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TaqMan实时荧光定量PCR检测艰难梭菌
目的 建立特异敏感的实时荧光定量PCR方法,用于艰难梭菌的快速检测;评价基于纯培养艰难梭菌和粪便中艰难梭菌的2种标准曲线;并应用该荧光定量PCR法对急性艰难梭菌感染(CDI)的小鼠进行粪便含菌量检测评价.方法 针对艰难梭菌基因组中16S rRNA序列设计特异性引物和探针,建立一套快速检测艰难梭菌含量的实时荧光定量PCR方法,验证方法的特异性、灵敏性;绘制艰难梭菌纯菌浓度梯度稀释标准曲线和粪便中同浓度梯度艰难梭菌的标准曲线,比较两者的差异;用艰难梭菌高毒株NAP1/027感染用抗生素处理的C57BL/6小鼠,建立CDI小鼠模型,同时应用该荧光定量PCR和活菌培养法定量检测小鼠粪便中的艰难梭菌含量变化.结果 建立的TaqMan实时荧光定量PCR具有较高的灵敏性和特异性,生成标准曲线的相关系数为0.999 8,斜率为-3.400 4;用纯培养艰难梭菌和粪便中艰难梭菌分别制备标准曲线,结果表明2种标准曲线定量检测结果差异无统计学意义.建立CDI小鼠模型,应用该荧光PCR能有效、准确的检测出粪便中艰难梭菌的含量,可替代费时费力的活菌培养计数法.结论 用纯培养艰难梭菌来制备标准曲线不影响对含菌粪便标本的准确定量检测,荧光定量PCR能准确快捷地检测CDI小鼠粪便中的艰难梭菌含量,比活菌计数更快速和方便,可用于艰难梭菌感染小鼠模型中小鼠肠道内艰难梭菌定植的定量检测.
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水质分析方法中标准曲线的绘制及安全检验分析
在分析测量工作中,标准曲线的绘制发挥着极为关键的作用与价值.文章将对水质分析方法中标准曲线的绘制问题加以说明,同时对安全检验情况进行分析,以便能够在一定程度上提升水质分析工作的效率与质量.
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应用酶联免疫吸附法快速检测水产品中孔雀石绿残留
采用酶联免疫吸附法同时测定水产品中孔雀石绿药物残留,并用标准溶液校准曲线、样品添加回收实验、方法比对实验,考察该方法。结果显示:该方法标准曲线良好,线性相关系数达到0.998以上;孔雀石绿检出限达到0.5μg/kg;对孔雀石绿两个不同添加浓度下的回收率计算结果在88.6%~106.6%之间,相对标准偏差小于10%。该方法检测分析孔雀石绿,快速灵敏、重现性好、成本低,可以用于水产品中孔雀石绿药物残留的快速检测。
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紫外分光光度法测定食品里的亚硝酸盐含量
基于酸性条件下亚硝酸盐与邻苯二胺反应生成的显色物质苯并三氮唑,本研究建立了一种紫外分光光度法测定食品里的亚硝酸盐含量的方法,亚硝酸根含量标准曲线为y=0.2373x-0.0017,R2=0.9999,其拟合度较高,线性范围为0~6μg/mL,且精密度、回收率均较好,RSD均小于5%。以此方法对市售散装卤猪肉、豆干、甜面酱和咸菜的亚硝酸盐含量进行检测,结果指出4种食物的亚硝酸根含量分别为(32.1±1.3)、(278.5±11.2)、(874.2±34.6)、(82.1±4.0)μg/mL,亚硝酸钠含量均超标,其中豆干、甜面酱严重超标。
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气相色谱法测定食品中苯甲酸、苯甲酸钠、山梨酸、山梨酸钾及注意事项
食品试样酸化后,利用苯甲酸、山梨酸易溶于乙醚的性质,用乙醚将食品中的苯甲酸、山梨酸提取出来,在气相色谱仪上进行分离测定,根据标准曲线求出食品中苯甲酸、苯甲酸钠、山梨酸和山梨酸钾的含量。
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如何在化学分析中正确使用回收率等质量控制方法
