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基于核酸序列的扩增技术在异基因外周血干细胞移植后受者HCMV感染诊断的应用
本研究探讨基于核酸序列的扩增技术(nucleic acid sequence based amplification,NASBA)检测mRNA对异基因外周血干细胞移植受者术后人类巨细胞病毒(HCMV)感染的诊断价值,并评价该技术对抗病毒治疗的指导意义.以128例移植术后患者为研究对象,采集移植术后外周血352份;利用NASBA检测外周血中HCMV基质外壳蛋白PP67(UL65)mRNA,并与HCMV DNA的结果进行比较.结果表明:352份血标本中,HCMV mRNA阳性105份(29.83%),HCMV DNA阳性183份(51.99%).128例患者术后有45例发展为HCMV病, HCMV DNA和HCMV mRNA检测诊断HCMV病的敏感性和特异性分别为95.56%(43/45)、93.33%(42/45)和60.24%(50/83)、97.59%(81/83).两者特异性的比较差异具有显著性(P＜0.05).结论:HCMV-PP67的NASBA检测方法具有快速、敏感性高和特异性强等优点,可作为快速检测HCMV病的方法用于临床.该法检测结果与移植受者的临床症状相关,故也可用作监视异基因造血干细胞移植受者术后HCMV感染和指导抗病毒治疗的依据.
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白细胞介素-18在急性移植物抗宿主病发病机制中的作用
为了研究异基因外周血造血干细胞(allo-PBSCT)移植期细胞因子白细胞介素-18(IL-18)与急性移植物抗宿主病(aGVHD)的关系,以探讨IL-18在aGVHD发病中的作用,对26例恶性血液病患者进行了allo-PBSCT,并采用双夹心酶联免疫吸附法(ELISA)检测移植前及移植后aGVHD发生时患者外周血单个核细胞分泌的IL-18浓度.结果表明:移植患者中10例发生Ⅰ度GVHD和5例发生Ⅲ-Ⅳ度GVHD,发生aGVHD患者分泌的IL-18浓度显著高于未发生aGVHD患者,并且IL-18浓度与aGVHD的严重程度成正相关,与感染的发生无关.结论:IL-18在aGVHD的发病中起重要的作用.
关键词： 异基因外周血干细胞移植 急性移植物抗宿主病 白细胞介素-18 白血病 -
1例异基因半相合非清髓外周血造血干细胞移植联合脐带间充质干细胞移植治疗假肥大型肌营养不良症的护理
患者,男,15岁,因行走缓慢,易摔跤,鸭步,双小腿腓肠肌假性肥大,四肢近端肌肉萎缩无力,Gower征阳性,血清肌酸激酶(CK)9 606 U/L,肌肉磁共振示双侧臀部及大腿肌肉对称性萎缩伴脂肪替代改变,肌电图为肌源性损害,PCR检测45基因外显子缺失,肌肉活检见骨骼肌抗肌萎缩蛋白阴性而诊断为DMD.
关键词： 肌营养不良 异基因外周血干细胞移植 间充质干细胞移植 护理 -
首例异基因非清髓性外周血干细胞移植治疗转移性乳腺癌
目的:探索转移性乳腺癌的治疗新方法.方法:异基因非清髓性外周血干细胞移植.结果:移植过程顺利,供者干细胞植入成功,转移病灶明显缩小.结论:异基因非清髓性外周血干细胞移植可选择性地应用于晚期乳腺癌的治疗.
关键词： 非清髓性预处理 异基因外周血干细胞移植 乳腺癌 转移 -
首例异基因非清髓性外周血干细胞移植治疗转移性乳腺癌
目的:探索转移性乳腺癌的治疗新方法.方法:异基因非清髓性外周血干细胞移植.结果:移植过程顺利,供者干细胞植入成功,转移病灶明显缩小.结论:异基因非清髓性外周血干细胞移植可选择性地应用于晚期乳腺癌的治疗.
