首页 > 文献资料
-
Schwann细胞与筋膜共同培养的实验研究
目的探讨Schwann细胞与筋膜共同培养的方法,为神经缺损修复提供实验基础.方法将Schwann细胞与筋膜共同培养,免疫组织化学双染、相差显微镜连续观察及间接免疫荧光染色显示Schwann细胞胶质特异性标记蛋白S-100表达和BrdU掺入.结果相差显微镜下可见筋膜周围有大量Schwann细胞,且生长迅速,胞体呈梭形,核为椭圆形,胞体两侧有两个细长的突起,并呈平行排列,少见成纤维细胞.形态学连续观察和S-100间接免疫荧光染色都显示BrdU掺入.筋膜BrdU和S-100免疫组织化学双染可见筋膜上有大量的BrdU和S-100双染阳性的Schwann细胞,胞核为深蓝色,胞浆红褐色.结论在筋膜上有大量具有增殖活性的Schwann细胞,该筋膜可望用于修复神经缺损.
-
Schwann细胞移植在脊髓损伤治疗中的应用进展
Schwann细胞具有很强的神经保护和髓鞘化的能力,是脊髓损伤治疗研究中运用早和多的细胞之一.目前Schwann细胞常常作为联合治疗的平台,将各种干预手段整合起来.本文主要讨论Schwann细胞在联合治疗脊髓损伤中所遇到的问题,各种有关Schwann细胞的联合治疗的效果,Schwann细胞共移植对神经干细胞的积极影响,Schwann细胞移植后的存活、迁移情况以及内源性Schwann细胞在脊髓损伤修复中的作用.
-
Schwann细胞移植对电针损伤大鼠中脑新生髓鞘的影响
目的观察Schwann细胞移植于电针损伤的中脑后是否有新生的髓鞘.方法新生大鼠坐骨神经Schwann细胞体外培养,5溴-脱氧尿嘧啶(BrdU)标记后移植至电针损伤的大鼠中脑网状结构.免疫组织化学染色定位后行半薄切片,天青-美蓝髓鞘染色,油镜下观察新生的髓鞘.结果 Schwann细胞移植后8个月仍可见BrdU阳性细胞,并主要向大脑皮层迁移;在损伤的脑干区域内,移植后1个月就可见新生的髓鞘.结论 Schwann细胞移植可促进损伤的中枢神经系统再生.
-
雪旺氏细胞脑内移植前的体外培养
目的介绍新生鼠 Schwann细胞培养方法,为今后临床 Schwann细胞移植提供实验基础.方法采用坐骨神经组织块反复种植同时加刺激因子forskolin和BTI培养 Schwann细胞.相差显微镜形态学连续观察及间接免疫荧光染色显示Schwann细胞胶质特异性标志蛋白S100表达和BrdU掺入.结果形态学连续观察和S100间接免疫荧光染色都显示, Schwann细胞纯度可达98%～99%;BrdU掺入显示Schwann细胞增殖活性很强.结论坐骨神经组织块反复种植同时加刺激因子forskolin 和BTI不失为 Schwann细胞培养好方法.此方法简便、快速,可在短时间内获得大量高纯度、有活性的 Schwann细胞.
-
视神经再生的实验研究
成年哺乳动物的视神经受损后不能自发再生,主要受视神经本身因素以及周围环境的影响.许多实验研究致力于促进视神经再生,包括神经保护、轴突延长、与靶组织再联系、功能恢复等,本文对此作一综述.
-
软组织颗粒细胞瘤的CT与MRI表现
颗粒细胞瘤(granular cell tumor,GrCT)是一种较少见的肿瘤,早期认为GrCT可能来源于横纹肌细胞,又称其为"颗粒性肌母细胞瘤",随着电镜超微结构及免疫组织化学(简称免疫组化)检查的深入研究,支持颗粒细胞瘤是一种具有Schwann细胞分化的神经源性肿瘤[1-2].软组织GrCT的影像表现国外文献报道较少,且多为个例报道[3-4],国内个例报道多关注临床表现及病理.笔者搜集本院经手术病理证实的4例软组织GrCT患者的完整资料,结合文献分析其CT和MRI表现,旨在提高对本病影像表现的认识.
