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012 细胞凋亡的效应器
细胞凋亡在维持机体内环境稳定、机体防御、老化以及许多疾病的发生中起重要作用.近年来,人们逐渐认识到细胞内的蛋白水解酶在介导细胞凋亡的过程中起关键作用,其中caspases在细胞凋亡中的作用愈来愈受到关注.本文对细胞凋亡的效应器--caspases的一般生物学特性、与细胞凋亡的关系及凋亡信号的caspases级联等进行了综述.
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氟诱导大鼠肾脏细胞凋亡与Caspase蛋白表达关系的研究
目的 探究死亡受体途径、线粒体途径与氟诱导肾脏细胞凋亡的关系.方法 48只SD大鼠随机分为4组:对照组、低氟组、中氟组扣高氟组,每组12只,分别饮用含氟化钠浓度为0、50、100和200 mg/L的去离子水,染毒120天,观察氟斑牙形成情况,称体重,测尿氟含量.制备肾脏细胞悬液,流式细胞术(FCM)检测肾脏细胞凋亡.免疫组化检测肾脏组织中Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9及细胞色素C(Cyt C)蛋白表达.结果 与对照组比较,低氟组、中氟组、高氟组肾脏细胞凋亡率显著增高(P＜0.05).与对照组比较,中氟组、高氟组Caspase-8、Cyt C、Caspase-9、Caspase-3阳性表达的平均光密度值明显增高(P＜0.05).结论 死亡受体途径、线粒体途径可能同时参与了氟诱导大鼠肾脏细胞凋亡的过程.
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天花粉蛋白抑制HeLa细胞生长及诱导细胞凋亡之机制探讨
目的研究天花粉蛋白(TCS)对人宫颈癌HeLa细胞生长抑制作用及其机制,探讨HeLa细胞凋亡发生的分子机制.方法采用CCK-8的方法,检测TCS对HeLa细胞的抑制作用;流式细胞仪检测TCS对细胞周期的影响;电子显微镜和Annexin法观察TCS对HeLa细胞诱导凋亡的作用;应用Western blotting观察HeLa细胞caspase-3酶原的变化;用caspases活性检测试剂盒,检测caspase-3,8,9的活性.结果1.TCS对HeLa细胞的生长具有明显的抑制作用;2.TCS可以将HeLa细胞阻滞于S期;3.TCS诱导HeLa细胞发生凋亡,HeLa细胞出现典型的凋亡特征--染色质浓缩和凋亡小体,且凋亡率具有时间依赖性;4.caspase-3酶原表达的降低呈现时间和浓度依赖性,而caspase-3活性随时间依赖性的增高,提示在TCS诱导HeLa细胞凋亡的过程中caspase-3被激活;5.caspase-8,9的活性增高,有时间依赖性,且具有时间顺序.100 mg/L TCS处理24h后,caspase-8早于caspase-3被激活,提示活化的caspase-8可能对caspase-3起到激活作用.结论TCS对HeLa细胞的抑制作用是通过将HeLa细胞阻滞于S期和诱导细胞凋亡来实现的.caspase-3的激活是介导TCS诱导HeLa细胞发生凋亡的通路,同时,活化的caspase-8,9可能参与了caspase-3的激活和凋亡的诱导.