除了碳酸氢铵、次氯酸钠等一些易挥发、易分解的物质外,大部分化工产品的质量还是比较稳定的。对于一个质量稳定的分析对象,其检验数据的准确性再现性就必须达到一定要求,否则说明检验过程存在不可接受的误差。质量控制就是在化学分析过程中针对产生各种误差的来源进行分析,然后采取相应的技术措施,把各种误差减小到一定的限度。由于误差贯穿于分析检验全过程,涉及人员、设备、环境、检测方法、样品、测定过程、实验记录、数据的统计分析、分析结果的报出等方面,产生的因素较多,因此本文不能一一阐述,仅就分析检测过程中分析工作者不太重视的空白试验、回收率、标准曲线、质量控制图的正确使用等方面作简要探讨,其它方面不在讨论之列。
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ASC:180SE化学发光免疫分析仪常见故障排除
康宁 ASC: 180SE是一台任选式免疫分析仪,由一个自动处理轨道移动一次性的测试反应皿,移动中完成预热、加样、加试剂、孵育、分离以及测定过程,样本和试剂探针用来执行所有转运样本和试剂的动作,在进行磁性分离和清洗颗粒之后,加入试剂开始化学发光反应,光度计累积 5秒钟的信号,通过标准曲线将数据还原.
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SN-695型放免γ测量仪工作原理及故障检修2例
SN-695A型智能放免γ测量仪由上海原子核研究所日环仪器一厂生产,主要用于放射免疫分析的测定,它是由专用微机控制样品的换样和测量,数据处理,打印标准曲线及测量结果的全自动放免γ测量仪,具有参数存贮功能,是放射免疫测定中经济实惠的全自动γ测量仪.
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Wallac 1235全自动时间分辨荧光免疫分析仪维护
时间分辨荧光免疫分析法是用三价稀土离子(镧系元素:铕、铋、钐等)及其鳌合物为示踪剂来标记抗原、抗体、核酸探针或生物活性细胞等为特征的超灵敏度检测技术.三价稀土离子与抗原、抗体络合后,经过增强剂的增效处理,产生半衰期长、荧光度强的荧光,从而大大提高了检测的灵敏度.此方法具有灵敏度高、操作简便、示踪物稳定、有效期长、标准曲线范围宽、不受自然荧光干扰、无放射性污染等许多优点,已成为现代生物医学研究和临床超微量检验中的一项有发展前景的分析手段.目前是核素体外检测的顶尖技术和方法.
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XH-6020γ免疫计数器故障检修一例
故障现象:机器能够做出标准曲线,但做出的曲线图形不好,数据不准,不能够给临床提供可靠的依据.
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凝血酶原时间标准曲线半定量测定纤维蛋白原含量的方法的临床应用
目的:利用Control plasma建立一种简便、易于临床实验室开展的半定量纤维蛋白原(FiB)检测方法,并对其初步评价.方法:用亚硫酸钠手工法检测不同浓度FiB Reference plasma血浆的FiB含量,用其为参比血浆,用半自动血凝仪测其PT凝固时间及吸光度,建立PT凝固时间(s)参比血浆浓度(%)的曲线1,及FiB含量(g/L)与吸光度(E)的标准曲线2.利用标准曲线测定待检血浆FiB的含量(g/L).结果:血浆FiB含量与PT(s)及吸光度(E)有很好的相关性(r=0.992).单种试剂本法测定Control plasma血浆FiB值,重复性良好(CV<2%).本方法测定结果与手工法测定结果有很好的相关性(r=0.981).结论:本方法能检测患者血浆的FiB值,用半自动血凝仪检测PR时,简便,易行,重复性较好.对溶栓患者有很好的监测效果.
