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三氮唑席夫碱衍生物诱导SMMC-7721细胞分化为多倍体巨细胞
目的 探讨三氮唑席夫碱衍生物(LH-37)诱导SMMC-7721细胞形成多倍体巨细胞的作用.方法SMMC-7721细胞以1×104/ml的浓度接种于含1 X 10-5mol/L LH-37的培养液内72h,流式细胞术分析DNA含量,Hcechst33258和碘化丙啶双染观察细胞死亡,免疫荧光检查微管和核纤层构造,透射电镜观察巨细胞超微结构.结果 LH-37作用SMMC-7721细胞72h,巨细胞明显增加,单核巨细胞和多核巨细胞分别为12.32%和0.92%.可见多核巨细胞子核放射状排列,微管增厚并包裹子核,形成单一的微管组织中心,放射状排列的子核被完整的核纤层分割包绕,大部分多核巨细胞凋亡.单核巨细胞的微管常围绕核膜凝集,同时向细胞膜方向放射状分布,可见异常的有丝分裂和凝集的染色质,电镜下可见一些单核巨细胞凋亡时伴有自吞噬特征.结论 LH-37通过干扰微管动力学,导致多倍体巨细胞增加和延迟性细胞死亡.
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野百合碱诱导胰腺癌细胞BxPC-3呈巨型多倍体化研究
目的 观察野百合碱体外诱导人胰腺癌细胞株BxPC-3形成多倍体巨细胞的作用.方法 BxPC-3细胞以1×104/mL的浓度接种于含野百合碱(0、5、10、20 μg/mL)的RPMI 1640培养液内72 h,Giemsa染色分析细胞形态,流式细胞术分析DNA量,Annexin V-FITC/PI双标法流式细胞术观察野百合碱对BxPC-3细胞凋亡的诱导作用,染色体展示分析野百合碱处理后BxPC-3多倍体巨细胞的染色体组,Western blotting检测周期蛋白Cyclin B1的表达.结果 Giemsa染色显示,多倍体细胞体积大,多核.流式细胞仪检测细胞DNA量表明,野百合碱处理72 h出现4N、8N巨型BxPC-3多倍体细胞,诱导细胞凋亡,下调Cyclin B1蛋白表达,并与野百合碱的质量浓度呈依赖关系.染色体展示分析再次证明了巨型多倍体细胞的形成.结论 野百合碱通过抑制周期蛋白Cyclin B1的表达,导致多倍体巨细胞增加,出现4N、8N巨型BxPC-3多倍体细胞,促使BxPC-3细胞凋亡或死亡.
关键词: 野百合碱 胰腺癌细胞 多倍体巨细胞 周期蛋白CyclinB1 细胞凋亡 -
内复制及其在肿瘤发生发展中的作用
大多数的二倍体细胞通常通过G1期(DNA合成前期)、S期(DNA合成期)、G2期(DNA合成后期)和M期(分裂期)经典细胞周期完成细胞增殖.然而,在动、植物中也广泛存在着一种与有丝分裂不同的细胞周期过程,即内复制.在内复制过程中,G期和S期交替出现,细胞并不发生分裂,导致产生多倍体细胞.内复制在人体的正常发育、器官形成、创伤愈合过程中必不可少.近年来,越来越多的研究关注内复制与肿瘤发生、演进的关系.本文就内复制的生理作用做一概述,并讨论内复制在肿瘤发生、发展中的可能作用及相关分子机制.