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创伤性骨折患者艰难梭状芽孢杆菌感染流行病学调查
目的 调查创伤性骨折患者艰难梭状芽孢杆菌感染流行病学,为临床疾病感染防控提供指导. 方法 收集289例创伤性骨折患者临床资料,检测患者粪便样本中艰难梭状芽孢杆菌感染情况.调查患者血清炎症因子水平及临床指标,并进行统计学分析. 结果 289例创伤性骨折患者中,艰难梭状芽胞杆菌感染113例,感染率39.10％.男性患者艰难梭状芽孢杆菌感染率46.94％,女性30.99％,差异有统计学意义(x2=7.719 5,P＜0.05);白细胞＜3.0×109/L患者感染率48.57％,白细胞≥3.0×109/L患者感染率30.20％,差异有统计学意义(x2=10.229 2,P＜0.05);使用抗菌药物患者感染率45.86％,未使用抗菌药物患者感染率31.06％,差异有统计学意义(x2=6.595 7,P＜0.05);合并胃肠道疾病患者感染率47.02％,未合并胃肠道疾病患者感染率30.43％,差异有统计学意义(x2=8.329 1,P＜0.05).年龄＜50岁患者感染率35.63％,≥50岁患者44.35％,差异无统计学意义(x2=2.208 8,P＞0.05);体温＜38 ℃患者感染率36.65％,体温≥38 ℃患者感染率42.19％,差异无统计学意义(x2=0.919 6,P＞0.05).艰难梭状芽孢杆菌感染患者血清炎症因子PCT、hs-CRP以及IL-6水平显著高于未感染组.艰难梭状芽孢杆菌检出阳性组患者ADL评分显著低于阴性组,阳性组住院时间显著长于阴性组. 结论 男性、白细胞数高、使用抗菌药物、以及合并胃肠道疾病患者发生艰难梭状芽胞杆菌感染率较高.艰难梭状芽孢杆菌感染引起患者机体炎症水平升高,降低ADL评分,延长患者住院时间,影响患者预后.
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异基因造血干细胞移植过程中患者艰难梭菌感染与肠道微生态失调关系的临床研究
本研究探讨异基因造血干细胞移植(allogeneic hematopoietic stem cell transplantation,allo-HSCT)过程中患者艰难梭茵相关性腹泻(clostridium difficile associated diarrhea,CDAD)与肠道微生态的关系,了解肠道微生态失衡的临床特征,寻找有效防治措施,保护肠道茵群,减少细茵易位及感染的发生.对44例allo-HSCT后腹泻患者采用艰难梭茵毒素A&B检测试剂盒进行毒素检测,采用厌氧培养方法进行艰难梭茵的分离、鉴定.对患者粪便标本进行肠道微生态研究;采用光冈复合式法对目的菌群(双歧杆菌、乳酸杆菌、类杆菌、消化链球茵、产气荚膜梭菌、肠杆菌、肠球菌、酵母茵)进行定性定量分析.结果表明:44例腹泻患者中共检测出12例艰难梭茵阳性,阳性率为27.27%;CDAD的发生与使用抗生素或化疗药物有关;CDAD患者的肠道微生态发生了明显变化,表现为乳酸杆菌、双歧杆茵、类杆茵、肠杆茵等细菌数量明显下降;对CDAD用万古霉素、甲硝唑等药物并配合给予益生茵治疗效果好,但有一定复发率(16.67%).结论:allo-HSCT并发CDAD与肠道微生态的改变有关,应用敏感抗生素治疗的同时应积极扶植肠道茵群,这样的治疗有利于改善病情和减少复发.
