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错配修复、微卫星不稳定性与散发性结肠直肠癌
近年来研究发现DNA修复基因突变引起DNA错配修复系统的功能降低或丧失，从而引起遗传物质不稳定，主要表现为微卫星不稳定性，进而导致肿瘤的发生。我们采用PCR技术对48例散发性结肠直肠癌检测了错配修复基因hmsh3、hmsh6和4个位点的微卫星不稳定性，现将结果报告如下。 1．材料与方法：(1)临床资料：我院1997～1998年经手术切除的新鲜结、直肠癌标本48例，其中男女各24例；年龄26～72岁，平均53岁；结肠癌29例（右半结肠癌15例，左半结肠癌14例），直肠癌19例；高分化癌19例，中分化癌22例，低分化癌7例；22例伴淋巴结转移；Dukes A期10例、B期及C期各14例、D期10例。（2）基因组DNA的提取：本组病例标本DNA提取方法参照文献［1，2］，48例标本的DNA均经琼脂糖电泳，溴乙锭染色，并在紫外灯下观察证实DNA提取成功。（3）错配修复基因突变的检测：应用PCR技术对提取的48对基因组DNA进行hmsh3和hmsh6基因突变的检测。（4）微卫星DNA引物：由上海生物工程公司合成。（5）PCR扩增与分析：方法见文献［3，4］。（6）结果判定：与相应正常组织细胞DNA的微卫星扩增片段比较，出现额外的DNA等位片段或等位片段出现缺失，等位带的移动、强度增加或获得额外的带型均为阳性。（7）统计学处理：数据的分析应用χ2检验和t检验。
