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壳聚糖乙酰化甲壳素材料与许旺细胞的体外相容性
背景:天然甲壳素溶解性差,不易加工处理.传统工艺制备的甲壳素存在较多致炎性杂质蛋白.目的:观察由高纯度壳聚糖乙酰化制备的甲壳素材料与许旺细胞的体外生物相容性.设计、时间及地点:对比观察实验,于2006-0912007-10在南通大学医学院组织学与胚胎学教研室及江苏省神经再生重点实验室完成.材料:新生一两天的SPF级SD大鼠坐骨神经和臂从神经用于培养许旺细胞,自制壳聚糖膜,脱乙酰度为92.5%.方法:将脱乙酰度92.5%的壳聚糖膜浸入5%的醋酐甲醇溶液中进行乙酰化反应后制备甲壳素膜.体外接种许旺细胞分别至壳聚糖膜和甲壳素膜上.主要观察指标:共培养6 d后通过抗S-100蛋白免疫细胞化学的方法鉴定,并进行光镜、扫描电镜观察细胞形态.CCK-8试剂检测在壳聚糖膜浸出液、甲壳素膜浸出液、L-15培养基、有机锡浸出液中生长2,4,6 d许旺细胞的细胞活力.结果:抗S-100蛋白免疫细胞化学的鉴定结果提示这类细胞为许旺细胞:光镜、扫描电镜观察均发现细胞能够在壳聚糖膜和甲壳素膜表面正常生长,细胞贴附牢固,外形饱满,大多数细胞晕长梭形,边缘清晰,细胞增殖情况良好.细胞活力检测的结果显示壳聚糖膜浸出液和甲壳素膜浸出液中生长的许旺细胞与L-15培养基中生长的细胞相比,细胞活力无明显差异(P＞0.05).有机锡浸出液中生长的许旺细胞活力均低于其他浸出液,差异有显著性意义(P＜0.05).结论:壳聚糖乙酰化制备的甲壳素材料与许旺细胞体外生物相容性良好.
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甲壳素及其衍生物抑制瘢痕形成：研究与进展
背景：甲壳素及其衍生物抑制瘢痕形成方面的作用及机制成为近年来研究的热点。
目的：综述就近年来甲壳素及其衍生物抑制瘢痕形成的研究进展。
方法：应用计算机检索中国知网、万方数据库、维普数据库及PubMed数据库，检索有关甲壳素抑制瘢痕治疗进展的文献，检索中文关键词为“甲壳素，衍生物，瘢痕形成”，英文关键词为“Chitin； Derivatives； Scar Formation”。
结果与结论：甲壳素及其衍生物能直接或通过改变如生化因子、干扰素、肿瘤坏死因子、白细胞介素等各种因子，抑制瘢痕中成纤维细胞的增殖、分化及分泌功能；能改变伤口及瘢痕中免疫细胞的作用；能减少胶原形成，促进胶原降解；促进伤口肉芽血液循环的建立，减轻组织缺氧；促进表皮细胞和内皮细胞的生长，加速伤口愈合；抑制创面细菌繁殖，减轻感染，加速愈合。 -
壳聚糖作为药物载体及基因载体的临床应用前景
甲壳素是存在于自然界中惟一能被生物降解的阳离子高分子材料,近年研究表明,它在调节机体免疫功能,降低血脂、血糖、血压,保护胃肠道等方面发挥着巨大的作用.壳聚糖是甲壳素的N-脱乙酰基衍生物,具有组织相容性好、生物学活性多样、可生物降解、无毒性、易于吸收等特点.壳聚糖作为药物载体能提高药物吸收,稳定药物成分,增加药物靶向性,增强药物缓释;它作为基因载体对DNA有一定的保护,能提高基因的表达时间.在药物载体、基因载体等研究领域壳聚糖将具有广泛的应用前景.
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烧伤创面外用生物敷料的研究现状
目的:介绍近年来烧伤创面外用生物敷料的新进展.资料来源:应用计算机检索中国期刊全文数据库2004-01/2007-03与生物敷料相关的文章,限定文章语种为中文,检索词:"生物敷料、烧伤创面敷料";同时检索PUBMED 2004-01/2007-03与烧伤创面外用生物敷料相关文献,检索词:"biomaterial,burn wound dressing",限定语言种类为"English".资料选择:对资料进行初审,并查看每篇文献后的引文.纳入标准:文章所述内容应与烧伤创面外用生物、合成敷料的研究相关,以近2年发表在较权威杂志者优先.排除标准:重复研究或Meta分析类文章.资料提炼:共收集到188篇相关文献,排除132篇内容陈旧或重复的文献,56篇符合纳入标准.有52篇检索到全文,选用其中的30篇作为本文参考文献,10篇涉及胶原敷料在烧伤创面中的应用;12篇涉及甲壳素及其衍生物在烧伤创面中的应用;8篇涉及羊膜等在烧伤创面中的应用.资料综合:通过对大量烧伤患者创面治疗的对照研究结果证明,目前胶原敷料、甲壳素、羊膜等生物敷料疗效确切,具有临床使用价值和指导意义.但以上材料都有其缺点,胶原生物敷料稳定性较差和吸收渗液能力不强,其耐用性、生物相容性及制备的高成本限制了应用;羊膜质脆,用在关节区域创面易碎裂,不耐压,创面渗出多时易溶失.结论:生物敷料的发展非常迅速.但是,目前没有一种敷料能够达到理想敷料的要求.复合敷料由多层组成,每层具有不同的特点,也许是解决办法之一.
