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对氧磷酶与动脉粥样硬化性脑梗死关系的研究
PON是一类芳香酯酶,它能催化磷酸酯键的水解,降解有机磷酸、芳香羧基酸酯及氨基甲酸酯.由于目前用于检测该酶活性的常用的底物是对氧磷(parason),故该酶命名为对PON.近年的研究表明,PON除能解除有机磷化合物的毒性外,还参与抗脂质过氧化,在一些氧化应激性疾病的发展中起着重要的作用.本文就对氧磷酶基因家族及其活性以及与动脉硬化性脑梗死关系的研究作一综述.
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2型糖尿病患者芳香酯酶基因多态性的研究
芳香酯酶(ArE/PON1)是一种含有巯基的钙依赖性酶,通过其N-末端富含疏水氨基酸残基与高密度脂蛋白相结合,在抗氧修饰脂蛋白和抗动脉粥样硬化中起重要作用[1].本研究主要探讨其192位基因多态性(ArE/PON1Q192R)在郑州地区2型糖尿病(DM)患者中的改变,为临床上防治DM及其并发心血管疾病提供理论基础.
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冠心病患者Ⅱ型对氧磷酯酶基因311Cys/ Ser多态性的研究
对氧磷酯酶(paraoxonase,PON)是一类芳香酯酶,在血清中与高密度脂蛋白(HDL-C)结合,能减少低密度脂蛋白(LDL-C)的氧化,降低体内氧化型低密度脂蛋白(OX-LDL)水平,降低脂质过氧化物在血管壁的积累,从而起到预防动脉壁粥样硬化的发生或减缓其进程的作用.
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血清芳香酯酶活性测定方法研究
目的建立血清芳香酯酶活性的测定方法.方法采用EDTA终止酶促反应,分光光度法测定苯酚的生成量,反映芳香酯酶的活性水平.测定了该法的线性范围、变异系数、重现性.结果芳香酯酶活性在0～80单位范围内与吸光度值呈线性(r=0.999),方法的变异系数在1.08%～1.77%间.加入不同酶量(25%、50%、75%的血清),实测值与理论值误差百分比分别为14.04%、11.34%和4.13%.同一样本重复测定,变异系数在2.1%～8.3%间.结论该检测方法用血量少、酶反应时间短,采用EDTA终止反应,可以在普通分光光度计上进行测定.实验证明方法稳定、重现性好,具有推广使用前景.
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糖尿病合并冠心病与芳香酯酶基因Q192R多态性分析
目的:探讨糖尿病(DM)芳香酯酶(ArE/PON1)基因Q192R多态性与糖尿病合并冠心病(DM-CAD)的关系,为防治DM-CAD提供理论依据.方法:调查对象为郑州地区汉族健康人群64例(对照组)、2型糖尿病60例(DM组)与DM-CAD67例(DM-CAD组).测定其血清ArE/PON1活性,并用聚合酶链式反应-单链构型多态性(PCR-SSCP)分析技术检测ArE/PON1基因Q192R的多态性,进行分析研究.结果:发现对照组、DM组和DM-CAD组均存在ArE/PON1基因192位点(Q/R)多态性.对照组基因频率Q为0.55、R为0.45;DM组为0.53与0.47;DM-CAD组为0.38与0.62.DM-CAD组R基因频率明显高于DM组和对照组(P＜0.05),DM组与对照无显著差异(P＞0.05),DM与DM-CAD组血清ArE/PON1活性(分别为0.225±0.018μ/ml与0.200±0.019μ/ml)均低于对照组(0.259±0.018μ/ml),DM-CAD组低于DM组(P＜0.05).3组中每组内每种基因型组间酶活性无显著差异.结论:郑州汉族人群存在ArE/PON1 Q192R(GIn/Arg)多态性,基因频率分布不同于白种人,提示R基因可能是DM合并CAD的危险因素.