关键词： 异基因造血干细胞移植 艰难梭茵相关性腹泻 艰难梭状芽孢杆菌 肠道茵群 抗生素 -
创伤性骨折患者艰难梭状芽孢杆菌感染的流行病学调查及对临床预后的影响
目的 探讨创伤性骨折患者艰难梭状芽孢杆菌感染的流行病学调查及对患者临床预后的影响,为创伤性骨折患者艰难梭状芽孢杆菌感染的临床预防提供可靠依据.方法 选择2012年5月-2016年5月医院骨科收治的创伤性开放性骨折合并腹泻患者185例,将检出艰难梭状芽孢杆菌感染28例患者作为阳性组,再选择60例无艰难梭状芽孢杆菌感染患者作为阴性组,分析艰难梭状芽胞杆菌感染危险因素、艰难梭状芽胞杆菌感染对患者血清炎症因子水平的影响以及对患者日常生活能力(ADL)评分及住院时间的影响.结果 送检185份标本中,共检出艰难梭状芽孢杆菌毒素检测阳性28份,阳性率15.14％;单因素及多因素logistic分析显示,合并胃肠道疾病及腹泻天数为创伤性开放性骨折患者发生艰难梭状芽胞杆菌感染的独立危险因素;艰难梭状芽孢杆菌感染阳性组患者其血清降钙素原(PCT)、白细胞介素-6(IL-6)、超敏C-反应蛋白(hs-CRP)水平显著高于阴性组,差异有统计学意义(P<0.05);艰难梭状芽孢杆菌检出阳性组患者其ADL评分显著低于阴性组,差异有统计学意义(P<0.05),阳性组住院时间显著长于阴性组,差异有统计学意义(P<0.05).结论 合并胃肠疾病及长时间腹泻是创伤性开放性骨折住院患者艰难梭状芽孢杆菌感染的独立危险因素,艰难梭状芽孢杆菌感染将引起患者机体炎症水平的升高,影响患者预后.
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脓毒性休克合并艰难梭状芽孢杆菌感染的危险因素分析
目的 艰难梭状芽孢杆菌是导致重症患者预后不良、住院时间延长的主要因素,本研究旨在分析脓毒性休克患者并发艰难梭状芽孢杆菌感染的危险因素.方法 回顾性分析2015年1月-2016年12月宁波市第二医院收治的218例脓毒性休克患者的临床资料,根据是否并发艰难梭状芽孢杆菌感染,将患者分为感染组(n=56)和未感染组(n=162).比较2组临床特征及干预情况,并采用多因素Logistic回归分析方法分析艰难梭状芽孢杆菌感染的危险因素.结果 感染组患者入院时APPACHEⅡ评分≥20分(57.14％ vs.31.48％,P=0.001)、血乳酸水平≥4 mmol/L(67.86％ vs.46.91％,P=0.007)、肾功能衰竭(71.43％ vs.46.30％,P=0.001)、肺功能衰竭(75.00％ vs.54.32％,P=0.007)、多脏器功能衰竭(51.79％ vs.30.86％,P=0.005)、抗菌药物使用时间≥14 d(60.71％ vs.41.98％,P=0.015)、PPI使用时间≥14 d(60.71％vs.44.44％,P=0.036)、血管活性药物使用时间≥7 d(41.07％ vs.25.93％,P=0.033)、行机械通气(62.50％ vs.40.74％,P=0.005)及血液滤过(50.00％vs.34.57％,P=0.041)的患者比例显著高于未感染组.多因素Logistic回归分析结果显示:入院时APPACHEⅡ评分≥20分和肺功能衰竭是脓毒性休克患者并发艰难梭状芽孢杆菌感染的独立危险因素(P＜0.05).结论 入院时APPACHEⅡ评分≥20分和肺功能衰竭是脓毒性休克患者并发艰难梭状芽孢杆菌感染的独立危险因素,对这类危重患者要加强监护和预防,以降低艰难梭状芽孢杆菌感染率.
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机械通气患者艰难梭状芽孢杆菌感染危险因素及预后分析
目的 探讨机械通气患者艰难梭状芽孢杆菌感染的危险因素,并分析其预后,为临床预防及治疗提供理论依据.方法 自2017年1月至2017年12月,连续性收集无锡市第二人民医院收治的机械通气患者382例,常规进行艰难梭状芽孢杆菌检测,共49例患者发生艰难梭状芽孢杆菌感染,分析不同临床特征患者艰难梭状芽孢杆菌感染率及危险因素,同时使用多因素回归分析探讨艰难梭状芽孢杆菌感染对患者院内死亡的影响.结果 使用抗生素≥3种、急性生理功能与慢性健康状况评分系统Ⅱ(acute physiology and chronic health evaluationⅡ,APACHEⅡ)评分≥20分、序贯器官衰竭评估(sequential organ failure assessment,SOFA)评分≥4分、机械通气时间≥14天、多器官功能衰竭、质子泵抑制剂使用时间≥14天、住院天数≥30天及死亡的患者艰难梭状芽孢杆菌感染率均显著升高(P均<0.05).多因素Logistic回归分析显示:APACHEⅡ评分≥20分、死亡、多器官功能衰竭、使用抗生素≥3种、机械通气时间≥14天是导致机械通气患者艰难梭状芽孢杆菌感染的危险因素(P均<0.05).多因素Logistic回归分析显示艰难梭状芽孢杆菌感染是机械通气患者院内死亡的危险因素(P<0.05).结论 机械通气患者艰难梭状芽孢杆菌感染率较高,可导致患者院内死亡率升高,应常规检测并加强干预.
