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补肾益气和血方中药对胚泡着床障碍小鼠子宫内膜表面胞饮突表达的影响
目的观察补肾益气和血方中药对胚泡着床障碍小鼠子宫内膜表面胞饮突表达的影响.方法选择8～12周龄昆明小鼠,于妊娠第4天(Pd4)晨,皮下注射米非司酮,制成胚泡着床障碍模型.然后将妊娠小鼠随机分为正常组、模型组和治疗组,治疗组从Pd1开始灌服中药(补肾益气和血方),正常组和模型组则给予等量生理盐水灌服,模型组和治疗组于Pd4晨皮下注射米非司酮,正常组则注射等量生理盐水.采用扫描电镜观察各组小鼠在Pd4晚21时30分～22时(第1时间点,T1)和Pd5上午9时30分～10时(第2时间点,T2),共两个时间点子宫内膜表面胞饮突的表达.结果模型组妊娠率(25%)较正常组(90%)显著降低,差异有显著性(P<0.05),模型组平均着床胚泡数为(7.7±1.3)个,正常组为(14.7±1.4)个,两组比较,差异有极显著性(P<0.001);治疗组的妊娠率(55%)及平均着床胚泡数[(12.3±0.8)个]均较模型组显著增加(P<0.05,P<0.01).T1时正常组子宫内膜表面表达大量发育中的胞饮突,至T2时则表达大量发育完全的胞饮突;T1时模型组子宫内膜发育不同步,胞饮突仅在局部少量表达,至T2时则表达完全消失;T1时治疗组子宫内膜表面表达大量发育中的胞饮突,与正常组相比略延后,至T2时子宫内膜表面表达较多发育完全的胞饮突.结论 T1时胞饮突的表达减少,T2时胞饮突的完全消失,可能是米非司酮导致胚泡着床障碍的原因之一;促进子宫内膜表面胞饮突的表达,可能是补肾益气和血方中药促进子宫内膜接受性的建立和改善胚泡着床的机制之一.
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改良原核期胚胎评分系统在常规体外受精-胚胎移植中的应用
目的探讨原核期胚胎评分(原核评分)系统在常规体外受精-胚胎移植(IVF-ET)中的应用价值.方法应用改良的原核评分系统对受精后16～18 h的受精卵进行评分,然后在受精后第3天根据卵裂期胚胎的形态,并参考原核评分选择移植胚胎.结果在178个常规IVF-ET周期中,当移植胚胎的平均原核评分(移植胚胎的原核评分总和/移植胚胎的数目)达13分时,临床妊娠率和胚胎植入率分别为49.1%和26.5%,显著高于原核评分<13分的29.4%和15.0%.随着移植胚胎中原核评分为满分(15分)的数目增加,临床妊娠率、胚胎植入率和多胎妊娠率也随之增加,但差异无显著性(P>0.05).可供冷冻的胚胎比例也与原核评分有关.当原核评分≥11分时,77.2%的胚胎在受精后第3天可供移植或符合冷冻标准;而<11分时,仅有46.1%的胚胎符合标准(P<0.001).结论原核评分是辅助选择移植胚胎的有效参数,但原核期胚胎形态只能部分反映胚胎发育的潜能,因此必须与卵裂期胚胎评分结合使用.
