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积雪草甙和苦参碱对皮肤瘢痕成纤维细胞生长及胶原合成影响的研究
目的探讨积雪草甙、苦参碱对皮肤瘢痕成纤维细胞生长及胶原合成的影响,并对两者的抗瘢痕作用强度进行比较.方法体外培养瘢痕疙瘩成纤维细胞,分别加入不同浓度的积雪草甙、苦参碱,通过倒置显微镜观察细胞形态、MTT法测定细胞活力、流式细胞仪检测细胞周期改变、氯胺T法测定羟脯氨酸含量、乳酸脱氢酶检测细胞毒作用,分别观测两种中药对瘢痕成纤维细胞生长及胶原合成的影响.结果与空白对照组相比,实验组中积雪草甙为0.5g/L、苦参碱为1.00g/L后成纤维细胞数量均明显减少;羟脯氨酸含量降低(P＜0.05);细胞处于G2-M期比例增加(P＜0.05);当积雪草甙浓度低于5g/L时乳酸脱氢酶含量在正常范围内.结论在一定浓度下,积雪草甙和苦参碱均能抑制皮肤瘢痕成纤维细胞生长及胶原合成,积雪草甙的抗瘢痕作用强于苦参碱.
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积雪草甙对酪氨酸酶活性的抑制作用及对Cloudman S91黑素瘤细胞黑素合成的影响
目的探讨积雪草甙外用脱色素的作用机制.方法体外观察积雪草甙对蘑菇酪氨酸酶活性的作用并进行酶促反应动力学分析.进一步以系列浓度的积雪草甙作用于体外培养的Cloudman S91黑素瘤细胞,测定细胞酪氨酸酶活性、黑素含量和细胞增殖率.结果积雪草甙能剂量依赖性抑制蘑菇酪氨酸酶活性,酶促动力学分析提示积雪草甙为蘑菇酪氨酸酶混合型抑制剂.进一步研究发现,积雪草甙能抑制体外培养的Cloudman S91黑素瘤细胞酪氨酸酶活性和黑素合成,但对细胞增殖无明显影响.与氢醌相比,积雪草甙抑制酪氨酸酶活性低于相同浓度的氢醌.结论积雪草甙可直接作用于黑素细胞,抑制黑素合成,是一种无细胞毒性的皮肤脱色剂.
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芙原治疗烧伤后增生瘢痕200例报告
芙原是从我国传统中草药积雪草中提取的积雪总甙,动物实验已证实积雪草甙具有参与组织修复,增强网状内皮系统功能,激活上皮细胞,抑制成纤维母细胞增殖作用,能明显影响成纤维细胞的超微结构,抑制胶原蛋白的合成,促进瘢痕成纤维细胞凋亡,可防治瘢痕增生 [1].近两年经应用海南普利制药有限公司生产的芙原片和芙原霜治疗烧伤后增生瘢痕 200例,取得了明显疗效.现报道如下.
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鲜地龙外敷抑制瘢痕形成的实验研究
1 实验材料 动物:日本大耳白兔24只,4月龄,雌雄各半,体重2.0～2.5kg左右,由佳木斯大学实验动物中心提供.药品:积雪草甙霜软膏由上海现代制药股份有限公司生产,批号061004.鲜地龙原液制备:取鲜地龙,吐泥,洗净泥沙,匀浆致细胞破碎(显微镜下判断),放置24小时,离心,取上清液即为鲜地龙原液.
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积雪草甙对乳腺癌MCF-7细胞凋亡及VEGF、bFGF蛋白表达水平的影响
目的:探讨积雪草甙对乳腺癌MCF-7细胞凋亡及VEGF、bFGF蛋白表达水平的影响.方法:选取人乳腺癌细胞MCF-7细胞系进行体外培养后,根据是否进行积雪草甙干预而分为两组,应用积雪草苷进行干预后,HE染色后用光学显微镜法观察细胞形态学变化,干预后的24h、48h以及72h时,应用TUNEL技术对对细胞凋亡情况进行检测,同时应用免疫荧光法检测血管内皮生长因子(VEGF)和碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)的表达.结果:①与对照组相比较,积雪草甙干预的乳腺癌MCF-7细胞出现空泡、胞质外溢以及胞核皱缩等细胞凋亡现象,大量癌MCF-7细胞发生破碎死亡;②TUNEL技术法检测结果证实积雪草甙能够提高人乳腺癌MCF-7细胞凋亡率,与对照组比较差异具有统计学意义(P＜0.05),且呈时间依赖性;③积雪草甙干预的MCF-7细胞VEGF阳性表达和bFGF阳性表达显著低于对照组,差异具有统计学意义(P＜0.05),积雪草甙的抑制作用且呈时间依赖性.结论:积雪草甙不仅能够促进乳腺癌MCF-7细胞凋亡,而且能够降低VEGF和bFGF表达.