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载细胞甲壳素曲率混合膜修复角膜上皮损伤
背景：研究发现甲壳素是一种比较好的生物材料，但关于甲壳素载角膜上皮细胞混合膜修复兔角膜上皮损伤的研究不多。目的：观察载角膜上皮细胞甲壳素曲率混合膜对兔角膜上皮损伤的修复作用。方法：取18只新西兰大白兔，建立左眼角膜上皮损伤模型，随机分2组，实验组于角膜上皮损伤处植入载角膜上皮细胞甲壳素曲率混合膜，对照组植入甲壳素曲率混合膜。植入后1，3，7 d，观察角膜上皮损伤面积、眼角膜病理组织学及超微结构。结果与结论：①角膜上皮损伤面积：实验组植入后1，3 d的角膜损伤面积明显小于对照组(P<0.05)，两组植入后7 d 的角膜损伤均全完愈合；②眼角膜病理组织学观察结果：植入后7 d，实验组角膜上皮层和基质层连接紧密，有6层左右上皮细胞层，修复完整，结构整齐，外层平整光滑；对照组角膜上皮层也和基质层连接紧密，有6层左右上皮细胞层，修复完整，但上皮层层次紊乱，外层表面不平整；③眼角膜超微结构：植入后7 d，实验组角膜上皮细胞细胞为六边形，排列较紧密，细胞表面平整；对照组角膜上皮细胞也为六边形，表面不平整，细胞之间有间隙；④结果表明：载角膜上皮细胞甲壳素曲率混合膜可促进大白兔角膜上皮损伤的修复。
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D-氨基葡萄糖寡聚糖对雏鸡生产性能和主要细菌病防治的研究
目的: 使用甲壳素、N-6生命素、氨基葡萄糖盐酸盐防治鸡大肠埃希菌病和沙门菌病.方法:用上述3种产品作为饲料调节剂对雏鸡进行增重试验和抗细菌感染试验. 结果:与对照组相比,N-6生命素有促进鸡只生长的作用,同时,上述3种产品能有效地预防和治疗由大肠埃希菌和沙门菌引起的混合感染.结论:N-6 生命素防治大肠埃希菌病和沙门菌病效果好,氨基葡萄糖盐酸盐次之.
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壳聚糖及其衍生物抗菌作用的研究进展
壳聚糖作为一种天然无毒,生物相容性好,可降解,可再生而且来源非常丰富的资源,已经日益引起人们重视,并已成功应用于医药等多个领域.壳聚糖及衍生物作为天然高分子絮凝剂,其杀菌作用已被认识和研究.壳聚糖不仅具有天然抗菌性能,而且抗菌谱广.本文对壳聚糖的抑菌原理、抑菌作用的特点及其衍生物研究应用的新进展与发展前景作了综述.
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甲壳素和壳聚糖的医药应用及开发近况
概述了甲壳素制备工艺的进展.介绍了甲壳素和壳聚糖的生物特性和医疗应用开发近况.
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甲壳素及壳聚糖的提取
此次研究采用分步浸酸浸碱法制备甲壳素和壳聚糖.具体的操作方法为:①取市售小龙虾虾壳,将其粉碎研磨后加酸浸泡2小时脱去钙质、水洗至中性,然后加碱煮沸1小时脱去蛋白、水洗至中性,之后加酸浸泡1小时、水洗至中性,后加碱煮沸30分钟、水洗至中性.按照上述步骤反复操作2次并将粉末过滤、水洗至中性,后将粉末干燥即得甲壳素.②将甲壳素溶于浓度为50％的NaOH溶液中、煮沸2小时,然后把所得沉淀物水洗至中性,之后把沉淀物加入浓度为40％的NaOH溶液中、煮沸1小时.按照上述步骤反复操作3次并将所得沉淀物置于60℃的环境中减压干燥,再用乙醇洗涤2次,后将沉淀物干燥即得壳聚糖.在上述过程中,采用L9( 33)正交实验对壳聚糖的制备条件进行考察.壳聚糖的佳制备条件:50ml浓度为10％的HC1和浓度为10％的NaOH.在上述两种制备条件下,壳聚糖的产收率可达20％.