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藤黄酸通过MAPK通路诱导Jurkat细胞凋亡的机理
本研究探讨藤黄酸对Jurkat细胞的抑制作用及可能机理.以不同浓度藤黄酸与抑制剂处理Jurkat细胞,Annexin V/PI双染法检测细胞的凋亡；流式细胞仪检测荧光素激活的caspase3、caspase 8、caspase 9阳性细胞水平；免疫印迹检测pro-caspase 3、pro-caspase 9、磷酸化JNK及P38蛋白水平.结果表明,藤黄酸呈浓度依赖性诱导Jurkat细胞凋亡；藤黄酸作用Jurkat细胞后caspase3、caspase8、caspase9阳性细胞水平升高,caspase3、caspase9活化蛋白及磷酸化JNK及P38蛋白水平升高；ROS、CaMKⅡ、caspase 3、caspase 9、MAPKK、JNK1/2及P38抑制剂减弱藤黄酸诱导Jurkat细胞凋亡的作用；ROS、CaMKⅡ、MAPKK、JNK1/2及P38抑制剂降低藤黄酸作用Jurkat细胞后caspase 3、cmaspase9活化蛋白水平；ROS、CaMKⅡ、MAPKK、JNK1/2抑制剂降低藤黄酸作用Jurkat细胞后磷酸化JNK蛋白水平；ROS、CaMKⅡ、MAPKK、P38抑制剂减弱藤黄酸作用Jurkat细胞后磷酸化P38蛋白水平.结论:藤黄酸通过激活caspase途径诱导Jurkat细胞凋亡,该过程可能与ROS- CaMKⅡ-MAPKK-JNK/P38通路有关.
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5-氮杂-2'-脱氧胞苷与5-氟尿嘧啶的协同抗胃癌作用
目的:观察甲基转移酶抑制剂5-氮杂-2’-脱氧胞苷(5-Aza-2’-Deoxycytidine,5-Aza-CdR)对胃癌细胞的作用,并进一步明确他与传统化疗药5-氟尿嘧啶(5-Fu)之间的相互关系.方法:选取野生型P53的胃癌AGS和突变型P53的BGC-823细胞用2.5 μmol/L 5-Aza-CdR分别处理0-96 h,MTT检测5-Aza-CdR处理前后细胞活力的变化.为了进一步探讨5-Aza-CdR的抗胃癌作用机制,我们用Annexin V检测细胞早期凋亡、caspases活性检测凋亡诱导通路及Westem blot检测下游相关蛋白的表达.结果:与未用5-Aza-CdR处理的空白对照组细胞相比,5-Aza-CdR时间依赖性地抑制了胃癌AGS和BGC-823细胞的生长活性(P＜0.01).在探讨其作用机制时我们发现,5-Aza-CdR的抗胃癌毒性作用是通过诱导肿瘤细胞凋亡实现的.但细胞的不同P53状态可触发不同的细胞凋亡路径:在野生型AGS细胞中,5-Aza-CdR的凋亡机制是通过内源性的凋亡通路(caspase 9)所介导的；但在BGC-823细胞中,5-Aza-CdR的促凋亡效应是独立于caspase凋亡路径的,因为我们并未观察到5-Aza-CdR处理后细胞caspases活性及蛋白表达水平的增加.尤为有意义的是,当5-Aza-CdR与5-Fu联合应用后,他显著增加了AGS和BGC-823细胞对5-Fu的敏感性.结论:以上数据明显证明5-Aza-CdR可作为一种卓有成效的抗胃癌药,特别是他与传统化疗药的协同抗癌效应,将对5-Aza-CdR未来在临床上的应用提供实践指导意义.
关键词： 5-氮杂-2’-脱氧胞苷 凋亡 caspases P53 5-氟尿嘧啶 -
全反式维甲酸和Caspase抑制剂Z-VAD-FMK对胰腺癌细胞凋亡的作用
目的观察全反式维甲酸(ATRA)对体外胰腺癌细胞生长的影响以及caspase抑制剂Z-VAD-FMK对细胞凋亡的作用.方法胰腺癌细胞PaTu8988与ATRA或与ATRA+caspase抑制剂Z-VAD-FMK共同孵育后,用MTT方法观察细胞活性,观察细胞超微结构改变,DNA断裂分析,流式细胞仪检测凋亡细胞比例和测定caspase-3活性.结果ATRA对细胞的生长有明显的抑制作用.ATRA诱导后电镜和DNA断裂分析发现典型凋亡特征.与ATRA处理组相比,ATRA和Z-VAD-FMK联合作用对细胞凋亡比例无影响.ATRA组caspase-3蛋白的活性随孵育时间延长而升高,且与凋亡比例相关,Z-VAD-FMK处理组caspase-3活性明显下降.结论ATRA能够抑制胰腺癌细胞生长并诱导细胞凋亡.同时,与Z-VAD-FMK联合作用能抑制caspase蛋白活性,但未使细胞凋亡比例相应降低,提示在胰腺癌凋亡过程中可能有其他蛋白酶的作用.
