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曲尼斯特滴眼液在兔眼小梁切除术后应用的免疫组化研究
目的 通过单克隆抗增殖细胞核抗原抗体(PCNA)和TGF-β1免疫组化的研究,评估曲尼斯特在兔眼实验性小梁切除术后抗纤维化方面的作用.方法 27只兔子(54眼)随机分为对照组、MMC组、曲尼斯特组:双眼均行标准小梁切除术.MMC组术中应用丝裂霉素C(MMC),曲尼斯特组术后应用曲尼斯特滴眼液.术后7天、14天、28天各组处死兔子3只,眼球组织固定,PCNA和TGF-β1免疫组化染色并进行PCNA计数和计算TGF-β1染色平均光密度.结果 术后7天、14天对照组PCNA阳性细胞明显多于MMC组和曲尼斯特组(P<0.05).而曲尼斯特组和MMC组相比差异无统计学意义(P>0.05).曲尼斯特组TGF-β1的平均光密度值明显小于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05),而与MMC组比较差异无统计学意义(P>0.05).结论 曲尼斯特应用于青光眼滤过术后能抑制成纤维细胞增殖,其作用机制可能是通过直接抑制成纤维细胞增殖及减少TGF-β1分泌而间接抑制其增殖.
关键词： 青光眼 滤过手术 曲尼斯特 丝裂霉素c'免疫组化 -
曲尼斯特在兔眼小梁切除术后抗纤维化的实验研究
目的 探讨曲尼斯特在实验性兔眼青光眼滤过术后抑制纤维瘢痕形成的价值.方法 27只兔子(54眼)分为对照组、丝裂霉素C(MMC)组、曲尼斯特组,双眼均行标准小梁切除术.MMC组术中巩膜瓣下应用0.4mg/mlMMC,曲尼斯特组术后应用0.5%曲尼斯特滴眼液滴眼.分别于术后7天、14天、28天每组各处死兔子3只,摘除眼球、组织固定,用H-E、Masson三色染色后进行病理组织学检查.结果 术后7天、14天、21天MMC组及曲尼斯特组眼压低于对照组(P<0.05);而曲尼斯特组和MMC组眼压差异无统计学意义(P>0.05).3组功能性滤过泡生存率差异有统计学意义(P<0.01);而MMC和曲尼斯特组差异无统计学意义(P>0.05).HE染色对照组术后7天成纤维组织在滤过道大量增生.Masson三色法光镜观察,对照组的新生胶原纤维排列有序且致密:而曲尼斯特组和MMC组的新生胶原纤维排列较紊乱,致密度低.结论 曲尼斯特能抑制青光眼滤过术后滤过道纤维组织增殖,有效降低眼内压,维持滤过泡的形态和功能.
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大鼠放射性肺损伤血浆TGF-β1变化研究
目的 观察大鼠放射性肺损伤模型中血浆转化生长因子β1(TGF-β1)的变化以及灯盏细辛和曲尼斯特对其的影响.方法 90只Wistar大鼠随机分为4组,空白组15只、单照组25只、曲尼斯特组25只、灯盏细辛组25只.单照组和两药物组用直线加速器产生的6 MV X射线照射右全胸,单次20 Gy.曲尼斯特组于照射前2周、灯盏细辛组于照射后开始每天灌胃给药,给药剂量曲尼斯特溶液50 mg/kg、灯盏细辛注射液50 mg/kg,持续到照射后2个月.空白组与单照组均灌胃相等体积的生理盐水.照射后每月取大鼠静脉血浆标本行TGF-β1检测,观察其变化情况.结果 单照组血浆TGF-β1含量在照射后1个月开始增加,高峰在照射后第2个月,以后逐渐回落至一高水平.两药物组血浆TGF-β1,含量2个月时明显低于单照组,但停药后仍出现高峰,高峰延至照射后第3个月.两药物组与单照组的TGF-β1含量均高于空白组,与肺损伤的程度一致.结论 灯盏细辛和曲尼斯特能明显降低照射后血浆TGF-β1的含量,延长给药时间是否能增加疗效值得研究.
