV DNA,巢式PCR法检测细胞中 cccDNA,并和未包被的胎肝细胞进行对照.结果未包被时上清中HBsAg和HBeAg于第5日出现阳性,包被后自第1日起出现阳性;未包被时胎肝细胞核中HBcAg于感染后第2日起出现阳性,阳性率为10%～15%,包被后自第1日起出现阳性,阳性率达90%以上;未包被时细胞中HBV DNA定量自第4日起检出,包被后自第1日起检出;未包被时细胞中HBV cccDNA自第8日出现阳性,包被后自第2日起出现阳性.结论纤维结合素包被可以促进HBV体外感染原代培养人胎肝细胞,使HBV感染胎肝细胞的时间提前,感染细胞的数量增加.
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妊高征患者血浆同型半胱氨酸与纤维结合素关系的探讨
目的探讨妊娠高血压综合征(妊高征)患者血浆同型半胱氨酸(Hcy)和纤维结合素(FN)含量的关系.方法采用荧光标记免疫检测法检测43例妊高征患者(轻度12例,中重度31例)、67例正常晚孕妇女和15例正常非孕妇女血浆Hcy含量.用免疫扩散法测定血浆FN的含量.结果正常晚孕组血浆Hcy和FN显著高于正常非孕组(P均﹤0.05);轻度妊高征血浆Hcy和FN与正常晚孕组比较无显著差异(P均﹥0.05);中重度妊高征患者血浆Hcy和FN较轻度妊高征患者及正常晚孕组显著升高(P均﹤0.01).妊高征组血浆Hcy与FN含量间呈正相关(r=0.637,P<0.01).结论高同型半胱氨酸血症可能与妊高征内皮细胞损伤有关.
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充血性心力衰竭肾脏致纤维机制的研究
目的观察不同程度充血性心力衰竭时肾脏转移生长因子β1(TGF-β1)和纤维结合素(FN)的改变以及血管紧张素转换酶抑制剂福辛普利对其的影响.方法将SD大鼠通过腹主动脉-下腔静脉穿刺造瘘和冠状动脉结扎的方法建成不同的心力衰竭模型,并对冠状动脉结扎大鼠予福辛普利治疗.通过Doppler超声心动图比较心功能的各项参数,并采用免疫组织化学和逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)方法检测肾脏TGF-β1和FN的基因和蛋白表达.结果穿刺造瘘大鼠的心功能损害较轻.而冠状动脉结扎大鼠心功能严重失代偿.福辛普利可以部分缓解冠状动脉结扎大鼠的心肌肥厚和受损的心功能.两组心力衰竭大鼠肾脏TGF-β1的基因和蛋白水平以及FN的蛋白表达明显增强(P＜0.001).福辛普利能显著改善冠状动脉结扎大鼠肾脏TGF-β1和FN表达的异常.结论充血性心力衰竭早期即出现肾脏TGF-β1和FN的表达增加,福辛普利通过下调其表达,可能会对预防和治疗肾脏病变的发生和发展有一定的帮助.
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重组FN多肽CH50及IFN-γ对化疗小鼠免疫功能影响的比较
腹腔连续注射CH50或腹腔内转染IFN-γ基因能减弱或防止化疗药物对免疫功能的抑制作用,减轻或防止化疗药物使外周血单核细胞数量和腹腔细胞的数量降低(P＜0.05),促进巨噬细胞代谢活性、杀瘤活性以及分泌细胞因子的能力(P＜0.05, ＜0.01);促进脾淋巴细胞的增殖反应能力(P＜0.05,＜0.01).注射CH50的作用早于IFN-γ基因转染的作用.结果提示CH50可改善肿瘤化疗药物疗效.
