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血管紧张素Ⅱ对大鼠肾小球系膜细胞MMP-2和TIMP-2 mRNA表达的影响
正常大鼠肾小球系膜细胞的实验研究显示,血管紧张素Ⅱ(ATⅡ)对其质金属蛋白酶-2(MMP-2)的mRNA表达起降调节作用,对MMP-2基质金属蛋白酶组织抑制物-2(TIMP-2)的mRNA表达无明显影响.结果是,ATⅡ对MMP-2 mRNA/TIMP-2 mRNA二者表达的比值,起到降调节作用.
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高糖刺激下大鼠肾小球系膜细胞MMP-2,TIMP-2,MT1-MMP和CTGF的表达及意义
目的 观察高糖刺激的大鼠肾小球系膜细胞基质金属蛋白酶-2(MMP-2)及其组织抑制物-2(TIMP-2)、膜型基质金属蛋白酶-1 (MT1-MMP)和结缔组织生长因子(CTGF)的动态变化以探讨糖尿病肾病(DN)的发病机制.方法 体外培养的大鼠HBZY-1肾小球系膜细胞分为低糖(5.5mmol/L葡萄糖)组、高糖(30mmol/L葡萄糖)组和渗透压对照(5.5mmol/L葡萄糖+24.5mmol/L甘露醇)组,24、48、72、96h后采用RT-PCR及Western blotting法分别检测MMP-2、TIMP-2、MT1-MMP及CTGF的mRNA及蛋白表达情况,酶联免疫吸附法(ELISA)检测培养上清中Ⅳ型胶原的含量.结果 Western blotting结果显示,与低糖组相比,高糖组MMP-2的表达在24h时略有升高,较低糖组增加10％±4％(P＜0.05),至48h时则较低糖组减少42％±2％,其后随时间延长表达持续降低,至96h时较低糖组减少78％±2％; MT1-MMP表达在24h开始下降并随时间呈下降趋势,与低糖组相比较,在刺激的24h,高糖组MT1-MMP表达下降了29％±3％,随后持续下降,至96h则下降了78％±9％(p＜0.01).高糖组各时间点TIMP-2和CTGF表达均较低糖组增高,其中CTGF的表达在高糖刺激的24h即显著增高,为低糖组的201％±24％,随后持续增高,至培养96h为低糖组的484％±51％(P＜0.01); TIMP-2的表达在24h时较低糖组增加55％±3％,且随时间延长呈增高趋势(P＜0.01).MMP-2、TIMP-2、MT1-MMP和CTGF的mRNA表达与相应蛋白的表达趋势基本一致.与低糖组相比,高糖组细胞上清中的Ⅳ型胶原于24h即有增加,且持续增高至96h(P＜0.05).低糖组和渗透压对照组组内、组间的各指标差异均无统计学意义.结论 尽管高糖刺激早期可小幅诱导MMP-2的表达增强,但长期高糖刺激则可抑制MMP-2和MT1-MMP的表达及活化,同时促进系膜细胞TIMP-2和CTGF的表达.DN中肾小球细胞外基质的积聚可能是由于上述细胞因子和蛋白酶引起细胞外基质代谢失衡所致.
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三七总皂苷对5/6肾切除大鼠肾脏皮质细胞外基质积聚的影响
目的:观察三七总皂苷(PNS)时5/5肾切除大鼠肾皮质细胞外基质(ECM)积聚的影响,并探讨其肾脏保护机制.方法:将45只Wistar大鼠按体重随机取8只为正常对照组,余用5/6肾切除法建立慢性肾衰竭(eRE)动物模型.将造模成功后的大鼠随机分为模型组、百令胶囊组(简称对照组)、PNS低荆量组(低剂量组)、PNS高剂量组(高剂量组),分别给与相应浓度和剂量的药物,实验期问测定大鼠的尿蛋白、肾功能,治疗12周后观察其肾脏病理改变,用半定量方法计算肾小球硬化指数(GSI)和肾小管损伤指数,免疫组化法检测肾小球Ⅳ型胶原(ColⅣ)、纤连蛋白(FN)和肾皮质基质金属蛋白(MMP-2)和金属蛋白酶组织抑制物(TIMP-2)蛋白表达.结果:PNS能明显减少CRF大鼠尿蛋白的排出(P<0.05),有一定改善肾功能的作用;PNS能减轻肾脏病理损害,减轻肾小球硬化、肾小管损伤程度;PNS能下调TIMP-2蛋白表达,增加MMP-2活性,抑制了FN、Col Ⅳ在肾组织的表达(P<0.01),减轻ECM积聚.结论:PNS可能通过减少5/6肾切除大鼠尿蛋白的排出,增加肾脏MMP-2活性,降低TIMP-2表达,增加ECM降解,减轻肾小球硬化,从而起到治疗作用.
