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显微图像分析技术在淋病诊断中的应用
医学显微图像分析一直是生物医学工程中非常活跃的领域,但目前国内对淋病涂片的显微图像分析,仅仅停留在对普通涂片的视频采集后人工识别的阶段,仍过分依赖检验人员的主观经验,故初筛诊断存在假阳性和假阴性结果均较高的缺点.本文将显微图像处理技术用于淋病病原体显微图像分析,通过研究如何对图像进行分割、细胞区域标记,实现淋球菌的自动计数和淋球菌与多形核白细胞的定位关系,为淋病初筛诊断提供更为准确的依据.
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细胞周期蛋白G2在胃癌组织中的表达和其对胃癌细胞株体外增殖影响的研究
目的研究G型细胞周期蛋白(cyclin)家族中的新成员-cyclin G2在胃癌组织中的表达和其对胃癌细胞株SGC-7901体外增殖的影响.方法通过免疫组织化学技术检测40例胃癌标本中cyclin G2蛋白的表达情况并进行显微图像分析;利用阳离子介导的脂质体转染试剂将包含有cyclin G2的真核表达载体-pIRES-G2转染SGC-7901,经G418克隆筛选后获得稳定表达cyclin G2的细胞克隆,噻唑蓝法(MTT)比色法测定转染后细胞增殖活性的改变.结果①Cyclin G2在非癌组织、分化型癌和差分化型癌组织中的阳性率和表达强度逐渐下降且差异有统计学意义(P＜0.01).②转染pIRES-G2获得的克隆细胞的体外增殖能力降低(P＜0.01).结论 Cyclin G2基因很可能是一种候选的抑癌基因,随着胃癌恶性程度的增加其表达水平降低;外源性基因转染导致的cyclin G2异常性高表达可显著抑制胃癌细胞株的体外增殖能力.
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肺癌平药物血清对A549人肺癌细胞端粒酶活性的影响
目的:探讨肺癌平治疗肺癌的作用机制.方法:采用血清药理学方法孵育A549人肺癌细胞,通过原位杂交及显微图像分析方法检测药物血清作用后A549人肺癌细胞端粒酶活性的变化.结果:原位杂交法显示端粒酶表达在人肺腺癌A549细胞浆内,肺癌平药物血清作用后,酶活性受到抑制.显微图像分析药物血清组与正常组比较,差异显著,具有统计学意义,提示肺癌平药物血清具有降低端粒酶活性的作用.结论:肺癌平治疗肺癌的作用机制是通过抑制肺癌细胞端粒酶活性实现的.
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家兔实验性心肌缺血损伤机制的研究
目的研究左室前壁缺血不同时间琥珀酸脱氢酶(SDH)和酸性磷酸酶(ACP)活性的改变,探讨心肌缺血损伤的机制.方法结扎22只家兔的左冠状动脉主干建立实验性心肌缺血动物模型,利用硝基四氮唑蓝法和硝酸铅法研究结扎后0.5、1、2、4、8、12 h后左室前壁SDH、ACP活性的动态变化,并用MetaMorph/CoolSnap./AX70显微图像分析系统进行分析.结果①结扎后1 h SDH平均灰度值为97.85±8.13,缺血2、4、8、12 h平均灰度值分别为105.37±6.07、112.58±5.18、124.88±12.12和144.60±13.99,与对照组比较显著升高(P＜0.01);②结扎后4 h ACP平均灰度值为186.49±15.70,缺血8、12 h平均灰度值分别为173.16±12.64和162.51±11.52,与对照组比较显著下降(P＜0.01).结论线粒体损伤引起的SDH活性减低和溶酶体破坏造成的ACP激活在心肌缺血损伤的发生和发展过程中可能起重要作用.