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一种芳香酯酶检测新方法及其应用
目的建立芳香酯酶检测方法并作出方法学评价,探讨芳香酯酶的临床应用.方法采用有机合成方法合成底物4-乙酰氧基-3-甲氧基-ω-硝基苯乙烯,底物经酶水解生成4-羟基-3-甲氧基-ω-硝基苯乙烯,产物在pH8.6Tris-HCI溶液中显红色.检测520nm处吸光度变化以监测产物生成速度,反映酶活性水平.对90例健康体检者和463例病人血清进行了检测并建立了参考值范围.结果在肝硬化、肝癌、肝炎、胃癌、尿毒症、肾病综合征、肾炎、冠心病(P＜0.01)和高血压(P＜0.05)时芳香酯酶均显著降低.在肝硬化、肝癌、肝炎检测中发现芳香酯酶与白蛋白(ALB)、胆碱酯酶(CHE)和直接胆红素(D-BIL)相关系数分别为0.872、0.840,-0.495,经t检验相关系数均具有高度统计意义(P＜0.01).结论本法简便可靠,可采用自动化和手工两种方法,适合不同条件的单位常规应用.为临床肝硬化、肝癌、肝炎、胃癌、尿毒症、肾病综合征、肾炎、冠心病和高血压的诊断、治疗、预后提供重要信息.
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郑州地区汉族健康人群和糖尿病合并冠心病患者血清芳香酯酶活性频数分布态性与192位基因的多态性
目的:研究郑州地区汉族健康人群和糖尿病合并冠心病(DM-CAD)患者血清芳香酯酶(ArE/PON1)活性频数分布态性与192位基因多态性的分布.方法:郑州地区汉族健康人群321例,DM-CAD 90例.用终点法测定血清ArE/PON1活性.PCR检测年龄相近的182例健康人和90例DM-CAD患者ArE/PON1 192位基因多态性.结果:郑州市汉族健康人群与DM-CAD患者血清ArE/PON1活性频数均呈单峰正态分布;ArE/PON1 192存在基因多态性,等位基因为Q和R.DM-CAD患者ArE/PON1酶活性(0.198±0.015)u/ml,低于正常对照组的(0.258±0.020)u/ml(t=37.92,P＜0.01);DM-CAD患者R基因频率和RR基因型分布频率分别为62%和31%,高于正常对照组的46%和12%(P＜0.01).2个观察组各基因型间血清ArE/PON1酶活性差异无统计学意义.结论:郑州地区汉族人群血清ArE/PON1活性频数分布为单峰正态分布,并存在有ArE/PON1 192位基因多态性,R基因可能是该地区DM-CAD的独立危险因素.
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郑州地区汉族正常人群、糖尿病和糖尿病并发冠心病患者芳香酯酶Q192R基因多态性
目的:研究郑州地区汉族正常人群、2型糖尿病(DM)及DM并发冠心病(DM-CAD)患者芳香酯酶(Arylesterase/Paraoxonase,ArE/PON1)192位基因多态性.方法:用比色法测定郑州地区汉族正常人群(61例)、DM(60例)和DM-CAD(67例)患者血清ArE/PON1活性,用聚合酶链式反应分析技术检测ArE/PON1基因192位多态性,用酶法和酶联免疫法分别测定血清胆固醇、高密度脂蛋白胆固醇(HDLc)、氧化型低密度脂蛋白(oxLDL)等指标.结果:郑州地区汉族人群中存在有ArE/PON1 192位基因多态性,Q、R基因频率健康人群中分别为0.56与0.44;DM组为0.53与0.47;DM-CAD组为0.38和0.62.DM-CAD组R基因频率高于DM组和对照组.基因型百分比DM-CAD组RR(31%)高于DM组(13%)和对照组(11%)(P<0.05).DM与DM-CAD组血清ArE/PON1活性水平低于对照组,以DM-CAD组为低(P<0.05).酶活性的降低与HDLc、HDL2C呈正相关,与oxLDL呈负相关.结论:郑州地区汉族人群存在ArE/PON1 192位基因多态性,并提示R基因是郑州地区汉族人群DM-CAD的危险因素.