-
神经母细胞瘤中Schwann细胞抗肿瘤作用研究进展
神经母细胞瘤(Neuroblastoma,NB)包括两个细胞群:神经母/神经节细胞和Schwann细胞.高密度的Schwann细胞预示预后良好[1];国际神经母细胞瘤病理学分类(International Neuroblastoma Pathology Classification,INPC)[2]和Shimada分类[3]特别强调:Schwannian间质的存在与预后良好密切相关.传统观点认为神经母细胞瘤中Schwann细胞是神经母细胞分化的产物.在这种观点影响下,仅仅把Schwann细胞密度作为预示NB预后的因子,而没有意识到其具有抗肿瘤作用.1996年,Ambros[4]提出:NB中的Schwann细胞为正常反应细胞,是在神经母细胞招募(recuit)作用下侵入到神经母细胞瘤中.NB中Schwann细胞到底有什么作用,诸多学者利用Schwann细胞条件培养基(Schwann cell-conditioned medium,SCM)进行研究,目前研究揭示Schwann细胞具有抗肿瘤作用,为新的治疗途径开辟提供了理论基础.
-
周围神经损伤后Schwann细胞与轴突再生关系的超微形态学研究
目的 观察大鼠坐骨神经损伤后Schwann细胞和轴突再生关系的超微结构变化.方法 切断大鼠双侧坐骨神经,在神经断端间留有3mm间隙构建神经再生室.分为A组和B组,在A组左侧(A1)神经再生室内注入0.1 ml生理盐水,右侧(A2)注入0.05 ml丝裂霉素(40 μg/ml)和0.05 ml层粘连蛋白(10 μg/ml);在B组左侧(B1)神经再生室内注入0.1 ml丝裂霉素(40 μg/ml),右侧(B2)注入0.1 ml层粘连蛋白(10 μg/ml),第3天按上述浓度及剂量依次注入.4周进行超微结构观察.结果 A1组、A2组和B2组Sch咖细胞和轴突再生的超微结构明显优于B1组.结论 周围神经损伤后,Schwann细胞和轴突再生之间的关系密不可分,Schwann细胞的存在与否直接影响到轴突的再生.Schwann细胞为轴突的再生提供必要的支持,且外源性层粘连蛋白能够促进Schwann细胞和轴突的再生.
-
筋脉通含药血清对高糖培养的Schwann细胞诱导型一氧化氮合酶和NADPH氧化酶p22-phox亚基表达的影响
目的:探讨筋脉通含药血清对高糖培养的Schwann细胞诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase,iNOS)蛋白表达及烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(nicotinamide adenine dinucleotide phosphate,NADPH)氧化酶p22-phox亚基mRNA表达的影响.方法:雄性Wistar大鼠随机分为3组,分别灌胃筋脉通、维生素C或蒸馏水制备含药血清和对照血清.取新出生大鼠的双侧坐骨神经用于制备Schwann细胞.将体外培养的Schwann细胞分为高糖组、筋脉通组(加入筋脉通含药血清)、维生素C组(加入维生素C含药血清)及正常对照组.培养48 h后,采用免疫荧光法检测Schwann细胞内iNOS蛋白的表达,实时荧光定量聚合酶链式反应法检测NADPH氧化酶p22-phox亚基mRNA的表达.结果:高糖培养的Schwann细胞内iNOS蛋白表达及NADPH氧化酶p22-phox亚基mRNA 表达均较正常对照组明显升高(P＜0.01);与高糖组比较,筋脉通组iNOS蛋白表达及NADPH氧化酶p22-phox亚基mRNA表达明显降低(P＜0.01),且明显优于维生素C组(P＜0.01).结论:筋脉通含药血清可以下调高糖培养的Schwann细胞iNOS蛋白及NADPH氧化酶p22-phox亚基mRNA的表达.
-
体外培养Schwann细胞缺氧模型的建立
目的:建立体外培养Schwann细胞的缺氧模型. 方法:取体外培养Schwann细胞,置于通入体积分数为5% CO2和95%N2的有机玻璃盒中继续缺氧培养10、15和20min,用H-E染色观察细胞形态,MTT比色试验检测细胞的活力. 结果:缺氧10min组细胞形态及活力与正常组无明显差异;而缺氧15min组的细胞突起回缩,活力为缺氧前的66.3%;缺氧20min组的细胞多数死亡,活力仅为缺氧前的20.6%. 结论:本方法可以成功建立有效、简便、易行的Schwann细胞缺氧模型.