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依巴斯汀联合曲尼司特治疗慢性荨麻疹疗效观察
目的:观察依巴斯汀联合曲尼司特治疗慢性荨麻疹的疗效.方法:86例患者随机分成两组,治疗组口服依巴斯汀和曲尼司特,对照组口服依巴斯汀,疗程4周,观察疗效,记录不良反应.结果:治疗组和对照组有效率分别为84.8%和70.0%,治疗4周后两组积分比较,治疗组优于对照组,差异有显著性(P<0.001).结论:依巴斯汀联合曲尼斯特治疗慢性荨麻疹疗效好,安全可靠.
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曲尼斯特对人眼Tenon囊成纤维细胞增殖和移行的影响
目的 观察曲尼斯特对人眼Tenon囊成纤维细胞(human tenon fibroblast,HTF)增殖和移行的影响.方法 分别采用MTT法、BrdU掺入法、荧光辅助细胞筛选分析(FACS)及划线法研究0.0、12.5、25.0、50.0和100.0 mg/L的曲尼斯特对体外培养HTF细胞增殖、移行的影响.结果 与对照组(0.0 mg/L组)相比,当曲尼斯特浓度在12.5～100.0mg/L之间变化时,MTT法和BrdU掺入法均显示曲尼斯特能明显抑制HTF细胞的增殖(MTT法:F=22.07、17.88、12.48、34.60,P＜0.01;BrdU掺入法F=234.34、278.39、458.92、554.48,P＜0.01),强度呈剂量依赖性;100.0mg/L的曲尼斯特能够提高HTF细胞G0/G1期比例(从56.7±3.5%升高到62.2±2.8%,P＜0.05)、降低S期比例(从6.63±0.4%降低到3.84±0.3%,P＜0.01);50.0 mg/L和100.0 mg/L的曲尼斯特能够明显抑制HTF细胞的移行.结论 曲尼斯特能够通过减少S期、提高G0/G1期细胞比例来抑制HTF细胞增殖,同时能够抑制细胞迁移.
关键词： 曲尼斯特 人Tenon囊成纤维细胞 细胞增殖 细胞迁移 细胞周期 -
曲尼斯特对人眼Tenon囊成纤维细胞TGF-β1,2 mRNA表达的影响
目的观察曲尼斯特对人眼Tenon囊成纤维细胞(human tenon fibroblast,HTF)TGF-β1、TGF-β2 mRNA表达的影响.方法体外进行HTF细胞原代及传代培养.采用半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR),研究不同浓度和不同作用时间的曲尼斯特对HTF细胞TGF-β1、TGF-β2 mRNA表达的影响.结果曲尼斯特作用24 h后,25.0、50.0、100.0 mg/L浓度曲尼斯特组与对照组相比均能够明显下调HTF细胞TGF-β1(P＜0.05、0.05、0.01)和TGF-β2(P＜0.01、0.05、0.01)mRNA表达.50.0 mg/L曲尼斯特处理12 h、24 h、48 h组相对于相应时间对照组,能够明显下调HTF细胞TGF-β1(P＜0.05、0.01、0.01)和TGF-β1(P＜0.01、0.01、0.01)mRNA表达.结论 曲尼斯特能够下调体外培养HTF细胞TGF-β1、TGF-β2 mRNA的表达,下调效应随药物浓度和作用时间的延长而加强.(中国眼耳鼻喉科杂志,2006,6:81～83)
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曲尼斯特联合地氯雷他定治疗慢性荨麻疹临床疗效观察
我科于2004年1月～2004年10月应用曲尼斯特联合地氯雷他定(商品名:地恒赛,深圳海滨制药厂生产)治疗96例慢性荨麻疹,并对其疗效进行观察,现将结果报告如下.