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慢性肾功能衰竭血清芳香酯酶活性改变的研究
目的:研究慢性肾功能衰竭(CRF)患者血清芳香脂酶(ArE)活性改变的临床意义.方法:通过测定CRF早期、晚期与终末期患者血清ArE活性、胆固醇、高密度脂蛋白胆固醇(HDLc)、氧修饰低密度脂蛋白(ox-LDL)与脂蛋白(a)[Lp(a)]及内生肌酐清除率(Ccr)等的水平,进行分析.结果:CRF患者血清ArE活性与HDLc水平低于对照组,血清ox-LDL、Tc与LP(a)水平高于对照组.三期肾功能衰竭患者血清ArE活性与HDLc水平降低程度自小至大依次为早期、中期与晚期,血清ox-LDL、Tc与LP(a)升高程度在三组间有显著性差别,其中以终末期高.血清ArE活性与HDLc、白蛋白、Ccr呈正相关,与血清肌酐呈负相关,和Lp(a)无相关性.结论:测定CRF患者血清ArE活性不仅了解其血脂与脂蛋白的代谢异常,还可为了解肾功能损害程度提供参考依据.
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血清中芳香酯酶的特性及其与疾病的关系
芳香酯酶主要由肝细胞合成,是依赖Ca2+存在于血浆HDL中的一种酯酶.它能水解氧化型磷脂,抑制氧自由基对HDL和LDL氧化,与脂代谢有密切的关系,因其具有抗动脉粥样硬化的作用而日益受到重视.本文就对芳香酯酶的生物学特点及其与某些疾病的关系进行综述.
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用积分法测定血清芳香酯酶活性
目的以血清芳香酯酶(ArE)为模型,用模拟和实验考察积分法测定酶活性的可靠性.方法用酚乙酸酯测定ArE反应曲线.按ArE的积分速度方程In(S0/Si)+(S0-Si)/Km=(Vm/Km)×ti计算无误差反应曲线,叠加随机误差得模拟曲线.以底物浓度(S0)为参数用Equ①非线性拟合测定Vm/Km,换算得Vm.结果模拟表明积分法测定酶活性与S0无关,升高S0可提高测定上限.实验表明S0低于Km的20%时Vm/Km无变化;重复性5.8%(ν= 6);本底和反应起点延迟无干扰;升高S0可提高上限.此积分法用20% Km的S0测定86份血清,ArE活性Vm呈正态分布,与据初速度按米氏方程计算的Vm无差异.结论此积分法能可靠测定酶活性Vm/Km或Vm.
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血清对氧磷酶和芳香酯酶在妊娠期缺铁性贫血的临床意义
目的 探讨对氧磷酶1(PON1)和芳香酯酶(ArE)活力在妊娠期缺铁性贫血的临床意义.方法 选取本院产科门诊确诊的缺铁性贫血孕妇50例(贫血组)和同期在门诊产检的健康孕妇50例(对照组)作为研究对象,检测两组血清PON1和ArE活性,以及血红蛋白(Hb)、平均血细胞比容(MCY)和血清铁蛋白(SF)水平,分析缺铁性贫血孕妇的PON1和ArE与Hb、MCV和SF的相关性.结果 贫血组的Hb、MCV和SF水平以及PON1和ArE活力均显著低于对照组(P＜0.05);在贫血组中,PON1和ArE活力均与Hb、MCV和SF水平均呈正相关(P＜0.05).结论 缺铁性贫血孕妇的血清PON1和ArE活力显著下降,并与Hb、MCV和SF水平呈正相关.因此,缺铁性贫血孕妇可能存在抗氧化防御体系缺陷,有待进一步研究其对母婴健康的影响及防治对策.