-
Schwann细胞转染Ha-Ras对β1,4-半乳糖基转移酶Ⅰ,Ⅱ,Ⅴ表达的影响
目的:研究原代Schwann细胞转染持续激活型原癌基因Ha-Ras后β1,4-半乳糖基转移酶Ⅰ,Ⅱ,Ⅴ(β-1,4-galactosyltransferase Ⅰ,Ⅱ,Ⅴ;β-1,4-GalT-Ⅰ,Ⅱ,Ⅴ)表达变化.方法:构建Ha-Ras表达质粒和分离纯化大鼠Schwann细胞,将Ha-Ras表达质粒转染到Schwann细胞中.采用Northern Blot方法分析转染细胞中Ha-Ras转染情况和转染后β-1,4-GalT-Ⅰ,Ⅱ,Ⅴ的表达变化.结果:原代Schwann细胞转染持续激活型Ha-Ras后,β-1,4-GalT-Ⅰ随转染时间延长而表达增高,而β-1,4-GalT-Ⅱ及Ⅴ的表达无变化.结论:β-1,4-GalT-Ⅰ随Schwann细胞转染时间Ha-Ras延长而表达增高,提示原代细胞表面的β-1,4-GalT-Ⅰ可能与Ha-Ras影响原代细胞增殖的信号途径相关.
关键词： Ha-Ras β1 4-半乳糖基转移酶Ⅰ Schwann细胞 大鼠 -
BAG1在坐骨神经夹伤Schwann细胞中的表达
目的 研究B淋巴细胞瘤-2相结合抗凋亡基因1(BAG1)在外周神经系统损伤和修复中的作用.方法 36只SD大鼠随机分为坐骨神经夹伤组(A组,28只)、假手术组(B组,4只)和正常对照组(C组,4只).采用Western blot检测BAG1和八聚体转录因子6(OCT6)蛋白的表达,免疫荧光染色观察BAG1与不同表型特异性标志物在细胞中的共定位情况.结果 与B、C组相比,A组BAG1和OCT6蛋白表达增加(P＜0.01).A组BAG1主要表达于Schwann细胞,并与OCT6、NF-200和S100有共定位.结论 坐骨神经夹伤后BAG1表达上调,这可能与Schwann细胞分化相关.BAG1可能参与神经损伤后的髓鞘再生.
-
改性聚乳酸与Schwann细胞的生物相容性研究
目的:对不同的改性聚乳酸材料进行Schwann 细胞(SC)生物相容性观察.方法:采用细胞增殖度法,观察不同材料浸提液对SC增殖影响,进行毒性评级;采用相差显微镜、扫描电镜、荧光分光光度法观察细胞形态以及黏附情况.结果:除2#材料(PLA-g-HEMH)的高浓度浸提液毒级为2级外,其余毒级均为0～1级,细胞生长良好,其黏附性较未改性聚乳酸高,但所有材料SC的黏附性仍低于培养板(P<0.01). 结论:改性后的材料细胞生物相容性良好,其表面亲水性增加,但2#材料可能在改性过程中表面酸度增加,在处理上有必要改进.
-
大鼠坐骨神经去细胞基膜管异体移植的比较研究
目的:探讨化学萃取法(CEN)、冻融法(FTN)制备的异种鼠坐骨神经去细胞基膜管移植术后8、13、23天神经再生轴突距离、Schwann细胞迁入、再血管化及炎症反应异同.方法:将36只雌性Wistar鼠随机配对,分为CEN组与FTN组,每组18只,分别桥接移植两种方法制备的Sprague-Dawley鼠坐骨神经去细胞基膜管.观察术后8、13、23天移植物物理性状及组织形态学变化.结果:术后8、13、23天,神经轴突再生距离、近和远端Schwann细胞数、再血管化及炎症反应差异有显著性(P<0.05),CEN组优于FTN组.结论:化学萃取法制备的异种周围神经去细胞基膜管较冻融法能更快、更好地修复周围神经缺损,亦应有更大的临床实用价值.
-
Schwann细胞培养的研究进展
Schwann细胞由Schwann于1839年首次发现并命名,它是一种神经胶质细胞,在周围神经系统中包绕轴突形成或不形成髓鞘.近年来对周围神经的深入研究发现,Schwann细胞的功能极其活跃,它能分泌各种神经因子,维持周围神经的微环境,产生细胞外基质和细胞黏附分子,这些都与神经系统的发育和再生有密切关系,尤其在神经系统损伤后功能的恢复上有重要作用[1].目前对Schwann细胞的研究已进展到细胞和分子水平上,但许多研究资料来源于对Schwann细胞的培养,因此本文就Schwann细胞的培养技术历史及当前培养技术进展情况作一综述.
-
缺血性脑血管病患者血浆S-100β蛋白变化的意义
S-100β蛋白是高浓度存在于神经胶质细胞或schwann细胞中的钙结合蛋白,为小分子酸性蛋白,因该蛋白在出现脑障碍时可从脑脊液向血液移行,其在血清中的出现成为标志脑神经障碍或血脑屏障通透性亢进的指标.Kim等认为它是迄今为止能反应脑损伤程度的特异性蛋白.