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艰难梭状芽孢杆菌谷氨酸脱氢酶的原核表达、纯化及其酶活性
目的 原核表达艰难梭状芽孢杆菌(Clostridium difficile,CD)谷氨酸脱氢酶(Glutamate dehydrogenase,GDH),纯化重组蛋白,并检测其酶活性.方法 采用PCR法从标准株ATCC BAA-1805中扩增GDH基因,克隆至原核表达载体pET-28a(+)中,构建重组表达质粒pET-28-GDH,转化感受态大肠杆菌Rosetta(DE3),IPTG诱导表达.表达的重组蛋白经SDS-PAGE和Western blot分析,并通过Ni-NAT层析柱分离纯化后,根据脱氢酶酶活测定方法,测定纯化蛋白的酶活性.结果 重组表达质粒pET-28-GDH经双酶切及测序,证实构建正确,重组蛋白的相对分子质量约46000,可与抗His单抗特异性结合,主要以可溶性形式表达.纯化的目的蛋白纯度可达90％,浓度为1.7 mg/ml.纯化蛋白GDH以NADPH和NADP为辅酶,酶活性分别为42.6和63.3 U/L.结论 已成功在大肠杆菌中表达了重组CD GDH,纯化的目的蛋白纯度高,具有GDH酶活性,为制备GDH单克隆抗体奠定了基础.
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重症急性胰腺炎患者并发艰难梭状芽孢杆菌感染的危险因素
目的 探讨重症急性胰腺炎患者并发艰难梭状芽孢杆菌感染的危险因素.方法 前瞻性收集2016年1月至2017年1月收治的重症急性胰腺炎患者134例.根据患者住院期间是否发生艰难梭状芽孢杆菌感染,将患者分为感染组(n=45)和对照组(n=89),比较2组患者质子泵抑制剂使用情况及其他临床特征,同时采用多因素Logistic回归分析探讨艰难梭状芽孢杆菌感染的危险因素.结果 感染组质子泵抑制剂使用天数＜3d、＜7d、＜14 d和≥14 d的比例分别为2.22％、15.56％、26.67％和55.56％,对照组分别为13.48％、40.45％、31.46％和14.61％,差异有高度统计学意义(P＜0.01).与对照组比较,感染组患者APPACHE Ⅱ≥10、休克、腹腔感染、多器官功能衰竭、机械通气、抗生素使用≥7d比例显著增加(P＜0.05).多因素Logistic回归分析显示质子泵抑制剂使用≥14d、APPACHE Ⅱ≥10、机械通气、多脏器功能衰竭和休克是重症急性胰腺炎患者艰难梭状芽孢杆菌感染的危险因素(P＜0.05).结论 控制重症急性胰腺炎患者并发艰难梭状芽孢杆菌感染的危险因素:质子泵抑制剂使用≥14 d、APPACHE Ⅱ≥10、机械通气、多脏器功能衰竭和休克等,对积极预防艰难梭状芽孢杆菌感染具有重要意义.
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艰难梭菌的检测及临床分析
目的:了解我院艰难梭菌的感染流行情况,为防控院感爆发提供理论依据.方法:收集2016～2017年期间住院腹泻患者的大便标本,用艰难梭菌鉴别培养基显色培养,通过筛查菌落形态、 镜检,终依赖质谱鉴定.同时对大便标本使用酶联荧光免疫测定艰难梭菌毒素A/B.收集阳性患者的临床资料,分析艰难梭菌感染相关的危险因素.结果:收集的大便标本经厌氧培养及鉴定,艰难梭菌培养阳性率为16.5％,艰难梭菌毒素检出率为12.3％,差异无统计学意义.单因素分析发现头孢一代、 头孢三代、 抗生素联用是引起艰难梭菌感染的潜在危险因素.多因素分析发现头孢三代的使用是感染艰难梭菌的独立危险因素.结论:我院艰难梭菌存在一定流行情况,同时存在易感因素,应严密监测,积极预防及控制.