关键词： 非清髓性预处理 异基因外周血干细胞移植 乳腺肺癌 肿瘤转移 -
全身照射及化疗预处理加用异基因外周血干细胞移植治疗恶性血液病的临床研究
目的探讨用全身照射(TBI)及化疗为预处理,异基因外周血干细胞移植(allo-PBSCT)治疗恶性血液病的临床效果,移植相关并发症及移植物抗宿主疾病(GVHD)的情况.方法回顾性分析我院用TBI+VAEMC预处理实行的15例allo-PBSCT的临床资料.以粒细胞集落刺激因子(G-CSF)皮下注射动员外周血造血干细胞;输入CD+34细胞;预处理方案为TBI+VAEMC方案(V:长春新碱,A:阿糖胞苷,E:足叶乙甙,M:米托蒽醌,C:环磷酰胺);用环孢霉素A+甲氨喋呤或甲基强的松龙防治GVHD.结果全部患者均获造血重建.移植后ANC＞0.5×109/L中位时间15天;BPC＞20×109/L中位时间19天;15例中急性GVHD发生了6例,慢性GVHD发生了7例(46.6%);15例中6例死亡;死于间质性肺炎3例,2例复发死亡,另1例死于GVHD引起的肝功衰竭.9例患者无病存活.结论 TBI+VAEMC为预处理allo-PBSCT有植入率高、移植相关并发症发生率低等优点,尤其是在难治性恶性血液病方面疗效好,移植后复发率相对较低.
关键词： 恶性血液病 异基因外周血干细胞移植 化学治疗 放射治疗 移植物抗肿瘤效应 -
异基因外周血干细胞移植后巨细胞病毒感染的早期检测及临床意义
目的:选择有效的巨细胞病毒(CMV)早期检测方法用于异基因外周血干细胞移植(allo-PBSCT).方法:采用微粒子酶免疫分析法(MEIA)、间接免疫荧光法(IFA)及实时荧光定量PCR法(Real-time FQ-PCR)对42例allo-PBSCT患者移植后不同时间进行多点动态检测外周血 CMV IgM 抗体、CMV pp65 抗原及 CMV DNA 负荷量.结果:1)移植患者CMV pp65抗原及DNA负荷量的阳性检出率(38.24%,33.82%)明显比IgM抗体阳性检出率(21.50%)高(P＜0.05).2)CMV pp65抗原及DNA负荷量的阳性检出时间(75±64天,60±50天)明显早于IgM(127±73天)(P＜0.05).3)CMV活动性感染的发生与患者移植后急性移植物抗宿主病(aGVHD)的发生密切相关(P＜0.05).结论:pp65抗原和DNA负荷量的检测方法适合用于allo-PBSCT术后患者的CMV感染的早期诊断.aGVHD的发生是allo-PBSCT患者CMV活动性感染的危险因素.
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异基因外周血干细胞移植BU/CY预处理方案相关癫痫的观察及护理
[目的]总结异基因外周血干细胞移植白消安联合环磷酰胺(BU/CY)预处理方案相关癫痫的观察及护理.[方法]对20例异基因外周血干细胞移植病人行BU/CY预处理,同时加强观察及护理,以预防和治疗白消安相关癫痫的发生.[结果]本组病人发生细小肢体抽动等癫痫先兆3例,发生癫痫小发作1例,均顺利度过预处理阶段.[结论] 通过实施积极主动的临床观察、健康教育等护理措施,可有效预防和治疗异基因外周血干细胞移植病人行BU/CY预处理中大剂量使用白消安所导致的癫痫.