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livin及半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3蛋白在子宫颈鳞癌组织中的表达及意义
livin基因是Kasof和Gomes[1]发现的凋亡抑制蛋白家族(inhibitor of apoptosis proteins,IAPs)的新成员,在恶性黑色素瘤及肾细胞癌中高表达.新研究表明,livin基因在食管癌、喉鳞状细胞癌及骨肉瘤等的发生、发展中发挥重要的作用[2-4].半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(caspase-3)是凋亡相关蛋白酶家族成员之一,它参与了细胞凋亡过程中的形态学与生化指标的改变,被认为是引发细胞凋亡的重要执行者.Nachmias等[5]认为,IAPs,主要通过与特异性的caspases结合,抑制caspases的活性,从而阻断细胞凋亡.本研究采用免疫组化法检测livin、caspase-3蛋白的表达,探讨其在宫颈鳞癌发生、发展中的作用.
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黄芩苷对人宫颈癌HeLa细胞增殖和凋亡影响机制研究
目的 观察黄芩苷对人宫颈癌HeLa细胞增殖及凋亡的影响,初步探讨其作用机制.方法 不同浓度(5、10、20、40、80和160 μg/mL)的黄芩苷作用于人宫颈癌HeLa细胞24、48和72 h后,采用CCK-8法检测黄芩苷对HeLa细胞增殖的影响;40 μg/mL黄芩苷作用于HeLa细胞24 h后,采用普通光学显微镜观察细胞形态学变化,Hoechst 33342染色后在荧光倒置显微镜下观察细胞核形态学改变;Annexin V/PI双染后采用流式细胞术检测细胞凋亡的改变;蛋白质印迹法检测Caspase家族中Caspase 3、8、9蛋白表达变化.结果 黄芩苷可明显抑制HeLa细胞增殖,随时间延长及剂量增加,细胞增殖抑制率也明显升高,P＜0.05;经40 μg/mL黄芩苷处理24 h的HeLa细胞明显变小、变圆、且有凋亡小体产生,细胞核固缩、碎裂,呈现典型的凋亡形态学改变;40 μg/mL黄芩苷处理HeLa细胞24、48 h后细胞早期凋亡率分别为(10.5±1.5)％、(21.8±2.4)％,与对照组的(1.3±0.9)％相比,差异均有统计学意义,P＜0.05;蛋白质印迹检测法结果表明,黄芩苷处理后Caspase-3蛋白由0.09上调至0.65,Caspase-8蛋白由0.04上调至1.22,Caspase-9蛋白由0.12上调至1.10,提示剪切片段蛋白的表达呈上调趋势.结论 黄芩苷可抑制人宫颈癌HeLa细胞增殖,并诱导其凋亡,其机制可能与激活Caspase相关.
