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甲基纤维素体外分离骨髓移植物中红细胞的效果
"ABO"血型不合的骨髓移植和一部分自体骨髓移植,需分离骨髓移植物中的红细胞.本研究观察了用甲基纤维素分离移植物中红细胞的效果.用生理盐水配制的0.5%甲基纤维素(MC)与采集的骨髓移植物按一定比例混匀,静置,然后沉降红细胞.对18份骨髓移植物分离的结果显示,单个核细胞和CD34+细胞回收率分别达(83.8±5.2)%和(90.3±7.2)%,CFU-GM产率为(60.8±22.4)/2×105个单个核细胞;红细胞残留率仅为(4.3±1.5)%.结论:此方法可用于骨髓移植.
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rhG-CSF对健康供者外周血和骨髓免疫特性影响的比较
本研究探讨rhG-CSF对健康供者外周血采集物(G-PB)和骨髓采集物(G-BM)免疫学特性影响的异同. 用MTT法和夹心酶联免疫复合物(ELISA)法检测G-PB和G-BM中T淋巴细胞增殖能力和IL-4、IFN-γ的分泌,并用流式细胞术测定两种移植物的T细胞亚群、树突状细胞(DC)亚群、单核细胞及共刺激分子CD28的表达. 结果表明: G-PB中淋巴细胞,CD3+、CD4+、CD8+ T淋巴细胞,DC1、DC2以及单核细胞的含量,CD4/CD8的比值高于G-BM(P＜0.001).G-PB的T淋巴细胞增殖能力高于G-BM(P＜0.05);每微升G-PB移植物中T淋巴细胞分泌细胞因子IFN-γ、IL-4的量均明显高于G-BM,且G-PB中IL-4/IFN-γ比值小于G-BM(P＜0.001),DC2与T淋巴细胞的比值也低于G-BM(P＜0.01);而G-PB中CD4+、CD8+细胞上CD28表达的百分比和总体表达均高于G-BM(P＜0.001). 结论: rhG-CSF体内应用诱导G-PB和G-BM产生的T细胞免疫低反应性是有差异的,而两者之间的差异是G-PB和G-BM移植后移植物抗宿主病(GVHD)发生率和程度不同的免疫学基础.
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rhG-CSF动员的外周血采集物与稳态骨髓中CD4+、CD8+初始及记忆T细胞亚群的比较
本研究探讨重组人粒细胞集落刺激因子(rhG-CSF)动员的外周血采集物(G-PB)与稳态骨髓(SS-BM)中CD4+、CD8+初始、记忆T细胞亚群的差异.依据细胞表面CD45RA和CD62L的表达将CD4+、CD8+ T细胞划分为初始T细胞(naive,CD45RA+ CD62L+)、中心记忆T细胞(central memory,TCM,CD45RA-CD62L+)、效应记忆T细胞(effector memory,TEM,CD45RA-CD62L-)、终末分化效应记忆T细胞(terminally differentiated effector memory,TTD,CD45RA+CD62L-).用流式细胞仪测定G-PB与SS-BM中CI4+、CD8+初始和记忆T细胞的比例组成,并计算每微升采集物中各细胞亚群的绝对数量.结果表明:G-PB中CD4+、CD8+T细胞的比例组成及CD4+/CD8+比值均高于SS-BM(P＜0.05);G-PB中CD4+初始T细胞的比例显著低于SS-BM(P＜0.001),而CD4+ TEM比例显著高于SS-BM(P＜0.001);G-PB中CD8+初始和记忆T细胞亚群的比例与SS-BM无显著差异(P＞0.05);与SS-BM相比,G-PB中CD4+ CD62L+ T细胞的比例明显降低(P=0.001),每微升G-PB移植物中的各淋巴细胞亚群均明显高于SS-BM(p＜0.001).结论:G-PB与SS-BM中CD4+、CD8+初始和记忆T细胞亚群在相对和绝对数量方面存在明显的差异,这种差异可能影响G-PB和SS-BM移植后急性、慢性移植物抗宿主病发生率及其程度的异同.
