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精子质量与短时受精后受精结局关系的研究
目的 探讨精子质量对短时受精后受精结局的预测价值.方法 选取2009年1月至2010年6月在河南省人民医院生殖医学中心进行早期受精观察的常规体外受精胚胎移植(IVF-ET)的患者,筛除年龄＞ 38岁,且第2次减数分裂中期(MⅡ)卵母细胞数＜3个的患者,共有558个周期.按是否进行补救卵胞浆内单精子显微注射术(Re-ICSI)分为常规体外受精(IVF)组(472周期)和Re-ICSI组(86周期).按既往妊娠史将IVF组和Re-ICSI组分为原发不孕和继发不孕,其中IVF组原发不孕269周期,继发不孕203周期；Re-ICSI组原发不孕64周期,继发不孕22周期.IVF组和ReICSI组患者胚胎种植率、临床妊娠率、早期流产率的比较采用x2检验,活产率的比较采用Fisher精确概率检验.IVF组和Re-ICSI组间不孕年限、前向运动精子数量、精子畸形率、精子顶体酶活性的比较采用Mann-Whitney U检验.结果 IVF组胚胎种植率、临床妊娠率、早期流产率、活产率分别为29.4％、44.9％、13.4％、37.0％,Re-ICSI组分别为25.7％、34.6％、10.7％、29.6％,差异均无统计学意义(x2=0.869、2.963、0.010,P=0.351、0.085、0.922、0.098).IVF组中,原发不孕患者的不孕年限、前向运动精子数量、精子畸形率、顶体酶活性分别为4.00(3.00 ～6.00)年、58.37( 33.64 ～102.27)×106条、81.09％ (79.41％～88.69％)、76.30(48.50 ～92.46) μIU/106条精子,Re-ICSI组分别为5.00 (3.25～8.00)年、36.33 (20.59 ～ 64.43)×106条、85.50％ (81.28％ ～ 89.02％)、47.14(31.61 ～90.24) μIU/106条精子,差异均有统计学意义(Z=-2.617、- 3.505、- 3.553、-3.530,P=0.009、0.000、0.000、0.000).IVF组中,继发不孕患者的不孕年限、前向运动精子数量、精子畸形率、顶体酶活性分别为5.00(3.00～7.00)年、63.00( 34.20 ～ 107.73)×106条、81.29％(79.90％ ～ 86.09％)、78.34( 53.87 ～ 98.00)μIU/106条精子,Re-ICSI组分别为5.00 (3.75 ～7.00)年、28.80(18.57 ～48.56)×106条、88.79％(84.04％ ～95.64％)、54.70(39.73 ～76.77) μIU/106条精子,除不孕年限外,其他各项指标差异均有统计学意义(Z=-0.338、-3.505、-3.553、-3.530,P =0.735、0.000、0.000、0.006).结论 患者的不孕年限、前向运动精子数量、精子畸形率、顶体酶活性对短时受精后是否出现受精失败有预测价值.
