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增加洗肾液对纯化地鼠肾细胞狂犬病疫苗收获率影响的分析
在纯化地鼠肾细胞狂犬病疫苗生产操作过程中解剖取肾对原倍疫苗的收获率起着很重要的影响.因此,我们在解剖取肾消化培养细胞过程中做了大量试验,观察和比较后发现,在其他条件一致的情况下,增加洗肾液(由8L灭菌Hank's液增加至12L)与不增加(8L灭菌Hank's液)两者相比,对原倍疫苗收获率的影响很大.
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全人源肝癌噬菌体单链抗体库的鉴定及筛选
目的:对全人源肝癌噬菌体单链抗体库进行鉴定,筛选肝癌抗体,同时对抗体的活性进行鉴定.方法:PCR鉴定阳性重组菌TG1中人肝癌ScFv的插入率.先以人成纤维细胞黏附后再以肝癌细胞SMMC-7721为抗原对所建抗体库进行3轮"黏附-洗脱-扩增"的亲和筛选.将筛选后的ScFv进行PCR鉴定及双酶切鉴定;通过ELISA法鉴定其与人肝癌细胞的结合活性.结果:ScFv基因插入率为70%.在亲和筛选过程中,肝癌噬菌体单链抗体得到富集,收获率逐轮得到提高,第3轮为第1轮的214倍.筛选后的ScFv进行PCR鉴定及双酶切鉴定后,均可检测到目的基因.得到3株特异性肝癌单链抗体.结论:利用噬菌体抗体库技术结合减数筛选得到了肝癌噬菌体单链抗体及其基因,且筛选后的抗体片段与人肝癌细胞有特异性的结合活性.
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乳鼠心肌细胞培养及纯化方法的改良
目的:改良乳鼠心肌肉细胞培养的方法,提高心肌细胞的单细胞收获率、存活率及搏动率.方法:在Simpson培养法的基础上探讨一种新的改良法,并将两种方法进行比较.结果:单细胞收获率1.60×106个/心脏;分离、消化后即刻、第5日及第8日的细胞布活率分别平均为(76.08±25.48)%、(93.32±28.67)%及(91.89±26.94)%;第5日及第8日的细胞搏动率分别平均是(91.63±25.33)%及(90.69±20.61)%,上述各项指标均高于Simpson法.结论:用改良法培养乳鼠心肌细胞时,单细胞收获率高、细胞存活率、心肌细胞和非心肌细胞分离彻底、心肌细胞纯度高.
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快速纯化甲型肝炎病毒及相关性状的检测
甲型肝炎病毒(HAV)在宿主细胞的胞浆内增殖,很少释放到细胞培养的上清液中,因此,给病毒的纯化带来一定困难.本实验室针对制备甲肝诊断试剂盒所需大量病毒抗原问题,对提高抗原的收获率、浓度和纯度等方法进行改良,建立了以冻融、超声,聚乙二醇(PEG)浓缩,蔗糖/甘油不连续密度梯度离心为主要步骤的快速纯化HAV的方法,并对得到的纯化病毒样品进行相关的性状检测.现将结果报告如下.
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改良毛乳头细胞培养法
毛乳头位于毛囊底部的毛球中，周围包绕着毛母质细胞，主要由毛乳头细胞组成。由于毛乳头的空间位置，给毛乳头的分离培养带来了一定困难，我们采用二步酶消化法分离毛乳头，缩短了分离时间，降低了工作强度，同时还提高了收获率。现将结果报道如下。
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不同地域血浆多项指标检测及蛋白收获率分析
目的 调查不同地域所供原料血浆多项指标复检情况,并对其检测结果和血浆蛋白收获率进行初步分析.方法 按国家<血液制品原料血浆规程>规定方法对所供原料血浆进行检测.结果 各合约单采血浆站采集的原料血浆复检合格率从1999年的99.62%上升至2006年的99.98%;其混合血浆蛋白因地域而略有不同;用同一工艺制备的人血白蛋白、免疫球蛋白收获率的差异有统计学意义(P<0.05).结论 随着国家不断加大单采血浆站的管理力度,体外诊断试剂特异性、精密性和灵敏度不断提高.复检合格率逐步上升.
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一种提高新生大鼠原代培养心肌细胞收获率的方法
由于培养的心肌细胞去掉了在体内心肌细胞的各种影响限制因素,作为实验工具具有简便、精确、重复性好等优点,现已广泛用于电生理、受体、药理及毒理、分子生物学等研究领域中.我们在新生大鼠心肌细胞原代培养的实验中,改进了以往心肌细胞制备方法,大大提高了心肌细胞的获得率,有效地提高了实验的成功率.