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异基因外周血干细胞移植患者人类白细胞抗原B27的表达
目的:分析白血病患者行异基因外周血干细胞移植后人类白细胞抗原B27的表达特点,及其与慢性移植物抗宿主病的关系.方法:选择2003-09/2006-06在广西医科大学第一附属医院行异基因外周血干细胞移植术的45例白血病患者,按<血液病诊断和疗效标准>进行疾病的诊断和分型.全部患者均知情同意并签署知情同意书.男27例,女18例,22～51岁.其中急性髓细胞白血病13例、急性淋巴细胞白血病17例、慢性粒细胞白血病15例.供者均为白细胞抗原配型6个位点全相合的同胞兄妹.急性髓细胞白血病和慢性粒细胞白血病患者采用BU/CY方案:马利兰4 mg/(kg·d)×4 d,环磷酰胺60 mg/(kg·d)×2 d;急性淋巴细胞白血病患者预处理采用TBI/CY方案:全身照射5.0 Gy/d×2 d,环磷酰胺60 mg/(kg·d)×2 d.供者采用粒细胞集落刺激因子皮下注射动员干细胞.采用美国Baxter CS-3000 plus血细胞分离机采集外周血干细胞,每位供者采集0,+1,+2 d3次.回输单个核细胞、粒-单核系集落形成单位、CD34+细胞.采用流式细胞术动态检测45例白血病患者异基因外周血干细胞移植前后人类白细胞抗原B27表达的变化.结果:45例患者全部进入结果分析.①45例患者均获得造血重建,经荧光标记PCR短串联重复序列DNA位点分析,全部患者移植后血细胞的DNA与供者血细胞DNA完全一致.发生急性移植物抗宿主病4例,慢性移植物抗宿主病14例,出血性膀胱炎3例,肝静脉闭塞病4例.②移植后发生慢性移植物抗宿主病患者人类白细胞抗原B27表达水平明显低于无移植物抗宿主病患者[移植后180 d:(30.13±10.24)%,(39.61±10.89)%;移植后峰值:(33.53±10.36)%,(45.76±12.09)%,P＜0.05].③移植前未缓解白血病患者人类白细胞抗原B27表达水平则明显高于移植前达到完全缓解患者[(27.39±10.31)%,(16.62±8.58)%,P=0.005],移植后疾病复发患者复发时人类白细胞抗原B27表达水平明显高于其移植后完全缓解时[(27.76±10.09)%,(15.69±6.98)%,P=0.015].移植前未缓解和移植后复发患者人类白细胞抗原B27表达水平与肿瘤细胞占骨髓非红系细胞的百分比呈正相关关系(r=0.756,P=0.000).结论:移植前未缓解和移植后复发白血病患者人类白细胞抗原B27表达与肿瘤细胞占骨髓非红系细胞的百分比呈正相关,人类白细胞抗原B27表达水平随着肿瘤细胞百分比的增高而升高.
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主要ABO血型不合NST后纯红细胞再生障碍性贫血2例报告及文献复习
目的 探讨主要ABO血型不合非清髓性异基因外周血干细胞移植(NST)后纯红细胞再生障碍性贫血(PRCA)发生的机制及治疗对策.方法 对1例非霍奇金淋巴瘤(NHL)和1例慢性粒细胞性白血病(CML)患者行NST治疗,2例患者血型均为O型,供体为HLA完全相合的同胞(血型均为A型).结果 2例患者NST获得成功,但分别于移植后2、3个月出现PRCA,经强的松、雄激素、大剂量丙种球蛋白、皮下注射重组人促红细胞生成素(EPO)治疗,PRCA均无明显的改善.2例患者停用环孢菌素A(CsA)后均发生慢性移植物抗宿主病(cGVHD),经普乐可复(FK506)免疫抑制治疗后,cGVHD控制,同时抗A凝集素很快下降至0,网织红细胞、血红蛋白上升.结论 EPO、大剂量丙球对该组病例治疗无效.NST后一旦发生PRCA,应尽早停用CsA,cGVHD控制与PRCA的恢复相关.
关键词： 异基因外周血干细胞移植 非清髓性 ABO血型 纯红细胞再生障碍性贫血 -
人类白细胞抗原不完全相合的异基因外周血干细胞移植
异基因外周血干细胞移植(Allo-PBSCT)是目前治疗恶性血液病有效的方法.该作者综述了能为临床所接受的人类白细胞抗原(HLA)不完全相合的移植配型要求,以及从预处理、动员、干细胞体外处理、加强免疫重建、移植失败的处理等来提高HLA不全相合的植入率.