-
腰痛定注射液促进大鼠Schwann细胞体外增殖作用的实验研究
目的:观察中药"腰痛定"注射液对体外培养的大鼠坐骨神经Schwann细胞增殖能力的影响,探讨其促进神经再生的作用机制.方法:取SD雄性大白鼠坐骨神经体外培养第2代第5天,加入不同浓度的中药"腰痛定"注射液,利用MTT比色分析法检测不同浓度中药"腰痛定"注射液在不同培养时间对体外培养的大鼠坐骨神经Schwann细胞增殖能力的影响.结果:中药"腰痛定"注射液在6.25 mg/ml的浓度对Schwann细胞增殖有明显促进作用,高浓度的中药"腰痛定"注射液25mg/ml、12.5mg/ml则显示抑制作用,而中药"腰痛定"注射液3.125 mg/ml、1.5625 mg/ml对细胞增殖的促进作用与对照组相近.结论:中药"腰痛定"注射液在适当浓度范围内可以促进Schwann细胞增殖,从而为促进活体神经损伤的修复途径提供了一些研究基础.
关键词： 中药"腰痛定"注射液 Schwann细胞 细胞增殖 -
Lysosomal Exocytosis in Schwann Cells Contributes to Axon Remyelination
髓鞘形成是一个包括协同性的胞吐、内吞、mRNA转运和细胞骨架的动态变化的复杂过程.尽管髓鞘的异常在溶酶体贮积症中很常见,但对溶酶体在髓鞘形成和维持中所扮演的角色仍不清楚.本文发现Schwann细胞中的晚期内涵体/溶酶体包含大量的髓鞘蛋白P0,含量占超过一半的外周神经系统中的致密髓鞘的总蛋白并且在不同的刺激下表现出Ca2+依赖性的胞吐作用.Rab27a(一种将分泌溶酶体运输至细胞膜的小GTP酶)下调,极大地阻碍了Schwann细胞中的溶酶体胞吐作用,减少了再生坐骨神经的髓鞘形成.这些发现强调了Schwann细胞中溶酶体的新角色,提示调节Schwann细胞中的溶酶体胞吐作用在外周神经系统中有很重要的生理和病理意义.
-
雪旺氏细胞在中枢神经系统损伤修复中的作用
Schwann细胞可分泌多种神经营养因子,产生细胞外基质成分和细胞黏附分子.大量的动物实验已证明,它能促进中枢神经元轴突的再生及修复损伤的髓鞘,为中枢神经系统的损伤的修复提供良好的微环境.但也有人报道,Schwann细胞在中枢神经系统内的存活时间很短.如果Schwann细胞中枢神经系统内移植成功,将为人类脑损伤的修复带来突破.
-
培养Schwann细胞用于构建毛囊神经嵴干细胞定向分化饲养层
目的 培养原代Schwann细胞,用于构建毛囊神经嵴干细胞饲养层构建.探索Schwann细胞(Schwann cells)对胎牛血清浓度的依耐性；检测Schwann细胞在不同血清浓度下的活性及分泌状态,并应用此饲养层定向诱导毛囊神经嵴干细胞分化.方法 原代培养及纯化Schwann细胞；用不同血清浓度的胎牛血清(FBS)培养基培养Schwann细胞,测定并用四氮唑盐(MTT)比色法检测Schwann细胞生长及增殖情况；使用S100特异性标识抗体间接免疫荧光法与荧光染料Hoechst 33342对Schwann细胞进行鉴定.用ELISA方法检测Schwann细胞的分泌因子.利用丝裂霉素C处理Schwann细胞建立饲养层,培养Schwann细胞和毛囊神经嵴干细胞.结果 体外成功培养Schwann细胞,用S100间接免疫荧光法与核染料Hoechst33342鉴定Schwann细胞呈阳性表达,纯度约95％,成功培养毛囊神经嵴干细胞.无血清的培养基可使Schwann细胞生长状态良好.饲养层细胞能够稳定分泌神经生长因子(nerve growth factor,NGF)和脑源性神经营养因子(brain-derived neurotrophic factor,BDNF),可诱导毛囊神经嵴干细胞定向分化.结论 无血清的培养基更利于毛囊神经嵴干细胞饲养层的构建.饲养层Schwann细胞可持续分泌NGF和BDNF等神经营养因子,可成为使毛囊神经嵴干细胞定向分化的稳定饲养层细胞.