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连黄降浊颗粒对5/6肾切除大鼠肾功能和肾皮质细胞外基质积聚的影响
目的:观察连黄降浊颗粒对5/6肾切除大鼠肾功能和肾皮质细胞外基质(ECM)积聚的影响.方法:将45只Wistar大鼠随机取8只为正常对照组,余用5/6肾切除法建立慢性肾衰竭(CRF)动物模型,将造模成功后的大鼠随机分为模型组、尿毒清颗粒组(对照组)、连黄降浊颗粒低剂量组(低剂量组)、连黄降浊颗粒高剂量组(高剂量组),分别给予相应浓度和剂量的药物.实验期间测定大鼠的肾功能、尿蛋白,治疗12周后观察其肾脏病理改变,免疫组化法检测肾小球Ⅳ型胶原(ColⅣ)、纤连蛋白(FN)和肾皮质基质金属蛋白(MMP-2)和金属蛋白酶组织抑制物(TIMP-2)蛋白表达.结果:连黄降浊颗粒能明显改善CRF大鼠肾功能、减少尿蛋白的排出(P<0.05～0.01),减轻肾脏病理损害;连黄降浊颗粒能下调TIMP-2蛋白表达,增加MMP-2活性,抑制了FN、ColⅣ在肾组织的表达(P<0.01),减轻ECM积聚.结论:连黄降浊颗粒可明显改善肾功能,增加肾脏MMP-2活性,降低TIMP-2表达,增加ECM降解,减轻肾小球硬化.
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基质金属蛋白酶-2及其组织抑制物在宫颈癌中的表达
目的研究基质金属蛋白酶-2(MMP-2)及其组织抑制物(TIMP-2)在宫颈癌中的表达及其与宫颈癌生物学行为的关系.方法采用免疫组化S-P法对57例宫颈癌组织、17例正常宫颈组织MMP-2、TIMP-2进行检测,并进行x2检验及等级相关分析.结果免疫组化结果显示MMP-2、TIMP-2在宫颈癌组织中表达极显著高于正常宫颈组织(P＜0.01).MMP-2、TIMP-2在宫颈癌不同组织学类型中表达无显著性差异(P＞0.05).MMP-2表达随宫颈癌病理分级、临床分期的升高,淋巴结转移的发生而上调,但无显著性差异(P＞0.05).TIMP-2在宫颈癌临床分期Ⅱb～Ⅳ期的阳性表达显著低于Ⅰ～Ⅱa期(P＜0.05),有淋巴结转移者极显著低于无淋巴结转移者(P＜0.01).TIMP-2随病理分级升高其表达下调,但无显著性差异(P＞G.05).TIMP-2与MMP-2的表达显著负相关.结论MMP-2、TIMP-2,尤其是MMP-2/TIMP-2比率失衡在判断宫颈癌侵袭性、估计其预后中有一定意义.
关键词： 宫颈肿瘤 基质金属蛋白酶-2 基质金属蛋白酶组织抑制物-2 -
慢性阻塞性肺疾病患者外周血淋巴细胞TIMP-2的表达
目的 探讨慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者外周血淋巴细胞基质金属蛋白酶组织抑制物2(TIMP-2)的表达及其与吸烟的关系.方法 选取44例吸烟COPD患者和42例健康吸烟者作为研究对象,应用逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)检测并比较COPD患者和健康吸烟者外周血淋巴细胞TIMP-2的表达,并与吸烟指数进行相关性分析.结果 COPD患者和健康吸烟者TIMP-2 mRNA的表达分别为0.753±0.154和1.170±0.196,前者明显低于后者,两者相比有显著性差异(P＜0.05).吸烟指数与TIMP-2 mRNA呈明显负相关(r=-0.62,P＜0.05).结论 TIMP-2 mRNA表达降低,而导致蛋白酶-抗蛋白酶失衡可能与COPD的发生相关,而吸烟是影响TIMP-2 mRNA表达的较为重要的因素.
关键词： 慢性阻塞性肺疾病 基质金属蛋白酶组织抑制物-2 吸烟指数 -
PPAR-γ在LDL诱导的大鼠系膜细胞增殖和基质硬化中的作用
目的探讨PPAR-γ在LDL诱导的系膜细胞增殖和基质硬化中的作用.方法以体外培养的大鼠系膜细胞为研究对象,应用不同浓度的LDL刺激系膜细胞.应用MTT法检测细胞增殖;应用RT-PCR的方法检测LDL对MMP-2、TIMP-2、PPAR-γmRNA表达的影响;应用Western Blot的方法检测LDL对MMP-2、TIMP-2、PPAR-γ蛋白表达的影响.结果以浓度为3.125～100 μg/ml的LDL刺激系膜细胞,可促进系膜细胞的增殖,在LDL 3.125～50 μg/ml的浓度范围内,系膜细胞的增殖和LDL的浓度呈正相关(r＝0.865,P＜0.05);以浓度为12.5～100 μg/ml的LDL刺激系膜细胞,可下调MMP-2/TIMP-2 mRNA和蛋白的表达(P＜0.01);以浓度为6.25～100 μg/ml的LDL刺激系膜细胞,可下调PPAR-γ mRNA和蛋白的表达(P＜0.01).结论在LDL诱导下,PPAR-γ的下调促进了系膜细胞的增殖和系膜基质的增生.