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东莞市不育与生育正常青年男性精子功能的对照分析
目的：对比分析东莞市不育青年男性与生育正常青年男性各项精子功能指标。方法回顾性分析本院120例年龄在25~34岁的青年男性患者，依据生育功能差异将其分为不育组(60例)，规律性生活未避孕1年而不孕；对照组(60例)，1年内令配偶正常受孕。比较两组的精子密度，精子活力参数[包括平均曲线运动速度(VCL)、平均路径运动速度(VAP)及精子平均鞭打频率(BCF)]，精子运动方式参数[包括运动直线性(LN)、运动摆动性(WOB)、运动前向性(STR)及运动侧摆幅度(ALH)]，精子形态指标，精子DNA碎片指数(DFI)，顶体酶活性和生育力指数(FI)的差异。结果不育组的精子密度、精子活力参数(VCL、VAP及BCF)、精子运动方式参数(LN、WOB、STR及ALH)与对照组比较，差异无统计学意义(P>0.05)；不育组的正常形态精子百分率、DFI、顶体酶活性及FI显著低于对照组，差异有统计学意义(P<0.05)。结论东莞市不育青年男性的各项精子功能指标显著较生育正常青年男性差。
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人精子顶体内顶体蛋白酶和透明质酸酶对男性生育力的影响
目的：探讨人精子顶体内酶对男性生育力的影响。方法参照世界卫生组织标准方法对52例不育症患者、12名正常生育者[正常生育组，精子密度为（50～100）×109/L、精子活动率为60％～90％]进行精液常规分析。不育组按精子密度不同分为B1（＜20×109/L）、C1（20×109～40×109/L）及D1（＞40×109/L）3组；按精子活动率不同分为B2（＜30％）、C2（30％～50％）及D2（＞50％）3组]。采用改良明胶底物膜法和改良透明质酸钠-明胶底物膜法分别检测精子顶体内顶体蛋白酶（ACE）活性（ACE阳性反应率、ACE活性强度）和透明质酸酶（HYD）活性（HYD阳性反应率、HYD活性强度）。结果精子ACE活性（ACE阳性反应率、ACE活性强度）与精子密度、活动率、形态畸形率明显相关[相关系数（r）分别为0．797、0．867，0．831、0．860和-0．625、-0．546， P均＜0．01]；精子HYD活性（HYD阳性反应率、HYD活性强度）与精子密度、活动率、形态畸形率明显相关[r值分别为0．832、0．855，0．842、0．830和-0．625、-0．554，P均＜0．01]。不育各组精子形态畸形率明显高于正常生育组（P＜0．01）。C1组、D1组和 C2组、D2组 ACE 活性（ACE 阳性反应率、ACE 活性强度）、HYD 活性（HYD阳性反应率、HYD活性强度）明显低于正常生育组（P＜0．01）。各组酶活性随精子密度及活动率增加而上升。结论精子ACE、HYD活性的检测可作为一种有效的判断生育力的检测指标。
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乙型肝炎病毒感染对精液参数和精子相关功能的影响
目的 探讨HBV感染对精液参数、精子DNA损伤、顶体酶活性和核蛋白组型转换的影响.方法 2011年1月至2012年10月在温州医科大学附属第一医院生殖医学中心就诊,接受试管受精技术的527份精液标本,273例HBsAg阳性和254例HBsAg阴性者同时进行精液参数、精子DNA碎片指数(DFI)、顶体酶活性和精子核蛋白组转换分析.各组均数比较采用t检验或近似t检验.结果 两组精液各参数指标虽然都在正常范围内,但HBsAg阳性组的精子浓度和快速前向运动精子(a级)、慢速前向运动精子(b级)率均显著低于阴性组(P=0.000),而静止精子(d级)率却显著高于阴性组(P=0.000).HBsAg阳性组精子DFI为(17.85±0.70)％,阴性组为(11.85±0.50)％,两组间比较差异有统计学意义(t=6.951,P=0.000).虽然正常形态精子比率都在正常范围内,但HBsAg阳性组的正常精子数、颈部和尾部精子畸形率均高于阴性组,差异均有统计学意义(均P＜0.05).HBsAg阳性组精子的顶体酶活性较阴性组降低,差异有统计学意义(t=3.756,P=0.000).血清HBsAg水平与精子浓度呈负相关(r=-0.140,P=0.021),与DFI呈正相关(r=0.151,P=0.014).结论 HBV感染不仅对精液的常规参数和精子形态会造成不同程度的影响,对精子DFI和顶体酶活性等功能指标也造成损伤.乙型肝炎抗病毒药物是否对精子质量及男性生育力有影响,有待进一步研究.