关键词： 积雪草甙 乳腺癌 MCF-7 血管内皮细胞生长因子 碱性成纤维细胞生长因子 -
RE-HPLC测定积雪草中积雪草甙、羟基积雪草甙的含量
目的:测定不同产地的中药积雪草甙和羟基积雪草甙的含量.方法:采有RE-HPLC法进行测定.结果:不同产地的积雪草中积雪草甙和羟基积雪草甙的含量有很大差异.结论:方法简便,准确灵敏.
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积雪草甙对瘢痕成纤维细胞增殖与磷酸化Smad2和Smad7表达的影响
目的研究积雪草甙对瘢痕成纤维细胞增殖与磷酸化Smad2和Smad7的影响.方法用组织块法培养人瘢痕成纤维细胞,采用流式细胞术、免疫细胞化学检测其在正常状况和应用积雪草甙后细胞周期的改变与磷酸化Smad2和Smad7的改变.结果积雪草甙可抑制瘢痕的成纤维细胞从S期进入M期,减少成纤维细胞中磷酸化Smad2的含量,增加细胞中Smad7的含量.结论积雪草甙抑制瘢痕的作用可通过Smad通路.
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积雪草甙对实验大鼠乳腺增生的防治
目的:研究积雪草甙对实验大鼠乳腺增生症的预防和治疗作用.方法:应用苯甲酸雌二醇、黄体酮制备大鼠乳腺增生症模型.在制备模型同时或之后,灌服积雪草甙.于给予受试药后第32天测量左右两个乳房直径、高度和乳头直径;放射免疫法测定血清雌二醇(E2)和孕酮(P)浓度;镜下观察乳腺增生的病理改变,计算乳腺增生率和增生程度.结果:积雪草甙能显著降低实验性大鼠乳腺增生症的发生率,抑制乳腺增生程度,调节血清E2和P浓度,改善E2/P比值.结论:积雪草甙能降低乳腺增生程度,减少乳腺增生症的发生率,有望成为预防和治疗乳腺增生症的候选药物.
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积雪草甙对系统性硬皮病成纤维细胞增殖、胶原蛋白合成及分泌TGF-β1的影响
目的 观察积雪草甙对系统性硬皮病(SSc)患者皮肤成纤维细胞增殖、胶原蛋白合成及分泌转化生长因子p1 (TGF-β1)的影响.方法 原代培养SSc患者皮肤成纤维细胞,使用不同浓度的积雪草甙作用48h;MTT法、羟脯氨酸法及ELISA法测定积雪草甙对成纤维细胞增殖、胶原蛋白合成及分泌TGF-β1的影响.结果 与空白对照组相比,积雪草甙组能抑制成纤维细胞增殖,减少成纤维细胞胶原蛋白合成及TGF-β1的分泌,其作用具有浓度依赖性(P＜0.05).结论 积雪草甙治疗SSc的机理与其抑制成纤维细胞增殖、胶原蛋白合成及TGF β1的分泌有关.
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积雪草甙抗肿瘤作用的初步实验研究
积雪草是伞形科植物积雪草(Centella asiatica Urban.)的全草,积雪草早记载在<神农本草经>中,列为中品,被认为是一种具有治疗各种热症、痈疽、瘰疬等功效的药物.积雪草甙(Asiaticoside)是从积雪草中提取的一种白色针状结晶[1].有文献报道积雪草有抗癌作用[2].为了探讨积雪草的抗癌作用,我们观察了积雪草甙对体外培养的L929细胞和CNE细胞增殖的影响,以及对移植S180细胞增殖和荷S180小鼠生存时间的影响.