关键词： 人类白细胞抗原 异基因外周血干细胞移植 植入率 -
ABO血型不合的外周血干细胞移植及输血
目的探讨ABO不合PBSCT及其输血.方法采用血细胞分离机单采外周血干细胞去除红细胞;强化GVHD预防方案中MTX用量及次数;选输合适血制品.结果例1主次要ABO均不合,例2次要ABO不合,输注CS3000血细胞分离机单采CD34+细胞分别为190×106/KG、2.0×106/KG,其中红细胞残存量分别为1.4ml、2.6ml,残存率分别为3%、5.3%.移植后造血重建,完全植活,没有输血溶血,也没有免疫溶血发生.例1早期输2次AB型血小板,一次O型红细胞均顺利.2例仅有Ⅰ级AGVHD.结论血细胞分离机单采干细胞足以阻止输血溶血发生,不必再行羟乙基淀粉沉降处理;强化GVHD预防方案中MTX用量及次数可防过继免疫溶血发生.ABO不合的移植及其后输血是安全的,没有影响植入,不增加GVHD.
关键词： ABO不合 异基因外周血干细胞移植 输血 溶血 白血病 -
CD40和CD40配体表达在异基因造血干细胞移植后移植物抗宿主病发生中的变化
目的 探讨在血缘相关人类白细胞抗原(HLA)全相合异基因造血干细胞移植(HSCT)中发生移植物抗宿主病(GVHD)患者CD40和CD40配体(CD40L)表达的变化及意义.方法 成功应用血缘相关HLA全相合异基因HSCT治疗19例重型珠蛋白生成障碍性贫血和1例遗传性溶血性贫血.其中脐血移植(UCBT)8例,异基因外周血造血干细胞移植(allo-PBSCT)12例,移植前、后发生急、慢性GVHD时采用流式细胞仪检测和比较其外周血CD40和CD40L的表达.结果 UCBT 3例和allo-PBSCT 4例无急性GVHD,余13例均发生I-Ⅳ度急性GVHD.急性GVHD发生时CD4+CD40L+和CD8+CD40L+T细胞表达明显升高,尤其在alloPBSCT者更明显.5例UCBT和12例allo-PBSCT发生慢性GVHD,慢性GVHD发生时患者的CD40L+、CD25+和CD69+在CD4+和CD8+T细胞上的表达增加.CD19+CD40+B细胞的表达在UCBT和allo-PBSCT后l a一直处于低水平.结论 HSCT移植后患者外周血CD40L+T细胞的高表达可能与异基因HSCT GVHD的发生过程中的T细胞活化与增殖有关.
关键词： 移植物抗宿主病 CD40 CD40配体 脐血移植 异基因外周血干细胞移植 -
G-CSF动员同胞供体外周血干细胞的研究
目的:研究粒细胞集落刺激因子(G-CSF)动员异基因外周血干细胞(PBSC)的动力学,分析移植物细胞成分,探讨供者年龄、性别对动员效果的影响.方法:40个HLA相合的同胞供者一日两次皮下注射G-CSF 5 μg/kg ,于第5、6天采集PBSC,所得PBSC以流式细胞仪分析免疫表型.结果:①G-CSF动员过程中供者耐受良好,外周血白细胞和单个核细胞(MNC)峰值在第5天;②PBSC含有MNC 5.8(3.5～7.5) ×108/kg, CD34+细胞7.7(2.0～16.8) ×106/kg, CD3+细胞3.90(2.23～6.28) ×108/kg, CD4+细胞1.98(1.20～3.14)×108/kg, CD8+细胞1.4(0.5～2.5)×108/kg.③单次采集后血小板从(142.9±46.9)×109/L降至(99.8±27.4)×109/L,两者有显著性差异(P<0.05);④不同年龄及性别组之间, MNC和CD34+细胞的产率均无显著性差异(P>0.05).结论:G-CSF 5 μg/kg一日两次皮下注射能有效动员PBSC,供者的年龄、性别对动员效果无显著影响.