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原因不明性原发不孕患者子宫内膜白血病抑制因子基因的表达
目的探讨白血病抑制因子（LIF）基因在子宫内膜的表达与原因不明性原发不孕的关系。方法采用逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）技术，对35例原因不明性原发不孕患者（病例组）和20例继发不孕患者（对组照）的黄体中期子宫内膜行LIF mRNA检测。结果对照组患者黄体中期LIF mRNA表达水平为1.093±0.761（±s，下同），病例组患者为0.448±0.239，两组相比，差异有极显著性（P<0.01）。结论 LIF可能参与了胚泡着床过程。LIF的基因表达缺陷或减弱，可能是导致原因不明性原发不孕的原因之一。
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HOXA10基因在子宫内膜组织中的表达及与不孕的关系
目的探讨HOXA10基因在正常育龄妇女及不明原因不孕患者子宫内膜中的表达,在着床过程中的作用及与不孕的关系.方法采用原位杂交和逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术,检测52例正常育龄妇女及38例不明原因不孕患者子宫内膜组织中HOXA10基因mRNA的表达.其中,正常育龄妇女子宫内膜周期为10例增殖早期、10例增殖晚期、9例分泌早期、16例分泌中期、7例分泌晚期,不明原因不孕患者子宫内膜周期为增殖早期7例、增殖晚期8例、分泌早期6例、分泌中期11例、分泌晚期6例.结果 (1)HOXA10基因mRNA在正常育龄妇女子宫内膜腺体及间质中均有表达.原位杂交法检测(以显色区灰度阳性单位表示)显示,分泌中期腺体为5.69±0.57、间质为7.48±0.67,分泌晚期腺体为5.99±0.40、间质为7.98±1.08,显著高于增殖早期(腺体3.04±0.30,间质3.25±0.31)、晚期(腺体3.35±0.20,间质3.20±0.37)和分泌早期(腺体3.07±0.26,间质3.18±0.27)(P＜0.01);分泌中、晚期间质表达高于腺体(P＜0.01).RT-PCR法检测显示,HOXA10基因mRNA表达,分泌中期为(57.0±3.4)%、晚期为(56.2±2.9)%,显著高于增殖早期的(31.8±2.6)%、晚期的(32.2±2.3)%和分泌早期的(32.5±1.6)%.(2)不明原因不孕患者HOXA10基因mRNA在月经周期不同时期子宫内膜腺体和间质中表达基本一致,无明显的分泌中、晚期峰.结论 HOXA10基因可能在胚胎着床过程中起某种作用,着床期的低表达可能与着床障碍有关,并在蜕膜化过程中起作用.
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自然及促排卵周期子宫内膜整合素α4β1的表达
目的了解氯米芬(CC)、绝经期促性腺激素(hMG)对黄体中期子宫内膜整合素α4β1表达的影响。方法应用单克隆抗体，采用免疫组织化学技术检测48例正常妇女自然周期以及48例正常妇女、30例多囊卵巢综合征患者应用CC/绒毛膜促性腺激素(hCG)及CC/hMG/hCG方案促排卵治疗后黄体中期子宫内膜整合素α4β1的表达。结果子宫内膜整合素α4β1在正常妇女自然周期着床窗口期呈现强阳性表达，而CC、hMG抑制整合素α4β1的表达，两者比较，差异有极显著性（P<0.01）；妊娠者较未妊娠者整合素α4β1表达强度高。结论促排卵周期黄体中期整合素α4β1表达下降或缺失，子宫内膜容受性下降，妊娠率降低。
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超排卵周期卵巢反应性与体外受精、卵胞浆内单精子注射结局的关系
目的探讨超排卵周期中卵巢反应性与体外受精(IVF)、卵胞浆内单精子注射(ICSI)结局的关系.方法回顾分析1999年3月至2000年12月间,474对不孕夫妇在本中心按常规方法行IVF-胚胎移植(ET)及ICSI治疗的510个周期.采用促性腺激素释放激素激动剂(GnRH-a)/高纯促卵泡激素(FSH-HP)/人绒毛膜促性腺激素(hCG)长、短方案促排卵,以注射hCG日血清雌二醇(E2)>11 010 pmol/L(160个周期)为A组,获卵数>15个(148个周期)为B组,A、B两组为卵巢高反应组;E2≤11 010 pmol/L(350个周期)为C组,获卵数≤15个(362个周期)为D组,C、D两组为正常反应组.结果高反应组与低反应组间,年龄、不孕时间、基础FSH水平及FSH用量差异有显著性(P<0.01,P<0.05).A组着床率、妊娠率分别为18.9%(94/498)与38.8%(62/160),C组分别为20.7%(212/1 026)与 41.4%(145/350),两组比较,差异无显著性(P>0.05);B组分别为22.5%(103/457)与46.6%(69/148),D组分别为19.0%(203/1 067)与38.1%(138/362),两组比较,差异无显著性(P>0.05).卵巢过度刺激综合征(OHSS)发生率,A组为6.9%(11/160),C组为2.6%(9/350),B组为8.1%(12/148),D组为2.2%(8/362),A组与C组比较、B组与D组比较,差异均有极显著性(P<0.01).结论高E2水平或获取多个卵子不影响IVF、ICSI的结果,但OHSS发生率高.
