首页 > 文献资料
-
模式识别受体NOD2在小鼠心肌梗死后心肌纤维化中的作用及机制
目的 探讨模式识别受体(nucleotide binding oligomerization domain2,NOD2)在小鼠心肌梗死后心肌纤维化中的作用及其分子机制.方法 雄性C57/BL6野生型小鼠18只,永久性结扎冠状动脉前降支复制心肌梗死模型,随机分为心肌梗死组(myocardial infarction,MI)组、NOD2激动剂胞壁酰二肽(muramyl dipeptide,MDP)组(MI+MDP)及假手术组(Sham),其中MI+MDP组在造模前30min给予小鼠腹腔注射MDP(100μg/只),MI组及Sham组均给予同等剂量的生理盐水.一周后取材,Masson染色观察心脏纤维化的程度,HE染色观察心肌组织形态学改变,免疫组化染色观察巨噬细胞的浸润情况,RT-PCR方法检测白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)和单核细胞趋化蛋白-l(monocyte chemotactic protein 1,MCP-1)表达,Western blot方法检测核因子-κB(nuclear transcription factor-κ B,NF-κB)的蛋白表达水平.结果 与心肌梗死组比较,NOD2激动剂组巨噬细胞浸润增多,IL-6和MCP-1表达水平增加,NF-κ B/p65的表达增加,心肌间质纤维化程度加重.结论 NOD2可能通过激活NF-κ B/p65信号通路,介导炎症反应参与心肌梗死后心肌纤维化过程.
关键词： 核苷酸结合寡聚化结构域2 心肌梗死 炎症 纤维化 -
NOD2通过调控细胞外基质活性及炎性因子水平介导心肌梗死后心室重构
目的 探讨细胞内模式识别受体——核苷酸结合寡聚化结构域( NOD)蛋白家族中NOD2蛋白是否参与心肌梗死(MI)后心室重构及相关机制. 方法 结扎小鼠冠状动脉左前降支建立MI模型.实时荧光定量PCR检测不同梗死时间假手术组、手术组梗死区、手术组非梗死区NOD2的mRNA表达水平,免疫组化染色和Western blot测定梗死28 d心肌组织NOD2的蛋白表达.采用NOD2-/-基因敲除小鼠建立MI模型,实验分为4组:野生/假手术组( WT/Sham组)、NOD2基因敲除/假手术组(NOD2-/-/Sham组)、野生/MI组(WT/MI组)和NOD2基因敲除/MI( NOD2--/MI组).小动物超声心动图测定心室重构指数并判断心功能,Masson和Tunel染色观察小鼠心梗后心肌纤维化程度及细胞凋亡情况,酶联免疫吸附法(ELISA)测定梗死心肌组织的促炎细胞因子水平,Western blot和明胶酶谱法检测心肌组织裂解液基质金属蛋白酶9( MMP-9)蛋白及活性变化,并用免疫组化染色观察MI后炎性细胞浸润和心脏成纤维细胞转分化成心肌成纤维细胞情况. 结果 与WT/Sham组相比,WT/MI组非梗死区和梗死区NOD2 mRNA表达水平均升高(均为P<0. 05),其中梗死区NOD2的mRNA表达及蛋白表达高.超声心动图提示,NOD2缺失能减轻MI后心功能障碍和心室重构的程度;Tunel和Masson染色显示,NOD2-/-/MI组的细胞凋亡和心肌纤维化程度均明显降低(均为P<0. 05). NOD2缺失还能降低 MI 区炎性因子水平、炎性细胞的浸润及 MMP-9 的活性(均为 P <0. 05). 结论 NOD2通过调控MMP-9蛋白及活性、炎性介质水平和炎性细胞浸润来介导MI后心室重构过程.
关键词： 冠状动脉疾病 心室重构 核苷酸结合寡聚化结构域2 基质金属蛋白酶9 炎症 -
核苷酸结合寡聚化结构域2在人炎症牙髓组织中的表达
目的 研究人炎症牙髓组织中核苷酸结合寡聚化结构域2(NOD2)的表达与分布特点,探讨NOD2 在牙髓组织天然免疫防御中的可能作用.方法 荧光定量聚合酶链反应(qPCR)检测人正常和炎症牙髓组织中NOD2 mRNA 的表达情况; 采用免疫组织化学染色和免疫印迹方法(Western blot)检测人正常和炎症牙髓组织中NOD2 蛋白的定位和表达差异.结果 荧光qPCR结果表明,炎症牙髓组织NOD2 mRNA 的表达水平显著高于正常牙髓组织;Western blot 检测到正常和炎症牙髓组织在96 kDa 附近均出现蛋白条带,且炎症牙髓组织NOD2 表达水平高于正常牙髓组织;免疫组织化学显示,炎症牙髓组织中大量炎性细胞NOD2 强阳性表达,成纤维细胞NOD2 蛋白也有明显表达,而正常牙髓组织中成纤维细胞未见NOD2 蛋白表达.结论 NOD2 可能参与牙髓的炎症和免疫反应,推测其可能在牙髓抵御外来病原微生物入侵的宿主免疫防御中发挥作用.