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癌前病变Caspase-3表达下调与胃黏膜癌变的关联
目的观察Caspase-3蛋白在胃癌及其癌前病变组织中的表达,分析它与细胞凋亡和细胞增殖的关系,探讨Caspase-3蛋白在胃癌发生过程中的生物学意义及相关分子病理学机制.方法 选取184例胃黏膜活检和手术切除组织标本,其中胃癌20例,慢性萎缩性胃炎6例,萎缩性胃炎伴肠上皮化生(简称肠上皮化生)31例,萎缩性胃炎伴不典型增生(简称不典型增生)114例;正常对照13例.采用SABC法检测Caspase-3蛋白的表达;通过图像域值分析计算其阳性指数,分析其与细胞增殖(Ki67蛋白阳性指数)和凋亡(TUNEL指数)的相关关系.结果 Caspase-3蛋白在重度不典型增生组织中的阳性指数(29.8%±3.9%)显著低于轻度(58.3%±4.2%)和中度不典型增生(50.4%±4.8%)及萎缩性胃炎(68.3%±3.3%)或肠上皮化生(70.9%±4.3%),差异有统计学意义(P＜0.05);而与胃癌(26.9%±3.0%)相比,差异无统计学意义(P＞0.05).Caspase-3蛋白表达与细胞凋亡呈显著正相关(r=0.94,P＜0.05),Caspase-3蛋白阳性组细胞增殖指数(18.3%±2.2%)显著低于阴性组(48.9%±3.1%;P＜0.05).结论 Caspase-3蛋白在萎缩性胃炎、肠上皮化生和(或)轻中度不典型增生黏膜中表达上调,而在重度不典型增生及胃癌组织中表达下调,且这种变化与细胞凋亡呈显著正相关.Caspase-3失活或表达下调相关的细胞凋亡和增殖紊乱可能在胃黏膜损伤及癌变过程中起某种作用.
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凋亡诱导因子介导顺铂诱导的肾小管上皮细胞凋亡
目的 研究凋亡诱导因子(AIF)在顺铂诱导肾小管上皮细胞HK-2凋亡中的作用.方法 采用Western blot法和荧光实时定量聚合酶链反应(PCR)分别检测不同浓度(0、25、50、100、150、200 μmol/L)和不同时间(0、3、6、9、12 h)顺铂作用下,体外培养HK-2细胞中AIF蛋白和mRNA表达.采用免疫荧光染色检测顺铂作用下HK-2细胞AIF表达分布.采用原位末端标记(TUNEL)法和流式细胞仪检测泛caspase抑制剂和AIF靶向siRNA对顺铂作用下HK-2细胞凋亡的抑制作用.结果 经不同浓度和不同时间顺铂的作用,HK-2细胞胞质AIF(cAIF)、胞核AIF(nAIF)及其mRNA表达均有不同程度增加.从25 μmol/L顺铂作用12 h和50 μmol/L顺铂作用3 h起,cAlF表达均有升高,分别是对照组的2.3倍(P<0.05)和1.7倍(P<0.01).nAIF表达呈一定浓度和时间依赖性,在150 μmol/L顺铂作用12 h和50 μmol/L顺铂作用9 h达到高峰,分别为25 μmol/L组的4.3倍(P<0.005)和3 h组的3.7倍(P<0.05),nAIF表达与多聚腺苷二磷酸-核糖聚合酶1(PARP-1)剪切片段(cl-PARP)的表达趋势基本一致.AIF mRNA表达在50 μmol/L顺铂作用0-9 h区间呈梯度增加.免疫荧光染色结果显示,经顺铂作用后,部分HK-2细胞发生AIF核转位.泛caspnse抑制剂Z-VAD-FMK和AIF siRNA对顺铂诱导细胞凋亡的抑制率分别为60.1%和39.2%,两者联合应用的抑制作用更加明显.结论 AIF蛋白激活和核转位以及AIF mRNA表达的增加介导了顺铂诱导的肾小管上皮细胞的凋亡,可能为防治顺铂诱导的肾毒性作用提供了新靶点.
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环氧合酶-2特异抑制剂诱导胃癌细胞凋亡的机制研究
目的探讨环氧合酶-2(COX-2)特异抑制剂SC236诱导胃癌细胞凋亡的机制.方法SC236处理AGS细胞后,吖嘧橙染色观察细胞凋亡,免疫印迹法检测凋亡相关蛋白、细胞色素C水平.caspase-3的激活通过免疫印迹法检测其活性片段、其底物多聚(ADP-核糖)聚合酶(PARP)的裂解和比色法检测其催化活性来确定.结果SC236处理AGS细胞可明显提高前凋亡蛋白Bak的水平,促使细胞色素C从线粒体进入胞浆,并激活caspase-3.caspase-3的特异抑制剂z-DEVD-fmk可以抑制SC2-36诱导的凋亡,细胞凋亡率由(33.4±3.2)%下降到(16.1±1.5)%.结论SC236至少部分通过上调Bak、促进细胞色素C的释放以及激活caspase-3的途径诱导胃癌细胞凋亡.