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曲尼斯特对大鼠放射性肺损伤的干预作用
[目的]观察曲尼斯特(Tranilast)对放射性肺损伤大鼠的转化生长因子β1(TGF-β1)及Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白表达的影响.[方法]65只Wistar大鼠分为3组,曲尼斯特治疗照射组(实验组25只),单纯照射组(单照组25只),以及空白对照组(空白组15只).照射后不同时间分别检测血浆TGF-β1含量,光镜下观察右肺组织形态学变化及免疫组化检测TGF-β1及Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白表达.[结果]实验组较单照组肺泡炎和纤维化出现晚且程度轻;照射后2个月TGF-β1表达比单照组降低(P=0.002);Ⅰ型胶原蛋白(从照射后3个月开始).Ⅲ型胶原蛋白(从照射后2个月开始)在实验组的表达明显低于单照组(P=0.000l).血浆TGF-β1检测显示,实验组的TGF-β1含量高峰延至照射后第3个月.[结论]曲尼斯特通过降低TGF-β1表达有效地减轻了放射性肺损伤;对减少Ⅰ、Ⅲ型胶原沉积有同等的作用,提示其潜在的抗肺纤维化治疗作用.
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免眼实验性小梁切除术后应用曲尼斯特的组织病理学和免疫组化的研究
目的 探讨曲尼斯特在青光眼滤过术后抑制纤维瘢痕形成的价值. 方法 27只兔子分为对照组、MMC组及曲尼斯特组,双眼均行标准小梁切除术.MMC组术中应用丝裂霉素C(MMC),曲尼斯特组术后应用曲尼斯特眼水.术后7d、14d、28d各组分别处死兔子3只,眼球组织固定,用HE、Masson三色染色和PCNA和TGF-β1免疫组化染色. 结果 HE染色,对照组术后7 d滤过道成纤维组织在滤过道大量增生.Masson三色法染色,对照组的新生胶原纤维排列致密.术后7 d、14 d对照组PCNA阳性细胞明显多于MMC组和曲尼斯特组(P<0.05).对照组TGF-β1染色阳性面积和平均光密度值明显大于曲尼斯特组和MMC组,差异均有显著性(P<0.05);曲尼斯特组和MMC组比较差异无显著性(P>0.05). 结论 曲尼斯特能抑制青光眼滤过术后成纤维细胞的增殖,其作用机制可能包括减少TGF-β分泌从而抑制成纤维细胞增值.
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曲尼斯特延缓糖尿病肾病肾间质纤维化的作用及机制
目的：研究曲尼斯特延缓糖尿病肾病肾间质纤维化的作用及机制。方法：建立糖尿病肾病(DKD)大鼠模型：SD大鼠随机分为正常对照组(n=6)、DKD模型组(n=8)、曲尼斯特低剂量(n=8)和高剂量治疗组(n=8)。采用高糖高脂饲料喂养联合低剂量STZ注射构建大鼠DKD模型。成模后，分别予以曲尼斯特200 mg/(kg·d)(曲尼斯特低剂量组)和400 mg/(kg·d)(曲尼斯特高剂量组)分2次灌胃。于第8周末处死大鼠，收集大鼠24 h尿液测24 h尿白蛋白排泄量，收集血测肾功能及血白蛋白；取部分肾组织置于4%中性甲醛溶液中固定，采用免疫组织化学检测肾组织补体C3a受体(C3aR)，E-钙黏附蛋白(epithelial cadherin，E-Cadherin)，α-SMA，纤维连接蛋白(fibronectin，FN)，I型胶原蛋白(collagen I，Col I)，干细胞生长因子(stem cell factor， SCF)和干细胞因子受体(c-kit)的表达以及分布；Western印迹检测肾组织E-cadherin，α-SMA，FN，Col I，SCF和c-kit蛋白的表达；RT-PCR检测肾组织FN，Col I，SCF，c-kit mRNA的表达。