首页 > 文献资料
-
内蒙古林区人埃立克体感染的血清流行病学调查
人埃立克体病是新发现的由蜱传播的一类自然疫源性疾病,其病原体是革兰阴性严格的细胞内寄生菌,属立克次体科(Rickettsiaceae)埃里希体族(Ehrlichiae).
-
肺结核患者T细胞亚群测定分析
结核分枝杆菌引起的结核病是一种严重危害人类健康的慢性传染病,在历史上曾经夺去数以万计的生命.现在全球每年约有800万新感染病例,每年死亡人数将超过400万[1].我国结核病流行情况十分严峻,据文献资料全国结核杆菌感染人数超过4亿,活动性肺结核患者超过600万,在全球22个结核病高流行国家中居第二位,仅次于印度[2].结核分枝杆菌是一种细胞内寄生菌,引起的免疫反应主要是细胞免疫,本研究用流式细胞技术检测分析了2011年4~9月我院42例结核患者CD3、CD4和CD8的表达,来了解细胞免疫功能在结核病人中的变化,探讨免疫功能在结核病人中所发挥的作用.现将结果报道如下.
-
结核杆菌染色法的改良
结核分枝杆菌是一种能在单核巨噬细胞内生长繁殖的细胞内寄生菌[1].近年来,由于结核杆菌多重耐药菌株的出现及HIV感染的流行,结核病的发病率和死亡率均呈上升趋势.使得各国的医学工作者不得不再次重视这一严重威胁人类健康的疾病.WHO于1993年宣布全球结核病紧急状态,呼吁采取全球性紧急措施,控制结核病的发生.其中,提高结核病患者结核杆菌的阳性检出率便变得尤为重要.然而对结核病做出快速准确的诊断一直是临床工作中的难点.
-
立克次体病的生态学变化
立克次体是一类天然寄生在一些吸血节肢动物体内,并通过节肢动物叮咬传播给人或动物的专性细胞内寄生菌.立克次体与吸血节肢动物的相互关系是几千年生物进化高度适应的结果,正是由于这种相互关系造成了立克次体生态学的离散、立克次体基因的高度保守及立克次体病的自然疫源性特征.一般来说在自然界中野生动物、节肢动物与立克次体三者维持着相对稳定的生态循环,这种相对稳定的生态循环决定了立克次体病疫源地的相对稳定性,一旦这种相对稳定的生态循环遭到破坏,就有可能造成立克次体病的发生和流行,20世纪40年代鼠型斑疹伤寒、70年代落矶山斑点热和90年代埃立克体病在美国的急剧上升及流行性斑疹伤寒在布隆迪难民营的暴发,无一不证明这些疾病与生态学的改变有着强烈的关联.近年来,随着资源的开发利用、旅游业的发展及人们生产、生活等实践活动的扩大,不仅导致了在过去20年来已经控制的已知病原体的重新出现,而且导致了一些新的疫源地、新的病原体的出现及某些立克次体在自然界循环中发生变化.本文就近年来立克次体病的生态学变化进行总结和回顾:
-
新型双启动子表达质粒pCMVnir的构建及其促进基因免疫效果的研究
目的构建一种新型双启动子表达载体pCMVnir,研究其与胞内寄生菌联合应用促进基因免疫效果的作用. 方法细菌硝酸盐还原酶基因B启动子nirB为厌氧诱导启动子,根据nirB启动子的结构,设计合成改良的nirB,置换三启动子载体pTriEx-4中的T7Lac和P10启动子,而保留其CMVie启动子,获得携带CMVie和nirB双种启动子的新型载体pCMVnir,或称为pCN.构建pCN-EGFP和pCN-DsRed两种报告质粒,分别转化S. SL3261、E.coli DH5α和CHO等细胞,检测报告基因的表达情况以确定两种启动子的活性.pCN-EGFP转化S. SL3261,接种BALB/c小鼠,定期解剖小鼠收集黏膜相关淋巴组织,观察重组细菌和载体DNA在细胞中的定植及稳定性.免疫接种小鼠,并定期收集小鼠血清和阴道分泌物,以重组rEGFP为抗原,用ELISA方法研究其增强免疫应答的能力.并构建人乳头瘤病毒L1E7双启动子pCN-16L1E7及对照单启动子载体pCMV-16L1E7和pNir-16L1E7,对比三者诱导黏膜免疫的差别. 结果双启动子表达载体pCMVnir可在细菌和真核细胞中有效表达报告基因,在细菌中可形成肉眼可见的荧光菌落和沉淀,转染CHO等真核细胞能够表达荧光蛋白,表明pCMVnir载体的两种启动子都有活性,其中nirB活性是受兼性厌氧调控的.pCMVnir与细菌有较好的相容性,重组细菌可在动物体内有限复制和定植达6周,质粒可在细菌中稳定存在.以rEGFP为抗原检测发现pCN-EGFP诱导的免疫反应高于常用的单启动子载体pCMV-EGFP.人乳头瘤病毒双启动子载体pCN-16L1E7诱导的免疫反应也高于其他单启动子载体. 结论双启动子表达载体pCMVnir与减毒胞内寄生菌匹配应用,能够提高抗原表达量及增强基因免疫反应的强度.并可作为一般基因克隆和表达载体,特别是作为原核表达载体,不用添加诱导物,即可获得大量表达.