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Caspases在消炎痛所致胃黏膜细胞凋亡中的作用
目的研究大鼠在体情况下消炎痛(IND) 所致胃黏膜细胞凋亡过程中caspase-3、-8基因及蛋白表达的变化,以探讨其黏膜损伤机制.方法 SD大鼠以不同剂量IND(30、60、90、120mg/kg)灌胃后3h处死,另设对照组.采用TUNEL标记技术检测黏膜细胞凋亡;分别采用原位分子杂交和RT-PCR检测caspase-3基因表达的变化,应用免疫组化方法同步检测caspase-3、-8蛋白表达的变化.结果 TUNEL标记显示对照组大鼠胃黏膜仅见少量凋亡细胞,IND组凋亡细胞数明显增加,计算机图像分析显示阳性细胞平均像素点在IND 30、60、90、120mg/kg组分别为对照组的6.3、8.0、12.6和17.1倍(P<0.01);原位分子杂交显示,caspase-3 mRNA在对照组胃黏膜呈弱阳性表达,IND 30～90mg/kg组呈中等至强阳性,120mg/kg组呈强阳性表达,与对照组相比均有显著差异(P<0.01), caspase-3 mRNA表达变化同细胞凋亡之间呈明显正相关(r=0.9642,P<0.01);RT-PCR显示对照组胃黏膜中caspase-3 mRNA表达量极少,IND各剂量组的caspase-3/β-actin吸光度比值较对照组明显升高(P<0.01);免疫组化染色显示对照组胃黏膜caspase-3、-8蛋白均呈弱阳性表达,caspase-3表达水平强于caspase-8(P<0.05),IND使caspase-3、-8蛋白表达呈中等至强阳性,明显高于对照组(P<0.05),IND各剂量组caspase-3表达水平均高于caspase-8(P<0.05),caspase-3蛋白表达的变化与其基因表达的变化是同步的,且两种蛋白表达的变化同细胞凋亡之间呈明显正相关(r=0.9473, r=0.9563, P<0.01).结论 IND可在转录和翻译水平上调效应子caspase-3表达,使其前体水平增加,促使其活化,与此同时使启动子caspase-8前体蛋白表达上调并使之活化,进而启动了细胞内的凋亡信号传导通路,导致胃黏膜细胞凋亡.
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肉桂醛氧氟沙星酰腙诱导人胰腺癌细胞凋亡的实验研究
目的 探讨肉桂醛氧氟沙星酰腙[N-(3-苯亚丙烯基)-6-氟-1,8-(2,1-丙氧基)-7-(4-甲基哌嗪-1-基)-喹啉-4(1H)-酮-3-甲酰肼,肉桂醛氧氟沙星酰腙]诱导人胰腺癌BxPC-3细胞凋亡的作用及机制.方法 用不同浓度的肉桂醛氧氟沙星酰腙处理BxPC-3细胞,采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法,检测肉桂醛氧氟沙星酰腙对BxPC-3细胞的增殖抑制效应;采用形态学、TUNEL法和DNA琼脂糖凝胶电泳,检测细胞凋亡的发生;应用蛋白印迹技术检测凋亡相关基因caspase-3,caspase-8,caspase-9,bcl-2,bax和细胞色素C的表达.结果 肉桂醛氧氟沙星酰腙在体外对BXPC-3细胞有显著增殖抑制效应,且呈浓度、时间依赖关系;在肉桂醛氧氟沙星酰腙作用下,BxPC-3细胞出现显著的细胞凋亡征象;Hoechst33258/PI荧光染色显示细胞固缩,核染色质聚集或断裂,形成凋亡小体;TUNEL实验统计细胞凋亡率显著高于对照组(P＜0.05);琼脂糖凝胶电泳可见凋亡细胞典型的梯状DNA条带;肉桂醛氧氟沙星酰腙使凋亡相关基因bax、caspase-9和caspase-3蛋白表达增强,bcl-2表达降低,caspase-8、caspase-9活性裂解片段增加,线粒体细胞色素C降低,胞浆细胞色素C升高.结论 凋亡是肉桂醛氧氟沙星酰腙杀伤肿瘤细胞的机制之一;肉桂醛氧氟沙星酰腙诱导胰腺癌BxPC-3细胞主要通过激活线粒体凋亡通路进行.