关键词： 牙髓 天然免疫 炎症 核苷酸结合寡聚化结构域2 -
TLR2和NOD2在金黄色葡萄球菌肺炎小鼠中的表达
目的 观察小鼠肺部感染金黄色葡萄球菌后肺组织模式识别受体TLR2及NOD2的表达,探讨其在金黄色葡萄球菌肺炎中的作用.方法 30只C57BL/6J小鼠,随机分为两组,对照组小鼠滴鼻接种无菌磷酸缓冲盐溶液,金黄色葡萄球菌肺炎组小鼠滴鼻接种5 × 108CFU/50μl.滴鼻接种72h后,获取肺组织标本,HE染色观察病理形态学改变,免疫组化和Western blot法检测TLR2及NOD2蛋白的表达变化,QRT-PCR法检测TLR2和NOD2 mRNA的表达.结果 金黄色葡萄球菌滴鼻接种72h后,小鼠肺组织TLR2和NOD2蛋白表达水平显著升高(P＜0.05),并且上调TLR2和NOD2 mRNA表达(P＜0.01).结论 金黄色葡萄球菌感染能上调小鼠肺组织TLR2和NOD2的mRNA及蛋白表达.
关键词： 金黄色葡萄球菌 肺炎 Toll样受体2 核苷酸结合寡聚化结构域2 -
肠源性α-防御素在炎症性肠病发病机制中作用的研究进展
防御素作为小肠腺泡底部潘氏细胞分泌的主要抗菌肽,具有广谱的杀菌、抗炎、抗病毒功能,对肠道的黏膜屏障功能和免疫功能都有非常重要的维持和调节作用.近年发现防御素和炎症性肠病(IBD)的发病联系紧密.现将近年来肠源性防御素在IBD发病机制中作用的研究进展进行综述,以期为今后IBD的治疗提供一定的理论依据.
-
慢性阻塞性肺疾病患者外周血核苷酸结合寡聚化结构域2、核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3及下游炎性因子表达情况及其关系研究
目的 探讨慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者外周血核苷酸结合寡聚化结构域2(NOD2)、核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)及下游炎性因子表达情况及其关系.方法 选取2015年1月—2017年1月川北医学院附属医院收治的COPD患者200例,其中慢性阻塞性肺疾病急性发作期(AECOPD)患者100例作为A组,COPD缓解期患者100例作为B组,并根据肺功能分级及1年内急性发作次数将B组患者分为低风险组与高风险组,每组50例;另选取同期体检健康者100例作为对照组.比较A组、B组、对照组和低风险组、高风险组、对照组受试者NOD2 mRNA表达量、NLRP3 mRNA表达量、血清白介素1β (IL-1β)和白介素18 (IL-18)水平,NOD2 mRNA表达量、NLRP3 mRNA表达量与COPD患者血清IL-1β水平、血清IL-18水平、第1秒用力呼气容积与用力肺活量比值(FEV1/FVC)、第1秒用力呼气容积占预计值百分比(FEV1％)的相关性分析采用Pearson相关性分析.结果 A组、B组患者NOD2 mRNA表达量、NLRP3 mRNA表达量、血清IL-1β和IL-18水平高于对照组(P＜0.05);A组患者NOD2 mRNA表达量、NLRP3 mRNA表达量、血清IL-1β和IL-18水平高于B组(P＜0.05).低风险组、高风险组患者NOD2 mRNA表达量、NLRP3 mRNA表达量、血清IL-1β和IL-18水平高于对照组(P＜0.05);高风险组患者NOD2mRNA表达量、NLRP3 mRNA表达量、血清IL-1 β和IL-18水平高于低风险组(P＜0.05).Pearson相关性分析结果显示,NOD2 mRNA表达量、NLRP3 mRNA表达量与COPD患者血清IL-1β水平(r值分别为0.625、0.656)、血清IL-18水平(r值分别为0.701、0.723)呈正相关,与FEV1/FVC(r值分别为-0.389、-0.415)、FEV1％(r值分别为-0.513、-0.558)呈负相关(P＜0.05).结论 COPD患者外周血NOD2、NLRP3表达水平及血清IL-1β、IL-18水平较高,且NOD2 mRNA表达量、NLRP3 mRNA表达量与COPD患者血清IL-1β、IL-18水平及肺功能有关.