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Clock基因对精子顶体酶的影响
目的 研究雄鼠睾丸Clock基因沉默后,小鼠精子顶体酶的活性及功能.方法 在ICR小鼠睾丸内注射Clock干扰质粒干扰雄性小鼠睾丸节律基因Clock的表达,研究:(1)进行体外受精,观察精子驱散卵丘颗粒细胞情况及受精率等;(2)检测精子顶体内顶体蛋白酶、透明质酸酶活性及芳香基硫酸酯酶A (ASA)的含量.(3)将精子注射入卵母细胞,观察受精卵及胚胎发育情况.结果 睾丸Clock基因沉默后,精子驱散卵丘颗粒细胞时间延长,受精率下降;精子顶体蛋白酶活性下降;透明质酸酶活性和ASA含量无明显变化;干扰组精子对卵母细胞及胚胎发育的影响小于未干扰组(P＜0.05).结论 干扰睾丸Clock基因表达后,影响精子顶体蛋白酶活性,从而影响雄性小鼠的生殖功能.
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体外受精受精率与男方精子参数的关系
目的：探讨体外受精（IVF）技术中精子处理前后常规参数与受精率的关系。方法选择2011年6月到2013年3月在南华星辉生殖健康专科医院行IVF助孕的285个鲜胚周期，将这285个周期分为受精率≤40%组（A组）和受精率＞40%组（B组），分别比较两组处理前无A级精子比例、上游法回收率≤5%比例、处理后前向运动（PR）总数＜1.0×106比例、精子巴氏染色正常形态＜4%比例、精子顶体酶活性＜48.2μIU/106精子比例的差异。结果 A、B两组处理前无A级精子比例（分别为14.7%和0.4%，P＜0.05）、上游法回收率≤5%比例（分别为23.5%和0.8%，P ＜0.05）、处理后PR总数＜1.0×106比例（分别为17.6%和0%，P ＜0.05）均具有显著性差异（P＜0.05）；精子巴氏染色＜4%（分别为11.8%和10.0%）、顶体酶活性＜48.2μIU /106精子（5.9%和2.4%）均无显著性差异。结论处理前无A级精子、上游法回收率≤5%和处理后PR总数＜1.0×106是影响受精率的高危因素；精子巴氏染色＜4%和精子顶体酶活性低对预测IVF受精率具有一定局限性。
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顶体蛋白酶抑制剂KF-950对精子顶体蛋白酶的抑制作用
本文研究蛋白酶抑制剂KF-950对人精子顶体蛋白酶的抑制作用.醋酸抽提并纯化人精子顶体蛋白酶,BAEE/ADH法测定不同浓度KF-950作用后残余酶的活性.结果:正常人精子顶体蛋白酶活性为37.65±4.47mu/ml(pH 8.5,25℃);在加入不同浓度KF-950后,残余酶的活性与KF-950的浓度呈负相关(r=-0.998),1 μgKF-950可抑制1.895 mu人顶体蛋白酶活性(pH 8.5,25℃).结论:KF-950对人精子顶体蛋白酶具有很强的抑制作用.
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沙眼衣原体感染对男性精子顶体酶活性的影响
根据相关流行病学调查显示,育龄夫妇不孕不育发生率为10％～15％,其中一半为男性原因[1-3],导致男性不育的因素较多,主要分为外部因素和内部因素,其中男性生殖系统炎症可改变精子生成及成熟的微环境,是影响男性精液质量导致不育的重要因素之一[4],在影响男性不育的诸多因素中生殖系统感染约占4％～10％[5].现对在本院诊断为精子顶体酶活力低下并有沙眼衣原体感染的不育男性患者39例进行治疗,将结果报道如下.
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关于顶体反应的研究进展
人口问题足当今世界尤其是发展中国家面临的一个严峻的社会问题.实行计划生育控制人口增长更是我国的一项基本国策.迄今为止,女性仍然是避孕工作的主体,绝大多数抗生育药物均针对女性,而男性抗生育药物仍未见报道.研究者们为此展开了大量的工作.