关键词： 心肌缺血 酶组织化学 显微图像分析 琥珀酸脱氢酶(SDH) 酸性磷酸酶(ACP) -
非小细胞肺癌组织中细胞凋亡与p53蛋白表达的定量研究
目的:观察非小细胞肺癌(NSCLC)组织中Caspases介导的细胞凋亡与p53蛋白表达情况,探讨两者之间的相关关系和意义.方法:临床手术切除的NSCLC标本44例,其中鳞癌20例,腺癌24例.采用Caspase特异的单克隆抗体M30 CytoDEATH免疫组化染色显示凋亡细胞,计算凋亡指数(AI);免疫组化法检测p53蛋白表达,用显微图像分析系统测定阳性细胞百分率(P/A)、平均光密度 (AOD)及阳性水平指数(PLI).结果:NSCLC组织中M30阳性率为25.0%,肺鳞癌组织的M30阳性率明显高于肺腺癌组织(P<0.05).低分化鳞癌组织的AI高于中、高分化鳞癌(P<0.05).NSCLC组织中p53蛋白阳性率为52.2%.p53蛋白的PLI与癌细胞AI之间无直线相关关系.结论:在NSCLC组织中存在Caspases介导的细胞凋亡机制,且与组织学类型及组织分化程度有关.p53蛋白表达与癌细胞凋亡无相关关系,提示突变型p53蛋白失去了激活 Caspases而诱导细胞凋亡的作用,与肺癌的发生、发展、治疗及预后有关.
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EGFR在鼻咽癌临床分期中作用及与中医证型关系初探
目的 探讨EGFR与鼻咽癌临床病理特征的相关性并初探其与中医证型的关系.方法 利用免疫组织化学二步法检测不同中医证型鼻咽癌组织60例及慢性鼻咽炎组织20例中EGFR的表达情况,结果经IPP6.0进行图像分析.结果 EGFR在鼻咽癌组织中的表达明显高于慢性鼻咽炎组织(P=0.003＜0.1);Ⅰ期与Ⅱ期鼻咽癌患者病理组织MOD(EGFR)之间无显著性差异(P=0.381＞0.05),其他组间都存在显著性差异,随着临床分期的升高,MOD (EGFR)逐渐增大.鼻咽癌组织EGFR的表达与T分期相关,而与N分期无关;初诊鼻咽癌以痰浊结聚证(48.3％)及气血凝结证(40.0％)多见.痰浊结聚证与火毒困结证之间MOD(EGFR)无显著性差异(P=0.659＞0.05),但气血凝结证患者MOD(EGFR)明显高于痰浊结聚证及火毒困结证患者.结论 在鼻咽癌组织中存在EGFR的高表达,EGFR表达可能与肿瘤细胞增殖活性密切相关,鼻咽病理组织中EGFR的免疫组化测定作为一种常规检测应用于临床具有一定的推广应用价值.气血凝结证鼻咽癌患者的预后可能较痰浊结聚及火毒困结证患者差.
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不同深度牙体窝洞制备对人成牙本质细胞影响的实验研究
目的:建立牙体制洞的体外实验模型,研究不同深度的窝洞对人成牙本质细胞的影响.方法:20～30岁成人健康第三磨牙40个,随机分为4组(3个实验组和1个对照组),分别制浅(A组)、中(B组)、深(C组)3种不同深度窝洞,冠根分开,37℃,50 mL/L CO2连续培养2 d,每天换液.扫描电镜检测成牙本质细胞形态,显微图像分析系统计算台盼蓝染色率,并进行统计学分析.结果:髓室顶中央区域,牙本质小管开放,仅见极少量的细胞碎片,周围区域成牙本质细胞形态良好;各实验组之间的台盼蓝染色率在统计学上有显著性差异(P＜0.01).结论:制备窝洞不同深度均对成牙本质细胞造成损伤,随着制洞深度的增加,成牙本质细胞受到的损伤明显加重.
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红细胞在不同pH值下膜动力学特性与携氧能力的变化
目的: 研究单个活态人血红细胞在不同pH值(pH 5.8 ～ 9.0)下的膜动力学特性与携氧能力. 方法: 用新型快速显微多道分光光度技术和显微生物医学图像分析技术(fast multi-channel micro-spectrophotometer and image analysis techniques, FMIA)对红细胞形态结构、弯曲弹性模量(KC)、剪切弹性模量(μ)和吸光度(A)进行无扰、在位、实时、高灵敏度联合动态连续测量. 结果: 细胞形态随pH增大而减小;KC, μ和形状因子(roundness factor, REF)在pH 7.4～7.6时小,随酸碱度增大而增大;A在pH 7.4大,随酸碱度增大而减小. 结论: pH值与细胞的形态、膜的变形能力、流动特性和胞内血红蛋白分子氧合能力密切相关.