-
内毒素耐受对核苷酸结合寡聚化结构域2信号通路的影响
为研究内毒素耐受对核苷酸结合寡聚化结构域2（nucleotide‐binding oligomerization domain containing 2，NOD2）信号通路的影响，将小鼠单核‐巨噬细胞RAW264．7分为两组，分别给予小剂量脂多糖（lipopolysaccharide ，LPS）（100 ng／mL）或磷酸盐缓冲液（phosphate buffered saline ，PBS）预处理20 h ，建立内毒素耐受组和对照组。每组细胞分别给予大剂量LPS（1000 ng／mL）或热灭活烟曲霉孢子刺激，于刺激后0、2、6、12、24 h采用定量聚合酶链反应（polymerase chain reaction ，PCR）检测细胞NOD2、受体相互作用蛋白2（receptor‐interacting protein 2，RIP2）和肿瘤坏死因子α（tumor necrosis factor α，TNF‐α）mRNA表达；采用酶联免疫吸附试验（enzyme‐linked immunosorbent assay ，ELISA ）检测细胞上清液中白细胞介素8（interleukin 8，IL‐8）和TNF‐α浓度。结果显示，内毒素耐受组无论是大剂量LPS还是热灭活烟曲霉孢子刺激均不能增加NOD2、RIP2和TNF‐αmRNA表达及细胞上清液中 IL‐8、TNF‐α浓度；而对照组大剂量 LPS和热灭活烟曲霉孢子刺激均可提高NOD2、RIP2和TNF‐α mRNA表达及细胞上清液中 IL‐8、TNF‐α浓度，尤以刺激后12 h增加显著，与刺激前（0 h）比较，差异有统计学意义（P＜0．05）。结果提示，内毒素耐受可能对NOD2信号通路有抑制作用。
关键词： 内毒素耐受 脂多糖 核苷酸结合寡聚化结构域2 烟曲霉 -
核苷酸结合寡聚化结构域2在大鼠烟曲霉菌性角膜炎角膜局部的表达
目的 探讨大鼠角膜真菌感染后角膜局部核苷酸结合寡聚化结构域2(NOD2)的表达.方法 在大鼠左眼角膜上制作烟曲霉菌性角膜炎的模型(实验组),右眼作为对照组.在感染后第2天(早期)、第6天(中期)及第14天(晚期)取下角膜组织,采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测NOD2在不同病程角膜组织中的表达.结果 在实验组角膜中,NOD2早期开始表达,中期达高峰,以后逐渐下降.实验组与对照组早、中期NOD2 mRNA表达的差异均有统计学意义(P值均<0.05),晚期的差异无统计学意义(P>0.05);且实验组早期与中期、中期与晚期表达的差异均有统计学意义(P值均<0.01).结论 NOD2参与角膜烟曲霉菌性感染后角膜局部的免疫反应.
关键词： 真菌性角膜炎 烟曲霉菌 核苷酸结合寡聚化结构域2 -
NOD2在狼疮性肾炎患者肾脏组织中的表达
目的 研究核苷酸结合寡聚化结构域2(NOD2)即CARD15在狼疮性肾炎(LN)患者肾脏组织中的表达和分布情况,探讨NOD2在LN中的作用.方法 收集25例行病理活组织检查(活检)LN患者的肾脏组织,另取因肾实质性肿瘤行手术切除远离肿瘤2 cm以外的4例正常肾脏组织作为对照,采用免疫组织化学染色法检测2组肾脏组织中NOD2的表达分布情况,实时荧光定量PCR (qPCR)检测上述肾脏组织中NOD2 mRNA表达水平,分析LN患者NOD2 mRNA与临床指标的相关性.结果 LN患者肾脏组织中NOD2表达较正常肾脏组织增高(P＜0.01).Ⅱ型LN仅肾小管上皮细胞内有少量NOD2表达,Ⅲ型和Ⅳ型LN肾小球上皮细胞(壁层上皮细胞、足细胞)、肾小管上皮细胞中均有NOD2表达,Ⅴ型LN肾小管上皮细胞内NOD2表达明显增强.Ⅱ～Ⅴ型肾脏组织中NOD2表达水平均比正常对照组升高(P均＜0.01),并且各型肾脏组织中NOD2表达水平由低至高排列为Ⅱ型、Ⅴ型、Ⅲ型、Ⅳ型(P均＜0.05).qPCR检测发现LN患者肾脏组织中NOD2 mRNA水平较正常组升高(P＜0.01).LN患者肾脏组织NOD2 mRNA表达水平与临床指标无关(P均＞0.05).结论 NOD2可能参与了LN的发病过程,可能是LN疾病进程中的一个重要炎症介质.
-
NOD2信号对人肺泡巨噬细胞抗结核分枝杆菌活性的影响及机制研究
目的：研究核苷酸结合寡聚化结构域2（NOD2）信号在天然抗结核免疫中的作用。方法平板计数法评价NOD2信号对人肺泡巨噬细胞杀结核分枝杆菌效应的影响；流式细胞术和聚合酶链反应（PCR）检测NOD2的表达；实时荧光定量PCR检测一氧化氮合成酶（iNOS）和DEF4B mRNA的表达水平；还原型二氯荧光素（DFCH）探针法测定活性氧（ROS）水平。结果NOD2信号增强了人肺泡巨噬细胞对结核分枝杆菌 H37RV的杀灭。NOD2信号刺激后，人肺泡巨噬细胞中一氧化氮（NO ）的分泌和DEF4B的表达均有所增加，但ROS水平变化不明显。结论 NOD2可能通过诱导NO和抗菌肽DEF4B的产生参与了早期的抗结核感染免疫。
关键词： 核苷酸结合寡聚化结构域2 结核分枝杆菌 巨噬细胞