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顶体蛋白酶在男性不育症中的应用
顶体蛋白酶是位于精子头部顶体内层浆膜上的一种蛋白溶解酶.已知85%～90%的顶体蛋白酶是以酶原的形式存在.随着精子在体外获能,酶原即可活化.活化的顶体酶一方面溶解顶体膜基质;另一方面又可作用于主要靶器官卵细胞放射冠与透明带,使精子穿入卵细胞,形成受精卵.顶体蛋白酶在受精过程中起着十分重要的作用.因此,男性不育患者与精子顶体蛋白酶活性的低下有密切的关系.本文通过近十余年来,国内有关顶体蛋白酶与男性不育的临床和实验研究作如下综述.
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低温冷冻对人类精子影响的研究进展
目前,在供精人工授精(AID)技术中,冻精作为供精已逐渐取代了新鲜精液.然而,低温冷冻对精子的功能和结构是否会产生影响,一直为人们所关心,许多研究者对此作了大量观察.现将超低温冷冻(-196℃)对精子功能、染色体、超微结构和顶体蛋白酶方面的影响简述如下.
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精子形态率、顶体酶活性对IVF受精失败的影响
目的 探讨精液中精子形态率及顶体酶活性与IVF受精失败的关系.方法 回顾性分析2014年在本中心行IVF新鲜周期的982个周期患者,根据精子形态分析结果,将正常精子形态百分率(x)分为5组,包括:1组:x≥4％,2组:x＜1％,3组:1％≤x＜2％,4组:2％≤x＜3％,5组:3％≤x＜4％.根据顶体酶活性分为正常组及异常组.结果 IVF受精失败组(受精率＜30％)与正常组比较,正常精子形态率及顶体酶活性差异有统计学意义(P＜0.01).精子形态率比较,2、3、4组与1组比较,差异有统计学意义(P＜0.01).5组与1组比较,差异无明显统计学意义(P＞0.05).顶体酶活性正常组与异常组比较,受精失败率差异有统计学意义(P＜0.01).结论 精子形态率及顶体酶活性异常可导致IVF受精失败率升高.
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男性不育患者精子形态与精浆锌和精子顶体酶活性关系的研究
目的：研究男性不育患者精子形态与精浆锌和精子顶体酶活性关系。方法455例男性不育患者分别根据年龄和精子正常形态百分率分成5组和8组，采用 Diff-Quik 染色法、改良 PRA 法和改良 Kennedy 法分别进行精子形态、精浆锌和精子顶体酶活性的检测。结果各年龄组的正常形态精子百分率和精浆锌浓度差异无统计学意义（P ＞0．05），精子顶体酶活性在36～50岁年龄段显著降低（P ＜0．05），其他年龄段精子顶体酶活性差异无统计学意义（P ＞0．05）。在精子正常形态百分率不同的8组中，年龄差异无统计学意义，精浆锌总量差异无统计学意义，精子顶体酶活性随着精子正常形态百分率降低而降低（r ＝0．93，P ＜0．01）。结论精子正常形态百分率不受年龄和精浆锌的影响，与精子顶体酶活性呈正相关。
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精子DNA损伤与顶体酶活性及精液常规参数的相关性分析
目的 探讨精子DNA损伤与顶体酶活性及精液常规参数的相关性.方法 收集2013年1月至2015年4月在该院就诊的291例男性不育患者的精液,分析精子形态、密度、活动率及精液常规.采用精子染色质扩散法检测精子DNA损伤,分析其与顶体酶及精液常规参数的关系.结果 精子DNA碎片指数与患者年龄、精液体积及精液液化时间无关,而与项体酶活性及A+B级精子百分率呈负相关[相关系数(r)=-0.352、-0.305,P＜0.01],与精子头部畸形及D级精子百分率呈正相关(r=0.157、0.284,P＜0.01).结论 精子质量评价指标可以包括独立的精子DNA损伤,也可以结合其他精子评价指标,为男性不育的辅助生殖技术及诊断提供理论依据.