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实时荧光定量PCR法检测人粪便中艰难梭状芽孢杆菌
目的 摸索并明确实时荧光定量PCR技术检测人体肠道粪便中艰难梭状芽孢杆菌的方法.方法 用16S rRNAreal-time PCR方法检测喘息患儿与正常儿童肠道内梭状芽孢杆菌的数量.结果 常规PCR扩增出艰难梭状芽孢杆菌16S rRNA部分基因片段长度为500 bp ～750 bp,测序结果正确,符合预期,成功构建了艰难梭状芽孢杆菌实时荧光定量PCR中的标准品,生成的标准曲线r2＞0.995;实时荧光定量PCR产物的溶解曲线为单峰,表明实时荧光定量PCR的特异性强.对待测80份样本分批进行荧光定量PCR检测,各组间标准品Ct值的变异系数(CV)为4.96％、3.45％、2.46％、2.43％和2.75％.80份儿童粪便样本中艰难梭状芽孢杆菌含量的对数值为3.70 ±2.71(copy/g湿便).结论 本研究表明,实时荧光定量PCR方法操作简便、灵敏度高、特异性强、自动化程度高,适用于人体粪便中艰难梭状芽孢杆菌含量的检测.
关键词： 实时荧光定量聚合酶链式反应 引物 标准曲线 艰难梭状芽孢杆菌 -
使用Real-Time PCR粪便中检测艰难梭状芽孢杆菌
目的:探讨Real-Time PCR对粪便检测艰难梭菌的可行性.方法:以组织培养细胞毒素试验为标准,参考艰难梭菌的毒素A/B基因相应的引物和分子信标探针,对标准菌株和粪便提取的DNA实行Real-Time PCR扩增.结果:Real-Time PCR的敏感度为96.9%;特异性为100%;阳性预测值为100%;阴性预测值为98.3%.结论:Real-Time PCR与传统诊断方法相比具有快速、敏感、特异等优点,可以提高艰难梭菌的检测水平.
关键词： Real-time PCR 艰难梭状芽孢杆菌 tcd A tcd B -
中国部分地区艰难梭菌PCR-核糖体分型及毒素基因多态性研究
目的 了解中国部分地区艰难梭菌聚合酶链反应(PCR)-核糖体型别分布及其A、B毒素基因多态性,为建立适宜中国的艰难梭菌分子检测和分子分型技术提供基础数据,同时在基因水平上为艰难梭菌感染导致的复杂临床表现提供依据.方法 对中国3个城市(北京、广州、济南)分离的64株艰难梭菌临床株进行PCR-核糖体分型,并对不同型别的26株代表菌株的A、B毒素基因进行扩增测序.结果 64株艰难梭菌中,毒素基因型以A+B+型(45株,70.31%)为主,A-B+型19株(29.69%).共存在9种PCR-核糖体型别,以017型(21株,32.81%)为主要型别,其次为001型(13株,20.31%)、012型(11株,17.19%).A-B+菌株中,14株(73.68%)是017型,1株是001型.A、B毒素基因呈现一定的多态性,其中有7种A毒素序列型别(TSTA),6种B毒素序列型别(TSTB),8种A、B毒素序列型别组合(TSTG).结论 我国部分地区的艰难梭菌可能以PCR-核糖体017型为主,A、B毒素基因在菌株间存在多态性,且核糖体型别与毒素基因多态性间存在相对应的关联.应进一步扩大菌株数量和范围,探寻适合我国的分子检测和分子分型方法,从而帮助医院更好地预防和控制艰难梭菌感染.
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抗生素相关性腹泻的临床分析及治疗
目的:分析抗生素相关性腹泻(AAD)的发病特点,为临床制定有效的预防措施提供依据.方法:回顾性分析我院20062008年内科住院接受抗生素治疗的488份病历,对其中42份AAD的临床表现、抗生素使用情况以及治疗和转归等进行统计分析.结果:AAD的发病率为8.6%.应用抗生素时间超过7d、应用广谱抗生素、联合应用2种以上抗生素、年龄大于70岁等患AAD的发病率高于对照组(P<0.05).结论:合理应用抗生素是预防AAD的关键.