关键词： 粒细胞集落刺激因子 异基因外周血干细胞移植 动员 -
ABO血型不合同胞间异基因外周血干细胞移植后纯红细胞再生障碍性贫血3例报告
目的:探讨ABO血型不合异基因外周血干细胞移植后纯红细胞再生障碍性贫血(PRCA)的治疗.方法:报道3例病例并进行文献复习.结果:3例HLA配型完全相合、ABO血型主要不合的患者进行同胞间异基因外周血干细胞移植获得成功,但移植后均出现PRCA.1例经大剂量糖皮质激素联合大剂量免疫球蛋白治疗,2例经大剂量糖皮质激素联合血浆置换治疗后血型均转为供者血型,血红蛋白逐渐恢复正常.结论:大剂量糖皮质激素联合血浆置换或大剂量免疫球蛋白是治疗ABO血型不合异基因外周血干细胞移植后PRCA的有效方法.
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异基因外周造血干细胞移植后CD4+CD25+调节性T细胞与GVHD关系的研究
目的:研究异基因外周血干细胞移植(Allo-PBSCT)后CD4+CD25+调节性T细胞(CD4+CD25+Tregs)与急、慢性移植物抗宿主病(a/cGVHD)的关系.方法:采用流式细胞术动态监测50例血液病恶性肿瘤患者Allo-PBSCT过程中,在移植前、植入时、植入后+30d、+60d、+120d、+360d外周血CD4+CD25+Tregs在CD4+T细胞中的百分含量.结果:Allo-PBSCT过程中,CD4+CD25+Tregs的百分含量在植入时降到低,然后逐渐回升,+180d高,+360d回落到移植前水平.发生aGVHD患者外周血的CD4+CD25+Tregs百分含量与无aGVHD患者无显著性差异,发生cGVHD患者CD4+CD25+Tregs百分含量较无cGVHD患者显著性增加.结论:Allo-PBSCT术后发生aGVHD时,受者调控CD4+CD25+Tregs数量的功能尚未恢复正常,发生cGVHD时,CD4+CD25+Tregs的数量可以反馈性地增加,但由于多种原因,CD4+CD25+Tregs难以抑制cGVHD的发生.
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异基因外周血干细胞移植治疗骨髓增生异常综合征8例临床分析
目的 观察异基因外周血干细胞移植(allogeneic peripheral blood stem cell transplantation,allo-PBSCT)治疗骨髓增生异常综合征(myelodysplastic syndrome,MDS)的疗效.方法 对2007年5月至2012年1月在中山大学附属第三医院血液科住院的8例MDS患者采用allo-PBSCT治疗.其中男2例,女6例,年龄18 ～ 50岁(中位年龄31岁).按世界卫生组织(World Health Organization,WHO)MDS分型标准(2008年)分类,难治性细胞减少伴多系增生异常(refractory cytopenia with multilineage dysplasia,RCMD)占2例,难治性贫血伴原始细胞增多(refractory anemia with excess blasts,RAEB)-1占1例,RAEB-2占3例,MDS进展为急性髓系白血病(MDS-AML)占2例.供者经粒细胞集落刺激因子(granulocyte colony-stimulating factor,G-CSF)5 ～10 μg/(kg·d)动员5d后,分1～2d采集外周血造血干细胞.受者输入外周血单个核细胞(5.8～11.6)×108/kg(中位数7.7×108/kg).受者预处理方案为BuCy方案6例,改良BuCy方案2例,非亲缘供者联合使用抗胸腺细胞球蛋白(ATG).予环孢素加短疗程甲氨蝶呤方案预防移植物抗宿主病(GVHD).结果 8例患者中有6例移植后造血重建,中性粒细胞≥0.5×109/L和血小板≥20×109/L的时间分别为移植后9～15d(中位数12d)及11～42 d(中位数13d);4例患者发生急性移植物抗宿主病(aGVHD),其中I度1例,Ⅱ度2例,Ⅳ度1例;存活超过l00d的6例患者发生局限型慢性移植物抗宿主病3例.随访时间为2.6～56.9个月(中位数27.0个月),2例患者移植后100 d内死亡,其余患者均无病存活.以Kaplan-Meier法估算,患者总体生存率及无病生存率均为(75.0±15.3)％,生存期为(43.4±8.3)个月.结论 外周血干细胞移植是治疗年轻MDS患者的有效方法.