-
查菲埃立克体表面抗原P120蛋白基因的克隆与表达
查菲埃立克体(Ehrlichia chaffeensis)是人单核细胞埃立克体病(human mononcytic ehrlichiosis, HME)的病原体,已证实我国存在该病原。血清学分析是目前诊断HME及其流行病学调查的主要方法。但由于该病原体为严格胞内寄生菌,难以通过细胞培养制备大量抗原去满足临床HME的血清学诊断和流行病学调查的需要。
-
CD8+T细胞激活和免疫记忆形成的分子调节机制
初始CD8+T细胞( naive CD8+T cell)被激活后将转化为CD8+效应T淋巴细胞( effector CD8+T cell)和CD8+记忆T淋巴细胞( memory CD8+T cell). CD8+效应T淋巴细胞的形成在过去进行了大量研究. 抗原提呈细胞( antigen presenting cell,APC)摄取并处理抗原,通过MHC( major histocompatibili-ty complex)Ⅰ类分子向初始CD8+T细胞进行抗原提呈,随后T细胞与APC相互接触,细胞表面的黏附分子通过配体-受体相互作用,形成以TCR-MHC/Ⅰ-抗原肽为中心、周围分布其他共刺激分子(如CD28-B7等)的免疫突触( immune syn-apse) ,引起T细胞的活化[1]. 免疫突触所包含的生物信号主要经由Ras-MAPK、PLC-γ、PKC以及PI3K等途径使初始T细胞被激活,通过活化转录因子的作用使初始T细胞转化为具有细胞杀伤作用的效应T淋巴细胞,并通过分泌颗粒酶(granzyme)、穿孔素(perforin)或与靶细胞表面的FasL配体结合,发挥细胞毒作用(cytotoxic effect)[2]. 针对外源病原体所形成的免疫记忆在免疫系统再次抵抗病原入侵、维持机体内环境自稳中具有重要作用;其中CD8+记忆T淋巴细胞在抵抗病毒和胞内寄生菌的再次入侵中占有举足轻重的地位.然而,CD8+T淋巴细胞的活化及记忆细胞的形成过程,尤其是这一过程的分子基础还没有完全阐明.
-
布鲁菌通过干扰自噬途径实现免疫逃逸
布鲁菌病是一种人畜共患传染病,其致病菌属于兼性厌氧胞内寄生菌.人类因接触病畜产品而感染.布鲁菌通过黏膜进入机体,并扩散到网状内皮系统及其他组织(肝、脾、淋巴结及骨关节等)长期定居、繁殖、产毒致病.患者表现为波浪热,少数还并发关节和骨的炎症[1].布鲁菌这种长期的“定居”行为,显示其能够突破机体免疫防御系统,具有强大的生存和致病能力.因此,深入探讨布鲁菌逃避免疫系统的识别和清除机制,对于治疗、预防和控制布鲁菌病有一定意义.
