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棘阿米巴的分型及鉴定研究进展
棘阿米巴角膜炎是一种严重威胁视力的感染性眼病，近年发现已报道的病例数逐年增加。棘阿米巴角膜炎的预后除与早期诊断、治疗及宿主免疫反应有关外，还与感染虫株的不同有关。在临床与研究工作中，已经可以准确鉴定棘阿米巴属，但在属以下水平鉴定棘阿米巴则较困难。本文就棘阿米巴在属以下水平的分型及各型虫株致病性与药物敏感性的关系作一综述。
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棘阿米巴角膜炎致病虫株的超微结构观察
目的 探讨氯己定(洗必泰)对棘阿米巴角膜炎患者角膜内分离培养虫株的作用,为临床治疗棘阿米巴角膜炎提供实验室依据.方法 实验研究.利用扫描电镜观察分离培养虫株的形态特征以及0.02%氯己定作用后的结构变化;利用透射电镜观察角膜病变组织内棘阿米巴的超微结构特征.结果 体外培养的棘阿米巴滋养体大小约15～45μm呈圆形、椭圆形、不规则形状,虫体体表粗糙,有棘状胞质突起,以二分裂方式繁殖.包囊大小约10～25 μm,球形,表面见皱襞、壁孔及圆形孔盖.棘阿米巴自壁孔处逸出转变成滋养体,脱囊后遗留空囊.经0.02%氯己定作用24 h后的滋养体和包囊结构被破坏,虫体崩解成残膜碎片或凝块、颗粒状.经过抗棘阿米巴治疗后的角膜病变组织内未见滋养体,仅见包囊.包囊内外壁结构基本保留,但细胞质蛋白凝固,哑细胞结构退变缺失,包囊处于变性失活状态.结论 0.02%氯己定在体外可杀灭棘阿米巴滋养体和包囊,在组织内可杀灭棘阿米巴滋养体,致包囊变性失活.变性失活的棘阿米巴包囊仍可较长时间存留在角膜组织中,并可引发免疫病理性炎性反应,临床治疗中应引起注意.
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阿米巴角膜炎刮片细胞学特征
目的 探讨刮片细胞学检查诊断阿米巴角膜炎病原体形态特征.方法 实验研究.收集1991年5月至2007年12月期间,首都医科大学附属北京同仁医院、北京市眼科研究所眼微生物室诊断为阿米巴角膜炎的病例159例,对其实验室检查与临床资料进行分析.采用姬姆萨染色法和湿片检查法,对角膜刮片细胞进行观察并照相记录.结果 159例阿米巴角膜炎通过姬姆萨染色刮片细胞学检出阿米巴病原131例(82.4%),阿米巴培养阳性110例(69.2%).刮片细胞学检出率明显高于培养检出率.刮片细胞学检查可观察到典型的滋养体、包囊、包囊前期、空包囊等病原形态,对临床诊断有重要意义.刮片中水肿溶解的角膜上皮细胞、渗出细胞、丝状真菌的关节孢子或厚膜孢子、空泡、脂滴及药物结晶等需要与病原体相鉴别.通过湿片法主要观察滋养体的运动状态.结论 应用刮片细胞学检查法诊断阿米巴性角膜炎,观察到滋养体、包囊、包囊前期及空包囊典型特征对阿米巴性角膜炎有重要病原学诊断价值.
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活体共聚焦显微镜在感染性角膜炎诊治中的应用
感染性角膜炎是一种严重的致盲性眼病,早期病原学诊断直接影响着患者的治疗效果.如何快速、准确地鉴别致病病原体目前还是一个挑战.活体共聚焦显微镜检查(IVCM)作为一种非侵入性图像诊断技术,可在细胞水平提供高分辨率图像以显示眼表组织的结构特征.IVCM对感染性角膜炎中棘阿米巴性角膜炎及丝状真菌性角膜炎的诊断具有重要应用价值,已在临床开始推广使用,逐渐成为感染角膜炎随诊的客观依据.本文对近年来IVCM在感染性角膜炎诊治中的应用及进展进行综述.
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166例化脓性角膜溃疡病病原体分析
目的:分析引起化脓性角膜溃疡的病原体类型,为临床诊断、治疗提供更有效依据.方法:对2002-2007年于我院眼科住院诊断明确的166例化脓性角膜溃疡病例,同时进行角膜细菌培养、刮片检查.结果:经细菌培养,阳性92例,占55.45%.刮片查到真菌者32例,占19.3%.查到棘阿米巴7例,占4%.结论:化脓性角膜溃疡是目前严重影响视功能的疾病之一,危害极大,早期诊断,明确病原学检查,合理使用抗生素,可有效恢复患者的视功能.