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水溶性壳聚糖衍生物的制备
本实验取市售虾蟹壳,将其粉碎研磨后反复加酸、碱处理即得甲壳素.将甲壳素溶于5倍体积浓度为50％的NaOH溶液申煮1h.然后用水洗沉淀物至中性后再将其置于浓度为50％的NaOH溶液中煮1h.如此反复操作3次后,将所得沉淀物置于60℃的减压环境中进行干燥,之后再用乙醇漂洗沉淀物2次,后干燥沉淀物即得壳聚糖.取壳聚糖并用异丙醇将其溶胀,然后在碱性条件下继续溶胀壳聚糖3小时,之后向溶胀后的壳聚耱中缓慢滴加三氯乙酸和异丙醇混合溶液,后抽滤、干燥沉淀物即得黄色的羧甲基壳聚耱.本次实验制得的羧甲基壳聚糖,其水溶性和溶解性均优于壳聚糖.
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羧甲基壳聚糖病毒灭活/去除工艺验证
目的 对羧甲基壳聚糖病毒灭活/去除工艺进行验证.方法 模拟生产条件,选择猪细小病毒(porcine parvo-virus,PPV)、伪狂犬病病毒(pseudo rabies virus,PRV)、鸭肝炎病毒Ⅰ型(duck hepatitis virus-Ⅰ,DHV-Ⅰ)、牛滤过性腹泻病毒(bovine viral diarrhea virus,BVDV)作为指示病毒,采用高温碱化和醇洗灭活/去除病毒,Karber法计算病毒滴度,荧光PCR检测病毒灭活/去除效果.结果 3批甲壳素经碱化反应处理,PRV、PPV、BVDV、DHV-Ⅰ的平均灭活对数值分别为≥6.736、≥6.597、≥6.138和≥5.806 logTCID50/0.1 ml;3批羧甲基壳聚糖经醇洗处理,PRV、PPV、BVDV 、DHV-Ⅰ的平均灭活对数值分别为≥6.763、≥6.569、≥6.167和≥5.587 logTCID50/0.1 ml.碱化反应与醇洗处理前感染PRV、PPV、BVDV、DHV-Ⅰ样品荧光PCR检测平均Ct值分别为23.465、23.387,24.873、24.706,26.887、25.376,27.386、24.629,处理后样品的荧光PCR检测平均Ct值均＞40.结论 羧甲基壳聚糖经高温碱化和醇洗反应处理均能有效灭活病毒,保证了产品的安全性.
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悄然兴起的甲壳素热
友人李厂长本来身强体壮,精力充沛,可由于应酬较多,吃出了高血压、高血脂、血液黏稠等症,身体变得有点臃肿虚弱,上楼梯有时候气喘吁吁.他自我感觉不太好,吃了不少降血压、降血脂的药,可也只不过是维持,无明显效果.无奈之下,年龄也大了,只好退居幕后,把企业交给了年轻人.这时,有朋友介绍他吃甲壳素.他有点惘然,"甲壳素",顾名思义,是不是动物的壳、用来补钙的?朋友笑了,告诉他:甲壳素对降低血压、降低血脂有益,你用用试试.李厂长将信将疑,不过还是坚持服了一个多月.没想到,还真有效果,自我感觉身上有劲,上楼也不喘了.自此,他逢人就说这玩意真好,建议我写一写.
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海螵蛸止血作用的现代研究进展
海螵蛸中含有的甲壳素以及壳聚糖已被证实具有止血作用,钙元素与凝血作用相关.他们可以通过激活凝血因子、活化血小板、促进血小板的聚集等方面发挥止血功效.近年来研究发现甲壳素和壳聚糖还具有促进组织修复的作用.对近年来海螵蛸中各类成分止血的作用机制研究的文献进行查阅、分析和综述,为海螵蛸的新型止血制剂的设计提供科学参考,从而扩大海螵蛸的使用范围.