结果：曲尼斯特能抑制肥大细胞在DKD大鼠肾组织的浸润；DKD模型组肾小管上皮细胞E-cadherin的表达较正常对照组减少，并可见α-SMA表达，曲尼斯特可一定程度逆转这一过程；与正常对照组比较，DKD模型组肾小管间质区域Col I和FN的表达增加，曲尼斯特能剂量依赖性地抑制Col I和FN的表达；DKD大鼠肾组织SCF，c-kit蛋白及mRNA表达增加；肾组织SCF，c-kit蛋白表达与肥大细胞浸润程度及肾小管间质FN，Col I蛋白的表达呈显著正相关。曲尼斯特能抑制SCF，c-kit mRNA及蛋白的表达(P<0.05)。结论：肥大细胞参与了DKD大鼠肾间质纤维化的发生发展，曲尼斯特可能通过阻断SCF/c-kit信号通路，抑制肥大细胞的募集而逆转DKD大鼠肾小管上皮细胞的EMT，抑制肾间质纤维化。
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醋丙甲泼尼松龙曲尼斯特硅凝胶膜体外释放度试验
目的 提高硅凝胶膜瘢痕贴的临床治疗效果.方法 制备醋丙甲泼尼松龙曲尼斯特硅凝胶膜,按照药典要求进行相关指标检测.结果 建立了高效液相色谱法,药膜体外释放度试验结果符合药典要求.结论 醋丙甲泼尼松龙曲尼斯特硅凝胶膜的理化指标达到药典要求,筛选出了药物佳的组合浓度.
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醋丙甲泼尼松龙曲尼斯特硅凝胶膜对兔增生性瘢痕的疗效
目的:研究醋丙甲泼尼松龙曲尼斯特硅凝胶膜对兔增生性瘢痕的治疗效果.方法:用新西兰大耳白兔24只建立增生性瘢痕模型,均分3组予以不同的处理(空白对照组、硅凝胶膜组、醋丙甲泼尼松龙曲尼斯特硅凝胶膜组),平行观察,作免疫组化检测TGF-β、α-SMA,并作家兔原发性皮肤刺激试验.结果:醋丙甲泼尼松龙曲尼斯特硅凝胶膜组对TGF-β、α-SMA的抑制作用强于空白对照组和硅凝胶膜组(P＜0.05).家兔原发性皮肤刺激试验阴性.结论:醋丙甲泼尼松龙曲尼斯特硅凝胶膜对兔增生性瘢痕的治疗效果优于硅凝胶膜,对兔皮肤无刺激性.
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面部寻常狼疮1例
1病历资料
患者，女，44岁。因左面颊部、唇边红色斑丘疹1周，于2012年4月18日就诊。患者2011年3月发现左面颊部有一红色斑疹，一元硬币大小，数个红色小丘疹呈环状在疹周排列，质稍硬，无破溃，表面无角化、鳞屑，稍有痒感。自述出疹前几日曾在林中采蘑菇。否认外伤史、传染病史、遗传病史。系统检查未见异常。结核菌素实验( PPD)阴性。拟诊“孢子丝菌病”，给予盐酸伊曲康唑胶囊200毫克，1次/d，口服，连用3月后皮疹消失。2月后皮疹复发，红斑疹表面有数个米粒大小的红色结节，玻片压之无果酱色改变，无穿通感。请上级医院会诊，抗核抗体阴性，PPD阴性。病理报告：见鳞状上皮组织，表面角化过度，毛囊角栓，真皮内可见大量淋巴细胞，多核巨细胞。考虑为结节病。给予甲泼尼龙片16mg，1次/d，口服，渐次减量，2月后停用。曲尼斯特胶囊0.1克，3次/d，口服，连用3月，皮疹痊愈。1周前再次出现皮疹。自患病以来无低热，咳嗽，消瘦及乏力，精神及二便正常。