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rhG-CSF动员的骨髓和外周血干细胞混合移植物首次采集时供者外周血单核细胞计数反映混合采集物中CD34+细胞含量
本研究探讨人重组粒细胞集落刺激因子(rhG-CSF)动员的骨髓和外周血干细胞混合移植健康供者首次干细胞采集时供者外周血单核细胞数量与骨髓/外周血混合采集物中CD34+细胞数量的关系.对70名亲缘健康供者均皮下注射rhG-CSF 5μg/(kg·d),连续5天.第4天和第5天分别采集骨髓和外周血干细胞.首次干细胞采集时用EX2100血细胞分析仪检测供者外周血细胞计数,同时应用流式细胞仪测定骨髓和外周血混合采集物中的CD34+细胞数量.结果表明:rhG-CSF动员的70例供者首次干细胞采集时外周血单核细胞的数量为(1.15±0.60)×109/L;骨髓和外周血采集物中的CD34+细胞总量分别是(5.85±2.93)×107和(1.33±0.77)×108;骨髓和外周血混合采集物的CD34+细胞总量是(1.92±0.86)×108.Pearson和Spearman分析显示首次干细胞采集时供者外周血单核细胞计数(×109/L)与骨髓采集物中CD34+细胞的总量(相关系数:r=0.265,P=0.027)、外周血采集物中CD34+细胞总量(r=0.340,P=0.004)以及混合移植物中CD34+细胞的总量(r=0.398,P=0.001)均存在显著的相关性;多因素分析表明,首次干细胞采集时供者外周血单核细胞计数与骨髓采集物、外周血采集物以及混合移植物中CD34+细胞的总量均呈正相关关系(p值分别为0.027、0.004和0.001).首次干细胞采集时供者外周血单核细胞数量对混合移植物中CD34+细胞总量预测的敏感性是71%,特异性是70%(P=0.007).结论:rhG-CSF动员的骨髓和外周血混合移植健康供者首次干细胞采集时外周血单核细胞计数可有效预测输注给受者的CD34+细胞总量即采集效果.
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rhG-CSF对骨髓采集物中记忆T细胞上黏附分子表达的调节作用
本研究主要探讨人重组粒细胞集落刺激因子(rhG-CSF)对骨髓采集物记忆T细胞上黏附分子表达的调节作用.采用流式细胞仪检测稳态骨髓(SS-BM)和rhG-CSF预激的骨髓(G-BM)中CD4+、CD8+T细胞百分比及其记忆细胞表面黏附分子CD49d、CD54、CD62L和CD11a的表达.结果显示:rhG-CSF应用后骨髓采集物中CD4+、CD8+T细胞在淋巴细胞中的比例明显降低(P<0.001).记忆T细胞的比例没有明显变化;CD49d在CD4+和CD8+T细胞的表达百分比显著下降(P<0.05),但在记忆T细胞的表达百分比没有明显的变化;CD54在CD4+及其记忆T淋巴细胞和CD8+T淋巴细胞的表达百分比明显降低(P<0.05),而在CD8+记忆T细胞的表达百分比没有明显变化;CD62L在CD4+、CD8+及其记忆T细胞的表达百分比显著下降(P<0.01);CD11a在CD4+及其记忆T细胞的表达百分比明显降低(P<0.05),而在CD8+及其记忆T细胞的表达百分比没有明显变化.结论:rhG-CSF部分下调骨髓中CIM+、CD8+以及相应的记忆T细胞上黏附分子表达.
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骨髓移植患者的营养支持治疗
1 背景骨髓移植(bone marrow transplantation,BMT)是指将正常骨髓由静脉输入患者体内,以取代病变骨髓的一种治疗方法.用以治疗造血功能异常、免疫功能缺陷、血液系统恶性肿瘤及其他一些恶性肿瘤.根据骨髓移植物的来源可将骨髓移植分为同基因骨髓移植、同种异基因骨髓移植和自身骨髓移植等3种类型.随着科学技术的不断进步,骨髓移植疗法的临床应用逐渐扩大,已从血液系统恶性疾病扩展至实体肿瘤和基因疾病,治疗效果也有明显提高.但是骨髓移植过程中,除了骨髓采集、净化、冻存、回输及预处理方案外,患者的耐受情况尤其是营养状况的好坏也是关乎骨髓移植成败的关键.经过大剂量的放化疗后,患者常出现恶心、呕吐、口腔溃疡等不良反应,进而进食量减少,导致体重明显下降.