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探讨凝血象检查在临床应用中的体会
目前,各类医院在检查凝血象时应用不同的设备,检查凝血象时一般检查凝血酶原、部分活化凝血酶、纤维蛋白原和凝血酶等四项.因为凝血酶原和纤维蛋白原是根据标准曲线结合标本凝集时间的长短来计算其含量的.因此,使用曲线的准确度和被检测标本结果的准确度密切相关.除此之外,标本的合格与否与检查结果息息相关.
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奶粉中钙含量不确定度的测定
目的 测定奶粉中钙含量不确定度.方法 按《食品安全国家标准婴幼儿食品和乳品中钙、铁、锌、钠、钾、镁、铜和锰的测定》测定奶粉中钙的含量,通过对供试品称量过程引入的不确定度、待测供试品消化过程(回收率)引入的不确定度、待测样品的定容过程带来的不确定度、标准溶液的稀释过程带来的合成不确定度等因素进行分析.结果 奶粉里的钙的不确定度置信概率95%.结论 此方法测定奶粉里的钙方法可行.
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对消毒液中醋酸氯己定含量测定分析方法的研究
用紫外分光光度法对消毒液中醋酸氯己定含量进行了测定.结果,于252 nm波长,1 cm光程处有特征吸收峰;醋酸氯己定含量在0~30 μg/ml范围内线性关系良好,相关系数r=0.9999,低检出限为1.5μg/ml.对两种复方消毒剂中氯己定含量进行重复测定,相对标准偏差为3.2%.在消毒液中加入高、中、低三个加标浓度,其回收率在91.2~107.0%范围之内,相对误差1.83%.该法简易,灵敏,快速,准确,无毒无污染,是种值得推荐的好方法.
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一次性使用塑料血袋中铝离子含量的测定
测定一次性使用塑料血袋中金属铝(Al)的含量,判定其结果的准确性。
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Excel 2000在直线回归上的应用
Excel具有直线回归功能,而且使用非常简单,只需键入实验数据即可得到直线方程和标准曲线.1.建立新的工作簿,在A1、B1、C1单元格内键入No、X、Y,然后在A2~A6列键入实验顺序号1、2、3、4、5,B2~B6列分别键入X值20、40、80、160、320,C2~C6列分别键入Y值200、396、712、1 521、3 450.
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不同产地金樱子根、茎、果中多糖含量的比较研究
目的 通过测定4个不同产地的金樱子根、茎、果中多糖含量,初步探讨金樱子的根和茎是否能在一定程度上代替果实入药,为进一步解决金樱子药材资源匮乏问题提供科学依据.方法 采用紫外分光光度法对不同产地的金樱子中根、茎、果多糖含量进行测定.结果 4个产地金樱子根、茎的多糖含量都比果实的多糖含量低,且差异具有统计学意义.结论 金樱子根和茎不能代替果实入药.
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用放免法检测高浓度AFP、CEA和HCG血样的一点改进
放射免疫分析技术已普遍应用于临床, 近几年来我们用放免法检测高浓度的AFP、CEA和HCG血样时结果往往超出标准曲线的大值, 必须待结果出来稀释血样后再作测定, 既浪费试剂又要再等一天才能得到结果.
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RIA 标准曲线相关系数及斜率等质量参数求证分析对标准曲线直线化影响的初评
RIA标准曲线质量的优劣与标准管的平均偏倚度(DEV)%、曲线的相关系数(β)值和曲线的斜率(b)值等质量参数密切相关,不仅决定方法学优劣和样品结果准确,而且是拟合标准曲线直线化重要依据.本文重点阐明各管标准点的DEV(%)、So佳结合率、NSB结合率、S1和Sn结合率.并求证r、b、各标准点DEV(%)等和对样品(或质控)测值.现以T3及AFP为例报告如下.
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稀释介质对化学发光免疫分析检测血清HCG的影响
在临床检验工作中,有时检测项目的血清浓度较高,超出标准曲线可测范围,需稀释后复测.有些检测项目自动化仪器上配有专用稀释液,可进行稀释;在没有专用稀释液时,用什么稀释介质既方便又不影响结果的准确性?本文用生理盐水和零浓度血清作为稀释液,探讨两者对血清HCG测定值的影响.