-
应用AFLP方法对我国土拉弗菌基因分型的研究
土拉菌病又称"野兔热",是由土拉弗菌经患病野生动物、吸血昆虫或遭受污染的水或食物传播的一种自然疫源性疾病,呈世界性分布.其致病菌是革兰阴性胞内寄生菌,包括4种基因型.由于不同基因型在地理分布、毒性等方面存在较大差异,基因分型研究一直是该领域的研究热点,而近年来随着16S rRNA的序列分析、随机引物扩增多态性(RAPD)、限制性片段长度多态性(RFLP)、扩增片段长度多态性(AFLP)等分子生物学方法在细菌分型中的应用,世界范围内许多地区的土拉弗菌株得到了很好的基因型鉴别,也对一些传统认识提出了新的质疑,如欧亚地区是否也存在致病性较强的A型菌株?事实上在1998年科学家们证实了这一疑问[1].
-
实时荧光定量PCR及其在军团菌检测中的应用
军团菌是一种兼性胞内寄生菌,可入侵人体巨噬细胞,并在其中繁殖,是引起人类军团菌病的重要病原体.目前已确认军团菌有50多个种,70多个血清型,其中如多种与人类疾病相关[1].由于军团菌种类繁多,常规的检测鉴定方法已不能满足需要.
-
布氏杆菌病的骨髓细胞学改变
布氏杆菌病是由布氏杆菌感染引起的,以长期发热、关节疼痛、肝脾肿大和慢性化为特征的传染病.布氏杆菌为细胞内寄生菌,可在单核巨噬细胞内长期生存,造成机体多脏器损伤,导致疾病的慢性化.布氏杆菌的这些特点决定了其临床表现的复杂性,在血液系统方面,除常见症状如肝、脾、淋巴结肿大外,还可有白细胞减少、贫血和血小板减少等表现.2005年以来,我们接触到一些在血液科初诊的患者,其中有12例进行了骨髓细胞学检查,通过细胞形态学的观察,我们发现该病在骨髓细胞学方面有一些较为特征性的变化,对该病的辅助诊断和血液系统疾病的鉴别诊断均具有一定的应用价值,现总结报告如下.
-
结核分支杆菌抗拒巨噬细胞吞噬及在胞内的生存机制
WHO指出全世界现有结核病人2 000万,每年新发生约900万例,每年死亡300万人,全世界业已受结核分支杆菌感染者达17亿,占世界人口的1/3,结核病在世界很多地区已经失控而威胁人的生命.结核再次成为严重的世界性疾病.由于人口剧增、移民增加、旅游业发展、耐药性的产生、人类免疫缺陷病毒(HIV)感染流行、吸毒、酗酒与贫困等原因,结核病呈日益严重回升趋势.结核分支杆菌(M.tuberculosis)属胞内寄生菌,在感染早期被巨噬细胞吞噬后,可抵抗宿主的杀伤,维持胞内繁殖和扩散,在结核分支杆菌致病性上有重要意义.文中主要从生物学上讨论结核分支杆菌入侵巨噬细胞并在胞内存活繁殖的机制.
-
Mimivirus——一种新的呼吸道病毒
1992年在英格兰北部的Bradford发生了一次社区获得性肺炎的流行,在调查其病原时,从采自冷却水塔的水中发现了一种能够在多食棘阿米巴原虫(Acanthamoebapolyphaga)中存活并繁殖的微牛物,且革兰染色呈阳性的球菌,当时认为可能是一种新的细菌,并按其来源地称为"Bradford球菌".1995年该菌被带到法国马赛一个擅长研究立克次体等胞内寄生菌的实验审做进一步的分子生物学分析,但是进展并不顺利,采用能够用于所有细菌分类的
-
对不明原因发热者要考虑到人粒细胞无形体病的诊断
立克次体病是由各种立克次体感染导致的人兽共患自然疫源性疾病.立克次体是革兰阴性胞内寄生菌,生物学特征介于病毒和细菌之间,在动物宿主包括啮齿动物如鼠类和家畜等贮存宿主体内繁殖,传播途径主要是由节肢动物蜱、螨、蚤、虱等媒介的叮咬或暴露,以及气溶胶方式进行传播.传统的立克次体病包括斑疹伤寒、恙虫病、斑点热、战壕热、Q热,其主要致病机制是病原体侵染血管内皮细胞导致小血管炎和血管周围炎.近年来世界范围内新发立克次体病不断出现,如人粒细胞无形体病及人单核细胞埃立克体病等.
