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角膜新生血管与角膜移植排斥反应的关系的研究进展
角膜盲患者在我国有200～300万人，角膜病是仅次于白内障的第二大致盲性眼病，角膜移植手术是这些角膜盲患者复明的有效的治疗手段。由于角膜存在多种免疫赦免机制，如角膜不含血管和淋巴管，处于相对免疫“赦免”状态，而且正常情况下角膜的朗格汉斯细胞分布不均匀以及前房相关免疫偏离的存在，这些特点使得角膜移植手术是众多器官和组织移植手术中成功率高的手术［1-3］。虽然随着显微手术操作技术的提高和抗排斥新药的应用，手术成功率有了更大的提高，但是术后免疫排斥反应仍是角膜移植手术失败的主要的原因之一，尤其在高危角膜移植（新生血管、多次角膜移植及活动性炎症）手术后免疫排斥反应高达50％以上［4-5］。角膜移植术后免疫排斥反应是一个复杂的多因素过程，随着近代分子免疫学的发展，人们对其发生机制的认识正在不断深入，已经确认有许多危险因素可以导致角膜移植排斥的发生，如角膜血管化、炎症、虹膜前黏连、多次角膜移植手术史、年龄、大植片移植、偏中心移植以及青光眼病史、化学伤等［6］。其中角膜新生血管是一个主要危险因素。本文将就角膜新生血管与角膜移植排斥反应的关系的研究进展做一综述。
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前房相关免疫偏离中调节性T细胞的变化
目的:探索前房相关免疫偏离(ACAID)机制中调节性T细胞的变化,为进一步研究其具体机制创造条件.方法:将C57BL/6小鼠分为ACAID实验组、阳性对照组和正常组.实验组将2μL卵白蛋白(OVA,50 mg/mL)前房注射,阳性对照组和正常组以2 μL PBS行前房注射,7d后实验组和阳性对照组足底皮下免疫OVA100μL(2.5 mg/mL OVA与CFA等体积充分乳化),正常对照组不予处理.14d后检测耳廓迟发型超教反应(DTH),流式分析脾细胞中CD4+CD25+Foxp3+T细胞以及CD8+Foxp3+T细胞的数量和比例.结果:DTH结果显示,实验组的耳廓肿胀值较阳性对照组明显减小.CD4+CD25+Foxp3+T细胞和CD8+Foxp3+T细胞比例较阳性对照组和正常组均升高.结论:CD4+CD25+Foxp3+T细胞和CD8+Foxp3+T细胞在ACAID机制中发挥重要作用.
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视网膜下腔相关的免疫偏离
目的确立视网膜下腔是否具有支持针对视网膜可溶性抗原 (S抗原)刺激诱导偏离式免疫反应的能力.方法将视网膜 S抗原接种于Wistar大鼠的眼前房和视网膜下腔.抗原接种后7d,使用 S抗原和完全福氏佐剂免疫受主动物.然后,通过足部刺激评估迟发型超敏反应(DTH).结果前房和视网膜下腔注射S抗原的动物没有发生抗原特异性DTH.与此相反,而未预先进行前房和视网膜下腔抗原接种组动物和结膜下S抗原接种组动物则诱发了剧烈的 DTH.结论视网膜下腔针对可溶性抗原具有诱导免疫偏离的能力.
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眼的免疫调控机制
身体的所有器官或组织都具有针对病原体的免疫保护功能,眼也不例外.然而,眼的免疫表达在许多方面不同于其他器官和组织,其独特性的维持依赖于极其复杂的调控因素.由于阐明其调控机制对于了解相关疾病的发病机制以及发展新的防治策略具有重要的临床意义,所以目前有关该问题的研究已成为眼科学领域的研究热点之一.
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眼免疫赦免与免疫偏离
在具有免疫活性的个体,如果在某一特殊解剖部位接种或移植具有免疫原性的细胞或组织,这些细胞或组织可以长期存活,那么我们将这一部位称为免疫赦免部位[1].目前已发现的免疫赦免部位有眼、脑、肝脏、某些内分泌器官、母胎界面和仓鼠的颊袋等.其中眼的免疫赦免现象更为人们所关注,本文旨在就眼免疫赦免的研究进展加以综述.
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CD86在排斥反应和前房相关免疫偏离过程中的作用
目的 检测大鼠角膜共刺激分子CD86(B7-2)的原位表达,探讨CD86分子与角膜移植排斥反应和前房相关免疫偏离(ACAID)过程的关系.方法 制作穿透角膜移植排斥反应和同一供体前房内注射脾细胞诱导ACAID的大鼠模型;角膜移植组进行排斥反应指数(RI)评分;ACAID组进行迟发型超敏反应(DTH)评价;采用免疫组织化学的方法检测CD86在角膜中的原位表达(以脾脏的表达为阳性对照).结果 角膜移植组植片均出现不同程度的新生血管、角膜水肿、混浊、增厚;ACAID组角膜透明,房水清,DTH评价术后2周及4周诱导成功率100%;免疫组织化学检测CD86在正常大鼠角膜组织全层无阳性表达,在移植后出现急性排斥反应的大鼠角膜上皮层中有大量阳性细胞表达,在ACAID诱导成功的大鼠角膜中未见阳性细胞表达.结论 共刺激分子CD86参与移植后的急性排斥反应,但可能不参与免疫赦免过程.
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前房相关免疫偏离对碱烧伤眼角膜移植的影响
目的 观察诱导供体特异性的前房相关免疫偏离(ACAID)是否有助于角膜植片在碱烧伤高危眼中的存活.方法 用1 mol/L的NaOH烧灼新西兰白兔单眼角膜中央建立高危眼模型,然后将动物随机分为诱导组和对照组,1个月后进行角膜移植.诱导组在角膜移植前10 d前房植入供体肌肉诱导供体特异性ACAID,对照组未处理.观察诱导组与对照组相比角膜植片存活时间是否延长.结果 与对照组相比,诱导ACAID组角膜植片平均存活时间延长,两组植片存活率的差异具有显著统计学意义.结论 诱导供体特异性ACAID有助于碱烧伤高危眼角膜植片的存活.
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灵长目前房相关免疫偏离的诱导和维持不需要脾脏的完整性
目的观察脾脏在灵长目前房相关免疫偏离(ACAID)诱导和维持中的作用.方法按照经典方法在猴眼建立ACAID模型.在前房抗原接种前切除脾脏.通过观察对抗原特异性迟发型超敏反应(DTH)的抑制来确定ACAID的诱导和维持.结果在单纯脾脏切除组动物均显示阳性DTH反应;但在单纯前房抗原接种组、脾脏切除加前房抗原接种组均显示阴性DTH反应,且维持时间无显著差异.结论灵长目ACAID的诱导和维持不需要功能性脾脏的存在.实验为研究人眼的免疫调控机制奠定了基础.