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自由生活阿米巴胞内寄生菌研究进展
自由生活阿米巴主要包括棘阿米巴属、耐格里属、哈氏变形虫属和瓦氏变形虫等,以细菌和其它微生物为食,被微生物界称为"特洛伊木马"[1],是许多细菌的环境贮存宿主和传播媒介.自1980年首次发现嗜肺军团菌能在自由生活阿米巴中繁殖生存[2]以后,近20年来,通过分子生物学手段,用阿米巴培养方法,一些曾经未能识别且难以培养的革兰阴性菌,如军团菌样的阿米巴致病菌、副衣原体胞内菌,立克次体相关菌、鸟分支杆菌、李斯特单细胞菌[3,4]等被发现,它们对人类的致病性渐受人们的重视.胞内菌的研究已成为国际微生物学科的一个新领域,国内尚处于空白.目前已发现并研究较多的胞内菌主要有军团菌样的阿米巴致病菌(Legionella-like amoebal pathogens,LLAPs)[5,6]和副衣原体胞内菌(Chlamydia-like endosymbionts)[2].本文从阿米巴胞内寄生菌的寄生性、致病性的分子生物学机制和流行情况等介绍国外研究新的进展.
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卡那霉素在体外对A.healyi的杀伤作用
[目的]观察卡那霉素在体外对棘阿米巴A.healyi的杀伤作用.[方法]用1.0,10.0,100.0g/L卡那霉素和0.2,2.0g/L甲硝唑在体外培养棘阿米巴3,8,24,48h,观察用药前及不同培养时间的生长情况.[结果]1.0g/L卡那霉素对棘阿米巴无抑制作用,10.0g/L卡那霉素在培养48h时及100.0g/L卡那霉素培养24h时抑制棘阿米巴生长,100.0g/L卡那霉素在培养48h时杀伤棘阿米巴.2.0g/L甲硝唑作用48h时仍无明显的杀伤作用.[结论]在体外卡那霉素质量浓度为10.0g/L时对棘阿米巴有抑制作用,100.0g/L时具有杀伤作用.
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饮用水对角膜接触镜保存盒棘阿米巴污染的影响
[目的]观察饮用水的棘阿米巴污染情况,研究其与角膜接触镜保存盒棘阿米巴污染的关系[方法]对延吉市居民饮用水棘阿米巴污染情况及大学生角膜接触镜保存盒和保存液的棘阿米巴污染情况进行调查.将103份饮用水和93份角膜接触镜保存液及保存盒擦拭液接种于有灭活大肠杆菌的无营养琼脂培养基中在28℃条件下培养1周,观察棘阿米巴生长情况.[结果]93份角膜接触镜保存盒擦拭液及保存液中有1份(1%)检出棘阿米巴污染,103份饮用水中有41份(40%)检出棘阿米巴污染[结论]角膜接触镜保存液和保存盒棘阿米巴污染可能与不正确地使用饮用水清洗和保存角膜接触镜有关.
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卡泊芬净在体外对棘阿米巴生长的抑制作用
[目的]观察卡泊芬净在体外对棘阿米巴的抑制作用.[方法]用生理盐水作为空白对照,甲硝唑2.0 g/L作为阳性对照,观察50,100,500 mg/L质量浓度卡泊芬净在体外作用4,8,24,48,72 h时观察棘阿米巴生长情况.[结果]与对照组比较,卡泊芬净质量浓度为50,100 mg/L时棘阿米巴的生长差异不明显,质量浓度500 mg/L、抑制时间4h开始棘阿米巴的生长明显得到抑制.[结论]卡泊芬净质量浓度为500 mg/L时在体外对棘阿米巴的生长有抑制和杀伤作用,且效果优于甲硝唑.
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广东地区土壤中分离的棘阿米巴CG/S 1株的18 S rDNA基因分析
[目的]从广东地区土壤中分离棘阿米巴CG/S 1株,测定其18 S rDNA基因序列. [方法]从土壤中分离棘阿米巴CG/S 1株,提取基因组18 S rDNA,应用棘阿米巴属特异性引物进行PCR扩增,测定序列,用分子生物学软件Clustal X进行序列分析,并与其他棘阿米巴分离株进行比较分析. [结果]棘阿米巴CG/S 1的18 S rDNA全基因序列为2 292 bp,基因型为T 5型;CG/S 1与A.lenticulata 7327株的序列差异率为0.61%,与CB/S 1株的序列差异率为0.74%. [结论]广东地区土壤中分离的棘阿米巴Acanthamoeba sp. CG/S 1为A. lenticulata株.