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介入联合止血纱布治疗子宫切口妊娠清宫术中再出血
剖宫产后子宫切口妊娠(cesarean section pregnancy,CSP)是指孕卵植入子宫切口瘢痕部位,即孕卵在子宫切口部位着床和发育,属异位妊娠的一种特殊类型.近年来剖宫产切口瘢痕妊娠的发生率逐渐增多,文献报道其发病率已达0.045％[1].如处理不当,盲目清宫很容易造成大出血、子宫破裂甚至切除子宫,危及生命[2].目前,子宫动脉栓塞术(uterine arterial embolization,UAE)已经成为临床治疗较有效的方法.为能更有效的治疗并减少出血,我们于2009年1月至2011年1月回顾性分析我院和天津市中心妇产科50例子宫下段切口妊娠已行UAE治疗后、清宫术中再出血的患者的临床资料,报告如下.
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关于孕酮的那些事儿
孕酮(黄体酮)是由卵巢黄体分泌的一种天然孕激素,在体内对雌激素激发过的子宫内膜有显著形态学影响,为维持妊娠所必需.其药理作用主要为:①在月经周期后期使子宫黏膜内腺体生长,子宫充血,内膜增厚,为受精卵植入作好准备.受精卵植入后则使之产生胎盘,并减少妊娠子宫的兴奋性,抑制其活动,使胎儿安全生长.②在与雌激素共同作用下,促使乳房充分发育,为产乳作准备.
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LIFR在原发不孕症患者子宫内膜的表达
目的 探讨白血病抑制因子受体(Leukaemia inhibitory factor receptor,LIFR)在子宫内膜的表达,与原因不明原发不孕症的关系.方法 采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术,检测30例研究组(原因不明原发不孕症患者)和20例对照组患者分泌中期子宫内膜LIFRmRNA的表达.结果 研究组分泌中期子宫内膜LIFRmRNA表达水平为0.640 1±0.234 9,对照组为1.558 7±0.296 1,研究组较对照组明显降低,差异有极显著性(P＜0.001).结论 LIFR表达减少或缺失,可能与原因不明原发不孕症有关.
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白血病抑制因子在原发不孕症患者子宫内膜的表达
目的:探讨白血病抑制因子(LIF)在子宫内膜的表达与原发不孕症的关系.方法:采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术,检测30例原发不孕症患者(观察组)和20例对照组患者分泌中晚期子宫内膜LIF mRNA的表达.结果:对照组患者分泌中晚期子宫内膜LIF mRNA的表达水平为1.872±0.431,观察组为0.426±0.108,两组相比,差异有显著性(P＜0.001).结论:LIF表达的减少或缺失,可能是原发不孕症的原因之一.
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Rack1在大鼠子宫中的表达
目的:探讨有活性的激酶C受体(Rack1)与胚胎着床及蜕膜化的关系.方法:建立大鼠早期妊娠、假孕、延迟着床和人工诱导蜕膜化模型,收集各种模型的子宫材料,利用免疫组化方法检测Rack1在大鼠子宫中的表达.结果:Rack1在妊娠第6～9天的子宫蜕膜上呈强表达;假孕第6～9天和延迟着床的大鼠子宫腔上皮下基质中无明显的免疫信号,而延迟着床激活胚胎周围的腔上皮下基质中有强的免疫信号.蜕膜化子宫中整个蜕膜区呈强的免疫染色信号.结论:Rack1蛋白的表达与胚胎着床及蜕膜化过程密切相关.
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降钙素对小鼠胚泡发育及植入的影响
目的:探讨降钙素对小鼠胚泡发育及植入的影响.方法:将孕4 d小鼠胚泡随机接种到添加不同浓度降钙素的培养液内培养,观察记录胚泡的孵化、粘附及扩展等生长情况.于孕4 d给小鼠子宫角注射降钙素抗体,孕8 d检查胚胎植入数并进行组织学观察.结果:培养液内加入10 nmol/L降钙素后,胚泡的孵化、粘附及扩展率均明显提高(P＜0.01),注射降钙素抗体的小鼠,其胚胎植入数明显减少(P＜0.001),镜下可见胚胎组织蜕化坏死,蜕膜细胞空泡变性.结论:降钙素可促进小鼠胚泡的孵化、粘附及扩展和促进胚泡植入.