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积雪草甙对成纤维细胞DNA合成与胶原蛋白合成的影响
采用放射性同位素标记法研究积雪草甙对体外培养的小鼠成纤维细胞DNA合成和胶原蛋白合成的影响.结果表明,积雪草甙在一定剂量范围内能促进小鼠成纤维细胞DNA合成和胶原蛋白合成,并呈剂量依赖关系.
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积雪草甙乳膏治疗激光术后面部皮损51例报告
2002年3月至2003年11月,我们采用积雪草甙乳膏治疗激光术后面部皮损患者51例,疗效较好.现报告如下.临床资料:本文102例患者,随机分为两组各51例.治疗组男24例,女27例;年龄18～50(32.0±11.5)岁;病程(5.3±2.5)年.行激光治疗原因为色素痣20例,寻常疣18例,扁平疣4例,睑黄疣3例,汗管瘤2例,老年斑4例.对照组51例,其临床资料与治疗组具有可比性.
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积雪草甙诱导肿瘤细胞凋亡及增强长春新碱的抗肿瘤作用
背景与目的 :中药积雪草的三萜类成分积雪草甙 (asiaticoside, ATS)具有促进胶原蛋白合成作用,对创伤愈合有较好的疗效.近年有文献报道积雪草甙有一定的抗肿瘤活性.本文研究积雪草甙诱导肿瘤细胞凋亡及其与长春新碱( vincristine, VCR)的协同作用.方法:采用 MTT法检测积雪草甙单用或合用 VCR对 KB、 KBv200、 MCF-7和 MCF-7/ADM细胞的增殖抑制作用,流式细胞术分析 KB细胞周期和凋亡率的变化,琼脂糖凝胶电泳、荧光显微镜和 Western blot方法观察 KB细胞凋亡和细胞周期相关性质改变.结果:积雪草甙对 KB、 KBv200、 MCF-7和 MCF-7/ADM细胞的 IC50分别为( 1.11± 0.13)、( 1.82± 0.08)、( 1.58± 0.15) mg/ml和( 3.25± 0.46) mg/ml,且 KBv200和 MCF-7/ADM细胞对积雪草甙表现出与相应的亲本细胞相近的药物敏感性.经积雪草甙处理后的 KB细胞表现出凋亡细胞特征性的改变.积雪草甙与 VCR合用对多种肿瘤细胞均有显著协同作用,合并用药组 KB细胞凋亡率、 Bcl-2蛋白磷酸化水平明显高于单用组,且仅有合用组检测到活化后的 caspase-3蛋白.积雪草甙与 VCR合用组 KB细胞阻滞于 S-G2/M期的比率和 Cyclin B1蛋白的表达水平高于单用组, P34cdc2蛋白表达略有降低.结论:积雪草甙可诱导肿瘤细胞凋亡并与长春新碱显示协同作用,有可能作为生化调节剂应用于肿瘤化疗.
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积雪草甙治疗小儿增生性瘢痕的疗效观察
[目的]研究积雪草甙治疗小儿增生性瘢痕的临床疗效.[方法]42例小儿增生性瘢痕患者口服积雪草甙片剂3.6 mg/kg/d,分3次服,同时外用霜剂,每天3次;对照组仅使用皮炎平软膏.观察各组病人的症状和体征变化,并观察其它的毒性及副作用.[结果]治疗组42例患者中,显效46例(54.5%),有效28例(33.3%),无效10(12.2%).而对照组患者中显效7例(15.2%),有效12例(26.1%),无效27例(58.7%).两组比较统计学处理有明显差异.两组副作用发生率均比较低,未发现明显毒性与副作用.[结论]积雪草甙有较好的治疗瘢痕增生的作用,是比较有效、安全、易为患者接受的药物.
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积雪草甙治疗增生性瘢痕的临床疗效观察
目的 研究积雪草甙治疗增生性瘢痕的临床疗效.方法 68例增生性瘢痕患者口服积雪草甙片剂3.6mg/(kg·d),分3次服,同时外用霜剂,每天3次.观察病人的症状和体征变化,给以定量评分以评估其疗效,并观察其毒性及副作用.结果 68例患者中,显效18例(占26.5%),有效45例(占66.2%),无效5例(占7.3%).副作用发生率比较低,未发现明显毒性反应.结论 积雪草甙对瘢痕增生一定的治疗的作用,是有效、安全、易为患者接受的药物.