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同胞异基因外周血干细胞移植后纯红细胞再生障碍性贫血的治疗(附3例报告)
目的:探讨ABO血型不合异基因外周血干细胞移植后纯红细胞再生障碍性贫血(PRCA)的治疗.方法:3例HLA配型完全相合、ABO血型主要不合的患者进行同胞异基因外周血干细胞移植获得成功,但移植后均出现PRCA.1例经大剂量激素联合大剂量丙种球蛋白治疗,2例经大剂量激素联合血浆置换治疗.结果:3例血型均转为供者血型.血色素逐渐恢复正常,红系造血恢复.结论:大剂量激素联合血浆置换或大剂量丙种球蛋白是治疗ABO血型不合的异基因外周血干细胞移植后PRCA的有效方法.
关键词： 异基因外周血干细胞移植 纯红细胞再生障碍性贫血 激素 丙种球蛋白 血浆置换 -
异基因外周血干细胞移植后肝小静脉阻塞病的预防与治疗(附10例报告)
目的:探讨异基因外周血干细胞移植(allogeneic peripheral blood stem cell transplantion, Allo-PBSCT)后肝小静脉阻塞病(hepatic veno-occlusive disease, HVOD)的预防和治疗.方法:我科2001～2007年共完成了115例Allo-PBSCT,所有患者均采用联合脂质体前列腺素E1和低分子肝素方案预防HVOD,并监测肝肾功能、腹围、体重等变化.115例Allo-PBSCT患者中,HVOD发生率为8.7%(10/115),10例HVOD采用增加脂质体前列腺素E1和低分子肝素用药剂量,积极护肝、利尿、退黄及对症支持治疗.结果:除1例因呼吸循环衰竭死亡外,其余患者全部治愈并存活.结论:采用联合脂质体前列腺素E1和低分子肝素预防方案能降低HVOD的发生率,HVOD一旦确诊,采用增加脂质体前列腺素E1和低分子肝素用药剂量,并积极护肝、利尿、退黄及对症支持治疗是减少HVOD死亡率的良好手段.
关键词： 异基因外周血干细胞移植 肝小静脉阻塞病 预防与治疗 -
阿扎胞苷和CsA+MTX对小鼠Allo-PBSCT后急性GVHD的预防效果比较
目的 比较阿扎胞苷(AzaC)和环孢素A+甲氨蝶呤(CsA+MTX)对小鼠异基因外周血干细胞移植(Allo-PBSCT)后发生急性移植物抗宿主病(aGVHD)的预防效果并初步分析其原因.方法 雄性SPF级BALB/c(H-2d)小鼠为供鼠,雌性C57BL/6(H-2b)小鼠为受鼠,随机选20只雌性C57BL/6(H-2b)受鼠为预处理组.另将供、受鼠随机分为PBS组、AzaC组和CsA+ MTX组各40只(每组含雄性供鼠、雌性受鼠各20只).给PBS组、AzaC组和CsA+ MTX组的受鼠全身放疗(TBI)后输注供鼠T细胞去除(TCD)的外周血单个核细胞(PBMNC)和T细胞,再皮下注射PBS、AzaC和CsA+ MTX.检测受鼠的嵌合状态、生存天数、aGVHD观察及平均体重变化百分率和外周血CD4+ CD25+FOXP3+ Tregs百分率.结果 PBS组、AzaC组和CsA+ MTX组受鼠外周血白细胞中均检测到雄性供鼠的SRY基因,未移植组+20d内相继死亡,PBS组较早出现较严重的aGVHD,CsA+ MTX组随后也出现了aGVHD,而AzaC组未出现aGVHD.AzaC组的平均体重变化百分率、生存天数和外周血CD4+ CD25+ FOXP3+ Tregs百分率均与CsA+ MTX组和PBS组差异有统计学意义(P＜0.01).结论 AzaC预防小鼠Allo-PBSCT后aGVHD的效果优于CsA+ MTX,可能与其增加了移植后外周血CD4+ CD25+ FOXP3+ Tregs数量有关.
关键词： 阿扎胞苷 环孢菌素A 甲氨蝶呤 异基因外周血干细胞移植 移植物抗宿主病