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胚泡着床过程中小鼠子宫内膜细胞表面糖基变化的研究
目的：探讨细胞表面糖基在胚泡着床中的作用。方法：用刀豆凝集素(ConA)、荆豆凝集素(UEA)、麦胚凝集素(WGA)、花生凝集素(PNA)和麦胚凝集素(WGA)为分子探针作亲合细胞化学染色，检测了与4种凝集素相对应的受体糖基在小鼠子宫内膜中的表达变化。结果：在胚泡植入期间，ConA受体一直为弱阳性，变化不明显；UEA受体主要分布于内膜表面上皮和腺上皮细胞表面，随妊娠天数增加含量逐渐减少直至消失；PNA受体出现于孕5d，在着床处的蜕膜细胞膜上明显增多；着床前期，WGA受体主要分布于子宫内膜表面上皮和腺上皮细胞膜上，胚胎植入后，WGA受体在着床处的蜕膜细胞膜上明显增多。结论：在着床期子宫内膜各种细胞的凝集素受体糖基呈现规律性变化，提示子宫内膜糖基的变化与胚泡着床密切相关。
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Ⅱ型残角子宫妊娠误诊致破裂2例分析
残角子宫妊娠是指受精卵植入残角子宫的一种罕见异位妊娠.Buttran将残角子宫分为三型:I型为残角子宫宫腔与正常子宫宫腔相通,Ⅱ型为不通,Ⅲ型为无宫腔,其中以Ⅱ型多见[1].残角子宫妊娠发生率占总妊娠的1/76 000.Nahum 报道,残角子宫破裂可发生于妊娠各期,早孕期破裂占13%,中孕占67%,晚孕占20%[2].本篇报道2例Ⅱ型残角子宫妊娠误诊致破裂出血患者,1例发生在中期妊娠(第16+3周),1例为足月妊娠(第40+5周).
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卵浆置换第四代试管婴儿诞生
2月24日上午9点30分,我国第1例第四代试管婴儿在武汉大学人民医院出生了.2003年5月,结婚9年未能生育的武汉某公同的黄先生和妻子慕名来到武汉大学医院生殖医学中心求治.经检查,是因为女方的卵子的活力差,质量不高,才造成多年不孕.该中心的专家决定采用第四代试管婴儿技术治疗,将另一名女性新鲜健康卵子的卵浆注入黄妻的卵细胞中,然后与黄先生的精子在体外受精,再将受精卵植入黄妻的子宫体内.
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卵子与精子共培养时间对体外受精结局的影响
目的:探讨卵子与精子短时间或长时间共培养对体外受精结局的影响.方法:选择140个体外受精(IVF)周期作为研究对象,按精-卵共培养时间分为二组:A组(18 h)共77个周期,B组(2 h)共63个周期.B组在培养2 h后将卵-冠-丘复合物移人新鲜的培养液中.将2组的受精率、卵裂率、优质胚胎率、胚胎植入率、临床妊娠率进行比较.结果:B组的受精率、优质胚胎率、胚胎植入率、临床妊娠率均显著高于A组,卵裂率无明显差别.结论:长时间的精-卵共培养可能对受精及胚胎发育产生不利影响,缩短培养时间可以提高受精率、胚胎质量、胚胎植入率,继而提高临床妊娠率.
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子宫内膜胚泡黏附时着床点与着床旁组织的分离
目的:分离小鼠子宫内膜胚泡着床点和着床旁组织,以利于对着床机制及生育调控的研究.方法: 取妊娠第5天(D5)小鼠,尾静脉注射0.4%台盼蓝(Trypan blue),10 min后脱颈处死,取小鼠子宫,用处理的4号针头滑动挤压子宫角.结果: 取得的子宫内膜完整,着床点染成蓝色,与着床旁组织区别明显,易于分离.结论: 用简便易行的方法,分离小鼠胚泡着床点和着床旁组织,为胚泡着床机制的研究提供有意义的物质材料.
