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引进CLSI微生物检验标准促进实验室标准化进程
当前,抗菌药物耐药愈演愈烈,已成为全球面临的难题.多重耐药、泛耐药、甚至极度耐药株的出现和传播,给临床治疗和控制带来极大的困难.苯唑西林耐药的金黄色葡萄球菌(MRSA)、万古霉素耐药的屎肠球菌(VRE)、产ESBL的肠杆菌科细菌、碳青霉烯类耐药的不动杆菌(CRAB)和铜绿假单胞菌(CRPA)均已成为国际普遍关注的热点问题[1].
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50株肺炎链球菌pbp2B基因突变与苯唑西林药敏相关性分析
目的探讨我国耐青霉素肺炎链球菌(Streptococcus pneumoniae, SPN)pbp2B基因的突变与苯唑西林药敏表型相关性. 方法对呼吸道感染患儿痰标本中分离到的50株肺炎链球菌,用K-B法进行苯唑西林药物敏感试验,用套式聚合酶链反应(nPCR)扩增pbp2B基因,对PCR产物直接进行DNA测序,测得序列与SPN R6株(青霉素敏感株)序列[GenBank登录号:NC-003098]相比较. 结果 29株无突变,21株有突变;突变的21株中20株为点突变,可分A、B、C、D 4个类型,分别占71.4%、14.3%、4.8%、4.8%;另1株为E型,除有点突变外,并有CCT碱基插入;无突变的29株SPN菌中苯唑西林敏感率为86.2%;有突变的21株中苯唑西林敏感率为9.5%,二者相比较差异有显著性(P<0.001) ;5种突变类型均存在SPN菌对苯唑西林耐药. 结论 SPN分离株pbp2B基因突变与其苯唑西林耐药性相关,5种突变类型均可致苯唑西林耐药.
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头孢西丁检测耐苯唑西林金黄色葡萄球菌
目的评价头孢西丁纸片扩散试验检测耐苯唑西林金黄色葡萄球菌(ORSA)的临床应用价值.方法用头孢西丁和苯唑西林纸片扩散试验、苯唑西林琼脂筛选试验检测临床分离的186株金黄色葡萄球菌.结果82株PBP2a阳性金黄色葡萄球菌中,头孢西丁纸片法、苯唑西林纸片法和苯唑西林琼脂筛选法分别检出ORSA81、77株和78株;104株PBP2a阴性中,头孢西丁纸片法全部为阴性,苯唑西林纸片法和苯唑西林琼脂筛选法阴性为101株和103株;以ORSA-乳胶凝集试验结果为参考标准,头孢西丁纸片法、苯唑西林纸片法和苯唑西林琼脂筛选法检测ORSA的特异性分别为100%、97.1%和99.0%,敏感性分别为98.8%、93.9%和95.1%.结论头孢西丁纸片扩散试验简便、价廉,不需要特殊的试验条件并能提高测定ORSA常规试验的可靠性,适用于临床实验室对ORSA的常规检测.
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耐甲氧西林金黄色葡萄球菌实验室诊断方法
耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)是携带mecA基因的金黄色葡萄球菌或苯唑西林小抑菌浓度(MIC)≥4 mg/L的金黄色葡萄球菌.大部分MRSA菌株携带mecA基因,但少数MRSA不携带mecA基因,存在其他的耐药机制,如青霉素结合蛋白(PBP)改变或高产β-内酰胺酶等.l MRSA的检测1.1纸片扩散法:制备0.5麦氏单位菌悬液涂布在水解酪蛋白琼脂(MHA)平皿上,贴30 μg头孢西丁纸片或者1μg苯唑西林纸片,33~35℃(35℃以上可能检测不到MRSA)孵育24 h判读结果,头孢西丁可作为苯唑西林耐药性检测的替代物,应根据头孢西丁结果报告苯唑西林敏感或耐药.如果2个药物同时用于金黄色葡萄球菌,任何一种药物耐药,报告该菌株对苯唑西林耐药.
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耐万古霉素的金黄色葡萄球菌
目前认为万古霉素中度耐药的金黄色葡萄球菌菌株一般从苯唑西林耐药的金黄色葡萄球菌转变而来。万古霉素中度耐药的金黄色葡萄球菌感染患者往往长期使用万古霉素或有慢性疾病。目前还没有系统检测万古霉素中度耐药的金黄色葡萄球菌的试验。如果用万古霉素治疗苯唑西林耐药的金黄色葡萄球菌感染失败,临床医生应警觉是否为万古霉素中度耐药的金黄色葡萄球菌感染。
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金黄色葡萄球菌对苯唑西林和万古霉素药敏结果分析
近几年,金黄色葡萄球菌对苯唑西林耐药日益严重,对万古霉素的敏感性也逐渐下降.为了解本地区金黄色葡萄球菌对这2种药的敏感性,用纸片扩散法和E-test法对分离到的菌株进行研究.