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棘阿米巴引起的肉芽肿性阿米巴脑炎研究进展
致病性自由生活阿米巴棘阿米巴(Acanthamoeba sp.)广泛存在于土壤、空气、淡水、污水、海水、灰尘、腐败物及人畜粪便等自然环境中,一些虫种可引起人体肉芽肿性阿米巴性脑炎(granulomatous amoebic encephalitis,GAE)及棘阿米巴性角膜炎(acanthamoeba keratitis,AK),还可引起肺部及皮肤病变[1].有关棘阿米巴的研究报道多见于AK的致病机制、诊断及治疗等方面[2-6],而GAE的研究报道则少见.GAE是一种致病性棘阿米巴侵人中枢神经系统引起慢性或亚急性脑炎的疾病,早期诊断困难,预后较差,常发生在慢性消耗性疾病、使用免疫抑制剂或AIDS等基础上.至今报道的GAE大部分发生在何杰金氏病、系统性红斑狼疮、糖尿病、6-磷酸葡萄糖脱氢酶缺乏症、酒精中毒、肝脏疾病、脑梗塞、肾移植及艾滋病的基础上[7],但即使没有这些基础疾病的健康人也可能感染发病[8-10].
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致病性自由生活阿米巴的培养
致病性自由生活阿米巴病原体的分离培养,对疾病诊断和病原体研究都具有重要意义.本文综述该病原体国内外报道的分离培养方法 ,主要包括样品处理、培养条件、虫株传代、虫株致病性检测和虫株保存方法 .
关键词： 致病性自由生活阿米巴 耐格里属 棘阿米巴属 狒狒巴拉姆希阿米巴 培养 -
嗜肺军团菌感染多噬棘阿米巴及其增殖的实验观察
目的初步建立国内嗜肺军团菌感染原生动物自由生活阿米巴的实验感染模型.方法将多噬棘阿米巴和嗜肺军团菌进行实验室共同培养,于8 h、24 h、48 h、72 h后将预置盖玻片上生长的虫体Giemsa染色后作油镜观察,各阶段的培养物作透射电镜观察,研究嗜肺军团菌感染多噬棘阿米巴后形态学的变化.结果共同培养24 h后Giemsa染色显示阿米巴内出现明显的细菌菌体,后期菌体布满整个胞浆;透射电镜下阿米巴滋养体和囊胞中都充满健康完整的军团菌菌体,并观察到不同阶段的二分裂现象.结论嗜肺军团菌能在自由生活阿米巴内生长并增殖,初步证实了阿米巴可能是军团菌在自然界的贮存宿主.
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大连地区棘阿米巴角膜炎2例及流行病学分析
棘阿米巴角膜炎(Acanthamoeba keratitis,Ak)是由棘阿米巴属原虫感染引起的人体角膜炎症、溃疡,甚至导致失明的一种严重眼部疾患.1974年Nagingtong等[1]第一次报道了人类感染本虫的病例报告,以后有关本病感染人数在世界各国逐渐增多.目前,全球已证实的病例数超过1350例,我国陆续有30余例人体感染的病例报告[2-5],2001年9月和2002年7月我室收诊了2例角膜炎患者,经病原学检查,确诊为棘阿米巴感染,现将2例感染的临床资料及其流行病学分析报告如下.
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甲硝唑滴眼液与角膜接触镜多功能护理液体外对棘阿米巴原虫的杀伤效果
目的 了解6种角膜接触镜多功能护理液和加入甲硝唑滴眼液的护理液对自生生活性棘阿米巴原虫的杀伤效果.方法 将6种多功能护理液分别加入96孔培养板中,每种护理液占用48孔,其中24孔滴入棘阿米巴悬液,另外24孔先滴入甲硝唑滴眼液后再滴入棘阿米巴悬液,室温静置8 h后在倒置显微镜下观察棘阿米巴的形态变化和数量.将残存的棘阿米巴原虫分别在PYG培养液中培养5 d,观察其形态、活性与增殖能力的变化.结果 单纯护理液组1～6号棘阿米巴原虫检出率分别为0、8.3%、29.1%、41.7%、62.5%、79.2%,加入甲硝唑滴眼液后护理液1～6号棘阿米巴原虫检出率分别为0、0、4.2%、8.3%、16.7%、16.7%,3～6号护理液加与不加甲硝唑滴眼液杀伤棘阿米巴原虫的效果差异有统计学意义(X2=3.75～18.78,P＜0.05).残存的棘阿米巴原虫经培养后活力与增殖力减弱.结论 部分多功能护理液对棘阿米巴原虫的杀伤效果不佳,添加甲硝唑滴眼液后杀伤效果明显提高.
关键词： 棘阿米巴属 角膜接触镜多功能护理液 甲硝唑