-
自由生活阿米巴胞内寄生菌研究进展
自由生活阿米巴主要包括棘阿米巴属、耐格里属、哈氏变形虫属和瓦氏变形虫等,以细菌和其它微生物为食,被微生物界称为"特洛伊木马"[1],是许多细菌的环境贮存宿主和传播媒介.自1980年首次发现嗜肺军团菌能在自由生活阿米巴中繁殖生存[2]以后,近20年来,通过分子生物学手段,用阿米巴培养方法,一些曾经未能识别且难以培养的革兰阴性菌,如军团菌样的阿米巴致病菌、副衣原体胞内菌,立克次体相关菌、鸟分支杆菌、李斯特单细胞菌[3,4]等被发现,它们对人类的致病性渐受人们的重视.胞内菌的研究已成为国际微生物学科的一个新领域,国内尚处于空白.目前已发现并研究较多的胞内菌主要有军团菌样的阿米巴致病菌(Legionella-like amoebal pathogens,LLAPs)[5,6]和副衣原体胞内菌(Chlamydia-like endosymbionts)[2].本文从阿米巴胞内寄生菌的寄生性、致病性的分子生物学机制和流行情况等介绍国外研究新的进展.
-
单增李斯特菌作为疫苗载体的研究进展
单核细胞增生李斯特菌 (Listeria monocytohenes)简称单增李斯特菌(LM),是一种革兰氏阳性兼性厌氧、胞内寄生菌,对环境耐受性强,可在较高的盐浓度(可高达40%NaCl)以及宽泛的pH(pH3~12)和温度范围(0~45℃)内生长,并可形成夹膜,因而LM广泛存在于自然界的不同环境中(土壤、水源、植物及动物体内等),易污染各种食品(肉、奶、海产品及蔬菜等),属条件致病性人畜共患病原菌[1].
-
小鼠BPI N端功能片段(muBPI_(25)蛋白)体外杀菌和中和内毒素作用研究
目的:建立胞内杀菌和体外中和内毒素实验模型,检测muBPI_(25)目的蛋白对胞内寄生菌的抑杀作用和对内毒素的中和作用.方法:将pcDNA3.1(+)-muBPI_(36-259)质粒导入RAW264.7细胞,用胞内寄生G~+/G~-菌感染上述细胞建立muBPI25目的蛋白胞内杀菌实验模型;将pSecTag2B-muBPI_(36-259)与双荧光素酶报告基因质粒共转染RAW264.7细胞,建立体外检测muBPI25蛋白中和内毒素实验模型.结果:胞内杀菌实验模型证实muBPI_(25)目的蛋白对G-伤寒杆菌具有抑杀作用;中和内毒素实验模型证实muBPI_(25)目的蛋白对内毒素具有中和作用.结论:首次证实小鼠BPIN端功能片段,即muBPI_(25)目的蛋白对G-菌具有抑杀作用,对其裂解产物内毒索具有中和作用.
关键词: 杀菌/渗透性增强蛋白 RAW264.7细胞 胞内寄生菌 内毒素 -
布鲁氏菌病感染与免疫研究近况(续前)
(上接本刊2003年第2期第94页)3布氏菌在单核细胞内生存、繁殖和感染的可能因素我们知道,布氏菌是胞内寄生菌,主要寄生于机体的单核细胞(包括巨噬细胞)内,在胞内生存、繁殖后才能发挥其在体内的致病作用.因此,将布氏菌能在胞内寄生能力视为其致病基础.
-
IL-10介导单核细胞增多李斯特菌感染的性别易感性
性别是严重影响疾病结构的危险因素,对于不同的疾病存在着较大差异.动物实验表明,小鼠对细菌和病毒的易感性受性别因素的显著影响,大量的动物实验模型也证实了雌性个体相对雄性个体有更强的抗性.单核细胞增多李斯特菌是革兰染色阳性的胞内寄生菌,在免疫抑制的个体和妊娠妇女中发病.当用李斯特菌感染BALB/C小鼠时发现,雌性个体明显对李斯特菌易感,有更高的致死率,而且绝大多数雌性个体在感染4天内就全部死亡.
-
奇特的单增李斯特菌
单增李斯特菌(L.monocytogenes LM)是一种人畜共患的食源性致病菌.本文通过认识单增李斯特菌流行现状、生物学特性、致病性和机体对其抗感染免疫的特殊性,来增强人们对单增李斯特菌的防控意识,制定有效预防措施,以减少单增李斯特菌对人类健康的危害.