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细胞凋亡的分子生化机制及其在Alzheimer's病发病中的作用
目的介绍凋亡及Alzhimer's 病(AD)的研究进展.方法选择近年来具有较高学术价值的国外文献,综述了在凋亡及AD方面的新研究成果.结果与结论凋亡参与了许多体内的生理及病理过程.Bcl-2家族分子,细胞色素C,Caspase蛋白酶发挥主要的调节作用.另外凋亡过程参与了AD的病理过程.
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卵巢良恶性肿瘤caspase-1和IL-18表达及其临床病理意义
目的 研究卵巢腺癌,浆液性和黏液性囊腺瘤及正常组织中caspase-1和IL-18表达水平,探讨其临床病理意义.方法 43例卵巢腺癌、15例浆液性囊腺瘤、15例黏液性囊腺瘤和10例正常组织常规制作石蜡包埋切片,caspase-1和IL-12染色方法均为EnvisionTM免疫组化法.结果卵巢腺癌caspase-1和IL-18表达阳性率(53.5%,48.8%,)均明显低于浆液性囊腺瘤(86.7%,80.0%, P<0.05)、黏液性囊腺瘤(86.7%,86.7%, P<0.05)和正常组织(100.0%,100.0%, P<0.01);组织学分级G1、临床分期I+Ⅱ和淋巴结未转移病例caspase-1和IL-18表达阳性率明显高于组织学分级G3、临床分期Ⅲ+Ⅳ和淋巴结转移病例(P<0.05),卵巢腺癌中easpase-1表达与IL-18表达呈高度一致性(x2=12.44, P<0.01).结论 caspase-1和IL-18失表达可能是反映卵巢腺癌发生、进展、生物学行为和预后的重要生物学标志物.
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冬凌草甲素诱导膀胱癌MB49细胞凋亡及机制研究
目的 研究冬凌草甲素对膀胱癌MB49细胞株的生长抑制及诱导凋亡作用及其机制.方法 MTT法检测冬凌草甲素对MB49细胞的生长抑制作用;Hoechst 33258染色法观察细胞的形态学变化;流式细胞仪检查Annexin V-FITC-PI双染色法检测细胞凋亡率;分光光度法检测caspase-3、caspase-8和caspase-9活性变化;Western blotting检测Bcl-2和Bax蛋白表达的变化.结果 冬凌草甲素对MB49细胞有明显的生长抑制作用,呈明显的时间一效应关系和浓度一效应关系.随着冬凌草甲素作用浓度增加,凋亡细胞数和坏死细胞数均增加,浓度越高,坏死细胞的比率增加越多.随着冬凌草甲素作用时间延长,MB49细胞的Caspase-3和Caspase-9活性均升高,Bcl-2蛋白的表达逐渐减弱,Bax蛋白的表达逐渐增强,但Caspase-8未见明显变化.结论 冬凌草甲素对膀胱癌MB49有明显的抗肿瘤作用.冬凌草甲素可能主要通过Fas/FasL-线粒体途径上调Bax、下调Bcl-2,导致MB49细胞凋亡的发生.