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慢性乙型肝炎患者肝组织和血清TIMP-2水平对肝纤维化程度的评估
目的 了解慢性乙型肝炎患者肝组织和外周血清基质金属蛋白酶组织抑制物-2(TIMP-2)的表达情况,以进行对肝脏纤维化程度的评估.方法 对105例慢性乙型肝炎患者肝活检组织进行肝纤维化分期.通过免疫组化技术检测患者肝组织TIMP-2的表达水平,采用ELISA法测定患者血清TIMP-2水平.结果 随着慢性乙型肝炎患者肝纤维化程度的加重,肝组织TIMP-2表达水平逐步上升,各期之间表达差异有统计学意义(P＜0.05);与健康对照者比,S1～S4期患者血清TIMP-2水平均升高(P＜0.05),除S1与S2期之间无显著性差异外,其余各期之间TIMP-2水平有统计学差异.结论 肝组织和外周血TIMP-2表达水平可以较好地反映肝脏的纤维化程度.
关键词： 慢性乙型肝炎 基质金属蛋白酶组织抑制物-2 肝活检 -
血清TIMP-2水平对肝纤维化诊断价值的研究
目的 评价HBV感染者血清TIMP-2水平对肝纤维化诊断的临床应用价值.方法 采用ELISA法测定498例HBV感染者和100例正常对照者血清TIMP-2,采用放射免疫分析法检测HA、PCⅢ、CⅣ和LN,和采用全自动酶法测定丙氨酸氨基转移酶(ALT).结果 与健康正常人比,HBV感染者五项指标均有不同程度的升高,除慢性HBV携带者PCⅢ、CⅣ、LN、ALT和慢性肝炎轻度患者CⅣ水平与对照组比无统计学差异外,其余各组均与对照组比有显著性差异(P＜0.05);从急性肝炎至肝硬化患者血清TIMP-2水平依次进行性升高,其中慢性HBV携带者与急性肝炎患者血清TIMP-2水平分别为78.56±26.23ng/ml和92.65±21.93ng/ml,两者相比差异显著(P＜0.01).血清TIMP-2与HA、PCⅢ、CⅣ和LN呈显著正相关(P＜0.05),与ALT也呈正相关(＜0.05).结论 本文检测的肝纤维化指标均可不同程度地反映肝脏的纤维化程度,其中以血清,TIMP-2较为可靠和有效.
关键词： 肝纤维化 基质金属蛋白酶组织抑制物-2 透明质酸 Ⅲ、Ⅳ型胶原 层粘连蛋白 -
基质金属蛋白酶-2及其组织抑制因子表达失衡与卵巢上皮性肿瘤血管生成的关系
目的 探讨基质金属蛋白酶-2(MMP-2)和基质金属蛋白酶组织抑制物-2(TIMP-2)在卵巢上皮性肿瘤血管生成中的作用及临床意义.方法 应用免疫组化SABC法检测20例卵巢良性上皮性肿瘤组织、20例卵巢交界性上皮性肿瘤组织、50例卵巢上皮性癌组织中MMP-2及TIMP-2的表达及微血管密度(MVD).结果 MMP-2阳性表达组的MVD值明显高于阴性表达组的MVD值(P=0.000),卵巢肿瘤组织中MMP-2的表达水平与TIMP-2的表达呈负相关.结论 MMP-2和TIMP-2表达失衡可能在卵巢上皮性肿瘤血管生成中起重要作用,检测MMP-2和TIMP-2的表达可作为反映卵巢癌侵袭和转移潜能的生物学指标.
关键词： 卵巢肿瘤 基质金属蛋白酶-2 基质金属蛋白酶组织抑制物-2 微血管密度 血管生成 -
氟伐他汀对5/6肾切除大鼠肾脏皮质细胞外基质积聚的影响
目的观察降脂药氟伐他汀对5/6肾切除大鼠肾皮质细胞外基质(EGM)积聚的影响和探讨其降脂作用外的肾脏保护机制.方法将5/6肾切除大鼠随机分为模型组和氟伐他汀治疗组(治疗组),另设假手术组作为对照.实验期间测定尿蛋白排泄率;氟伐他汀处理(7 mg@kg-1@d-1)13周后免疫组化法检测肾小球Ⅳ型胶原(ColⅣ)及纤连蛋白(FN)蛋白表达;酶谱法检测肾皮质基质金属蛋白酶(MMP)-2活性;免疫印迹检测金属蛋白酶组织抑制物(TIMP)-2蛋白表达.结果与假手术组相比,模型组大鼠尿蛋白排泄、肾小球Ⅳ型胶原和FN表达均明显增加(均为P＜0.01).模型组大鼠肾皮质MMP-2活性较假手术组明显降低(P＜0.01),而TIMP-2蛋白表达明显上调(P＜0.01).氟伐他汀治疗后这些改变均明显好转.结论氟伐他汀可能通过增加5/6肾切除大鼠肾脏MMP-2活性和降低TIMP-2表达,从而能增加细胞外基质降解和减轻肾小球细胞外基质积聚.