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甲壳素/海藻酸钠-纳米羟基磷灰石多孔复合支架材料的实验研究
目的:制备性能优良的复合支架一直是骨组织工程学研究的重点和难点.比较分析甲壳素对复合支架材料的孔隙率、含水量、降解率及生物力学特性的影响.方法:将甲壳素溶液与海藻酸钠溶液充分混合,然后将一定质量的羟基磷灰石加入混合液.根据甲壳素溶液在混合液中的质量分数不同分为两组:scal(0％chitin)、sca2(50％chitin).扫描电镜下观察材料的表面结构以及检测材料的孔径.测量并计算出复合支架材料的孔隙率、降解率、含水量以及生物力学性能.结果:两组支架材料均表现为多孔隙结构,平均孔径大小分别为:121.2± 12.6μm、213.3± 27.3 μm.孔隙率分别为:(90.53± 1.62)％、(87.73± 1.22)％,统计学分析显示,两组材料孔隙率的差异比较有统计学意义(P＜0.05).两组支架材料第6周的降解率分别:(59.12±1.93)％、(22.91±0.953)％,统计学分析显示,两组材料降解率的差异比较有统计学意义(P＜0.05).两组含水量分别为:(95.52±1.17)％、(90.42±0.85)％,统计学分析显示,两组材料含水量的差异比较有统计学意义(P＜0.05).第二组生物力学特性显著提高.结论:从本实验的实验数据可以看出,甲壳素可以增大材料的孔径,提高材料的降解稳定性,提高材料的生物力学强度.因此,甲壳素在骨组织工程领域具有重要的研究价值,同时为今后的进一步实验提供一定的实验依据.
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DL-PLA/CHI复合膜的防硬膜外粘连实验研究
目的比较消旋聚乳酸/甲壳素(DL-PLA/CHI)膜，消旋聚乳酸(DL-PLA)膜，几丁糖膜和聚四氟乙烯(ePTFE)膜防止硬膜外瘢痕粘连效果。方法将75只新西兰白兔随机分为5组，施以全椎板切除术，分别予以放置消旋聚乳酸/甲壳素(DL-PLA/CHI)膜，消旋聚乳酸(DL-PLA)膜，几丁糖膜和聚四氟乙烯(ePTFE)膜防粘连处理，对照组不作特殊处理，通过大体观察、光镜观察瘢痕生长及硬膜外粘连情况。结果DL-PLA组，DL-PLA/CHI组及ePTFE组硬膜外均光滑、无增厚，几丁糖组出现个别硬膜外腔隙纤维组织增生粘连。而空白对照组硬膜外纤维组织增生或粘连明显，硬膜外腔隙基本消失。几丁糖膜崩解吸收快，DL-PLA/CHI膜较DL-PLA膜的崩解速度有所加快，但是机体的炎性反应明显减轻。瘢痕粘连形成的半定量评分结果经秩和检验，各实验组与对照组差异有非常显著性意义，而实验组之间无显著差异。结论DL-PLA/CHI薄膜具有可靠的物理屏障作用，防止硬膜外瘢痕粘连效果良好。
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羟基磷灰石/β-磷酸三钙/甲壳素复合多孔支架材料的制备及生物相容性研究
目的 探讨羟基磷灰石/β-磷酸三钙/甲壳素(HAP/β-TCP/CS)多孔支架的制备及其与人体骨髓间质干细胞(MSCs)的生物相容性.方法 以羟基磷灰石粉体为基体,采用有机泡沫浸渍-发泡复合成型工艺制备出羟基磷灰石/β-磷酸三钙多孔支架,再将该多孔支架与甲壳素复合得到有机-无机复合支架,然后通过体外培养实验评价该复合支架的干细胞相容性.结果 复合甲壳素可以显著提高HAP/β-TCP支架的抗压强度,并且该支架具有三维连通网状结构,细胞在支架上粘附,生长良好.结论 该复合多孔支架具有良好的干细胞亲和性和生物相容性.
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药用天然高分子材料海藻酸、壳聚糖研究进展及在耳鼻喉科的应用
海藻酸和甲壳素、壳聚糖是可降解、生物相容性良好的天然高分子材料,广泛应用于药剂学中的控释给药领域.它们在耳鼻喉科学中也有应用价值,如组织工程、经鼻黏膜靶向给药等.本文对这两种材料在药剂学和耳鼻喉科的应用进展进行综述,并展望它们在耳鼻喉科临床的应用前景.
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甲壳素、壳聚糖在骨修复方面的研究进展
甲壳素(chitin)是由虾、蟹、昆虫的外壳及菌类、藻类的细胞壁中提炼出来的一种天然的、带正电荷的生物多糖高聚物,又称甲壳质、壳质、几丁质.壳聚糖(chitosan)是由甲壳素经浓碱处理后脱去乙酰基的产物,又称脱乙酰甲壳质、可溶性甲壳质甲壳胺.
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甲壳化学的研究进展与应用概况
本文对甲壳素化学的基本框架以及3种关键物质--甲壳素、壳聚糖和寡聚糖的研究与应用进展作一综述.主要内容包括甲壳素的来源及提取、甲壳素脱乙酰化制备壳聚糖、通过壳聚糖降解和改性两种途径制备水溶性壳聚糖以及壳寡糖在医药、食品、化妆品和农业领域的应用.
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甲壳素脱乙酰酶作用机理及基因表达的研究进展
综述了甲壳素脱乙酰酶(CDA)催化甲壳素脱乙酰基的多点进攻作用机理、酶法制备壳聚糖的特性以及克隆表达CDA基因的研究进展.