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Caspases抑制条件下5-FU诱导乳腺癌细胞发生坏死性凋亡的作用
目的 探讨5-氟尿嘧啶(5-fluorouracil,5-FU)对乳腺癌细胞MDA-MB-231增殖的抑制作用,并在抑制caspases的条件下,对5-FU诱导的乳腺癌细胞的死亡形式进行探讨. 方法 MTT法检测不同浓度的5-FU(0,4,8,16,24,32 μmol/L)对乳腺癌细胞增殖的抑制作用,筛选适宜的药物浓度.在适宜药物浓度下实验分为对照组、z-VAD-fmk组、5-FU组、5-FU+z-VAD-fmk组,MTT法检测乳腺癌细胞存活率;PI单染流式细胞术检测乳腺癌细胞的死亡率;DAPI染色检测乳腺癌细胞核的变化;透射电镜观察乳腺癌细胞的死亡形式;Western blot检测坏死性凋亡蛋白RIP1表达的变化. 结果 8μmol/L为5-FU的适宜浓度,该浓度下MDA-MB-231细胞在24 h,48 h,72 h的存活率分别为(68.94 ±1.17)％,(48.76±1.47)％和(44.15±2.41)％.MTT、PI、DAPI实验结果表明与对照组和5-FU组相比,5-FU+ z-VAD-fmk组细胞存活率明显降低(P＜0.05),细胞核浓染加深,核固缩现象显著.电镜结果显示5-FU组细胞发生凋亡,5-FU+ z-VAD-fmk组细胞发生坏死性凋亡.Western blot结果表明:z-VAD-fmk联用时5-FU明显上调RIP1蛋白的表达. 结论 5-FU可以诱导MDA-MB-231细胞发生凋亡;caspases抑制条件下5-FU通过激活RIP1诱导MDA-MB-231细胞发生坏死性凋亡.
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Livin Caspase-9与胃癌关系的研究进展
胃癌的发生、发展是一个多因素、多基因相互作用的复杂过程,如RAS基因家族、MYC基因家族、ERBB基因家族、p53、RB等[1,2].Livin是IAPs(inhibitors of apoptosis proteins)蛋白家族的新成员[3],能够与Caspases蛋白结合,抑制其介导的细胞凋亡.
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胃肠安对人胃癌MGC-803细胞裸鼠皮下移植瘤生长及细胞凋亡的作用
目的:观察胃肠安对人胃癌MGC-803细胞裸鼠皮下移植瘤生长、凋亡及相关蛋白表达的影响.方法:建立BALB/c裸鼠皮下移植瘤模型,根据瘤体体积大小随机分为对照组、5-氟尿嘧啶(5-fluorouracil,5-Fu)组及胃肠安组3组,每组10只.对照组予无菌水0.3 ml灌胃,1次/d;胃肠安组予胃肠安煎剂0.75 mg/d灌胃,5-Fu组予5-Fu 1 mg腹腔注射,1次/周.干预8周后观察各组移植瘤瘤体生长情况;TUNEL法检测肿瘤细胞凋亡;免疫组化法检测移植瘤细胞凋亡相关蛋白Caspase-3、8、9及多聚ADP核糖聚合酶(poly ADP-ribose polymerase,PARP)表达.结果:经过治疗,胃肠安组MGC-803胃癌移植瘤体积显著缩小、质量减轻,与对照组比较差异有统计学意义(P＜0.05).TUNEL及免疫组化法检测结果显示胃肠安组可以促移植瘤细胞凋亡(P＜0.01),上调Caspase-3、8和9蛋白表达(P＜0.05,P＜0.01),并可促进PARP蛋白剪辑,与对照组比较差异均有统计学意义(P＜0.05),与5-Fu组比较差异无统计学意义(P＞0.05).结论:胃肠安具有抑制MGC-803移植瘤生长的作用,可能是通过上调Caspase-3、8、9的表达及促进PARP剪辑,进而促进MGC-803胃癌细胞发生凋亡而起作用.