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三种中药有效成分对瘢痕成纤维细胞生长影响研究
目的 探讨积雪草甙、苦参碱、川芎嗪等中药有效成分对皮肤瘢痕成纤维细胞生长的影响.方法 体外培养瘢痕疙瘩成纤维细胞,分别加入不同浓度的积雪草甙、苦参碱、川芎嗪,通过倒置显微镜观察、MTT法测定细胞活力、乳酸脱氢酶检测等方法分别观测三种中药有效成分对瘢痕成纤维细胞生长的影响.结果 与空白对照组相比,实验组中加入积雪草甙0.5mg/ml、苦参碱1.0mg/ml、川芎嗪1.0mg/ml后成纤维细胞数量均明显减少;OD值降低(P＜0.05);当积雪草甙浓度高于5mg/ml时乳酸脱氢酶含量超出正常范围.结论 有效浓度下,三种中药有效成分均能抑制皮肤瘢痕成纤维细胞生长,其作用强度积雪草甙＞苦参碱＞川芎嗪.
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积雪草甙对大鼠乳房假体包膜形成影响的实验研究
目的研究积雪草甙对乳房假体包膜形成的影响.方法SD雌性大鼠40只,随机分为实验组和对照组,每组20只.于每只大鼠两侧肩胛区皮下各植入1个等大硅胶片,实验组按照24 mg·kg-1·d-1予积雪草甙溶液灌胃,对照组予同等剂量生理盐水.于术后第7、14、28、56、84天分别处死两组大鼠各4只,连同埋植材料完整取出包膜组织,标本制成石蜡切片行组织学检查,然后同时采用图像分析软件对包膜组织厚度进行测量.结果自术后28 d开始两组之间包膜厚度出现明显差异,术后56 d,实验组包膜增厚随时间变化不明显,而对照组仍有明显变化.术后84 d实验组包膜厚度为(194.33±23.27)μm,显著低于对照组(306.08±31.31)μm(P＜0.05).组织学观察提示实验组包膜内成纤维细胞密度较对照组低.结论积雪草甙能显著抑制假体周围的纤维化,降低包膜的增厚.
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积雪草甙对增生性瘢痕成纤维细胞增殖与Smad7蛋白的影响
目的研究积雪草甙对增生性瘢痕成纤维细胞增殖及对Smad7蛋白的影响.方法用组织块法培养人瘢痕成纤维细胞.应用流式细胞术、免疫细胞化学、RT-PCR及Western blot技术结合光密度扫描分析,观察积雪草甙对增生性瘢痕成纤维细胞细胞周期、凋亡和Smad7在细胞中的定位及其mRNA和蛋白含量的改变.结果积雪草甙可抑制瘢痕的成纤维细胞从S期进入M期,增加瘢痕成纤维细胞中Smad7 mRNA和蛋白的含量.结论积雪草甙抑制瘢痕的作用可能部分通过增加抑制性Smad7蛋白.
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积雪草甙防治PCI术后再狭窄的实验研究
目的探讨积雪草甙防治经皮冠状动脉介入治疗(PCI)术后再狭窄的可行性.方法以球囊剥脱家兔髂动脉内膜后,用积雪草甙治疗4周,于造模及治疗4周后分别采血检测内皮素(ET)、一氧化氮(NO)、C反应蛋白(CRP),并光镜下观察髂动脉的形态学改变.结果家兔髂动脉球囊剥脱后ET、CRP升高,NO下降,与空白对照组相比有显著性差异(P均＜0.001);光镜下见模型组血管内皮脱落,内弹力膜断裂,中膜部分断裂,外膜尚完整.积雪草甙治疗后,ET、CRP下降,NO升高,与病理对照组相比有显著性意义(P＜0.05),并呈量-效关系;光镜下见内皮细胞覆盖,内膜基本修复,且高剂量组修复优于低剂量组.而病理对照组内皮细胞大部分脱落,内弹力膜断裂,部分伤及中膜,间质细胞大量增生.结论积雪草甙有促进内皮细胞生长、内膜修复的作用,初步提示其具有治疗PCI术后再狭窄的作用.
