首页 > 文献资料
-
Alpha-黑素细胞刺激素及其新型类似物对小鼠脑微血管内皮细胞产生组织因子的抑制作用
目的：研究Alpha-黑素细胞刺激素(α-MSH)及其新型类似物(STY39)对原代小鼠脑微血管内皮细胞( MBMEC)在脂多糖( LPS)刺激下产生组织因子( TF)和组织因子途径抑制物( TFPI)的影响。方法选用雌性BALB/c小鼠,纯化并原代培养MBMEC,培养至5~7 d,采用免疫荧光法检测Ⅷ因子相关抗原,鉴定MBMEC模型。将MBMEC分为PBS对照组,LPS刺激组,LPS刺激后1、2、3 h加入10-7mol/L的α-MSH或STY39组(LPS+α-MSH,LPS+STY39),共8组,每组4孔。分别在LPS刺激后6 h和8 h收集细胞培养上清液和细胞,应用酶联免疫吸附法检测细胞上清液的TF和TFPI浓度,RT-PCR检测细胞TF mRNA表达水平。结果(1) LPS 可诱导 MBMEC 产生 TF 和TFPI蛋白,细胞培养上清液中TF水平于6 h达到高峰, TFPI水平于8 h达到高峰。(2) LPS刺激 MBMEC后1、2、3 h给予10-7mol/L的α-MSH或 STY39,均可显著降低细胞上清液中 TF蛋白含量(P<0.01),尤其在 LPS刺激后1 h给予α-MSH 或 STY39的效果显著(P <0.05), STY39降低TF含量的作用较α-MSH明显(P<0.05)；但α-MSH和STY39对LPS诱导MBMEC产生TFPI均没有显著的上调作用。(3)在LPS刺激后不同时间点给予10-7mol/L的α-MSH 或STY39,均可显著下调MBMEC TF mRNA的表达水平(P<0.01),其中1 h时间点作用显著(P<0.05),但α-MSH与STY39的作用差异无统计学意义。结论α-MSH和 STY39均能抑制LPS诱导原代 MBMEC 产生 TF 蛋白和表达 TF mRNA,且 LPS 刺激1 h 后给药效果较好；STY39对MBMEC产生TF蛋白的抑制作用优于α-MSH。
-
Alpha-黑素细胞刺激素对内毒素血症小鼠肝肺组织表达高迁移率族蛋白1的抑制作用
目的 研究Alpha-黑素细胞刺激素( α-MSH)对内毒素血症小鼠肝、肺组织中表达高迁移率族蛋白1(HMGB1)的调控作用.方法 腹腔内注射(ip)LPS(25 g/kg)和D-Gal(100 mg/kg)建立内毒素血症小鼠模型,分别在LPS刺激小鼠1、2、3 h后腹腔注射α-MSH(2.5 mg/kg),24 h后处死小鼠,取小鼠肺、脑、脾、肝、肾组织,应用RT-PCR和Western blot的方法,从基因、蛋白两个水平检测α-MSH对HMGB1表达的调节作用.结果 HMGB1 mRNA及蛋白在内毒素血症小鼠肺、脑、脾、肝、肾中均有表达,但在肝、肺中的表达量高于其他组织;于LPS刺激小鼠3 h之内腹腔注射α-MSH,能显著下调HMGB1 mRNA及蛋白的表达,并且1 h之内给药效果理想.结论 α-MSH能有效抑制内毒素血症小鼠肝、肺组织中HMGB1的表达.
关键词： Alpha-黑素细胞刺激素 高迁移率族蛋白1 内毒素血症
