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红花黄色素抗肿瘤作用的研究进展
红花作为经典的活血化瘀中药,已在临床上应用于心血管疾病.近年来有较多关于其主要成分红花黄色素抗肿瘤药物敏感性及毒性等.本文对红花黄色素的抗肿瘤作用的效用及作用机制进行综述,以期为中药红花用于肿瘤治疗提供新方向.
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以三七益肾颗粒中热敏性成分指示浓缩工艺可靠性的研究
目的:探索以热敏性成分作为指标监控制剂浓缩工艺稳定性的可行性研究.方法:以三七益肾颗粒作为模型药物,选择羟基红花黄色素A和丹酚酸B这2个热敏性成分作为检测指标,系统考察其热稳定性规律,用于浓缩步骤中的工艺参数确定.结果:羟基红花黄色素A和丹酚酸B在温度超过70℃后稳定性明显下降,在浓缩过程中温度须控制在不超过70℃.结论:以羟基红花黄色素A和丹酚酸B为指标对制剂浓缩工艺控制,进而对制剂工艺进行控制,是可行的.
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反相高效液相色谱法测定红花清肝十三味丸中羟基红花黄色素A的含量
目的:建立红花清肝十三味丸中羟基红花黄色素A的含量测定方法.方法:采用反相高效液相色谱法,色谱柱为Agilent Eclipse XDB-C18柱(250 mm×4.6 mm,5 μm),流动相为甲醇-0.18%乙酸溶液(20:80),检测波长为403 nm,流速为1.0 mL·min-1.结果:羟基红花黄色素A在0.168～16.8 μg范围内具有良好的线性关系,r=0.999 9,平均加样回收率为99.76%,RSD为0.6%.结论:本方法快速、准确,重复性好,可用于红花清肝十三味丸中羟基红花黄色素A的含量测定.
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辽源七厘散质量标准研究
目的:建立辽源七厘散的质量标准.方法:建立血竭、冰片、儿茶、骨碎补的薄层色谱鉴别,用HPLC法测定红花中羟基红花黄色素A的含量.结果:在TLC色谱中能检出血竭、冰片、几茶、骨碎补,阴性空白无干扰.HPLC法能准确的测定羟基红花黄色素A的含量,线性范围为0.113 7～1.478 1 μg(r=0.999 9),平均回收率为104%,RSD(n=6)为1.3%.结论:方法操作简单,准确可靠,重现性好,可作为辽源七厘散的质量控制方法.
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HPLC法测定正天丸和正天胶囊中羟基红花黄色素A的含量
目的:建立HPLC法测定正天丸和正天胶囊中羟基红花黄色素A的含量.方法:以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂,以甲醇-乙腈-0.7%磷酸溶液(26∶2∶72)为流动相,检测波长为403 nm.结果:羟基红花黄色素A在6.038 4～150.96 μg·mL-1范围内呈良好的线性关系;平均回收率为100.0%,RSD=0.8%(n=6).结论:本方法准确、快速、重现性好,可用于测定正天丸、正天胶囊中羟基红花黄色素A的含量.
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羟基红花黄色素A促犬胸主动脉内皮细胞增殖及其机制初探
目的研究羟基红花黄色素A(HSYA)对常氧/低氧两种条件下体外培养的犬胸主动脉内皮细胞增殖的影响,且探讨其增殖作用是否与血管内皮生长因子(VEGF)有关.方法采用内膜消化刮取法获取犬胸主动脉内皮细胞;分别在常氧(21%)/低氧(10%)两种条件下,以噻唑蓝(MTT)法观察HSYA对血管内皮细胞(VEC)增殖的影响,VEGF作为阳性对照;并且观察VEGF抗体及其两种酪氨酸受体(Flt-1和KDR)的抗体对HSYA促VEC增殖及分泌VEGF的影响,采用ELISA法检测VEGF水平.结果 HSYA 1×10-3 mol·L-1、 1×10-4 mol·L-1在常氧条件下孵育72 h、 96 h和120 h或在低氧条件下孵育24 h、 48 h、 72 h对VEC都有明显促增殖作用,并具有浓度和时间依赖性,HSYA 1×10-3 mol·L-1与VEGF 2.6×10-7 mol·L-1在同样条件下对VEC的促增殖作用强度相当;10 μg·mL-1的VEGF、Flt-1和KDR的抗体均能明显抑制1×10-3 mol·L-1 HSYA的促VEC增殖作用,尤其10 μg·mL-1的VEGF抗体和Flt-1抗体能明显抑制1×10-3 mol·L-1 HSYA的促VEC分泌VEGF作用.结论在常氧/低氧两种条件下,HSYA均具有明显促VEC增殖作用,尤其在低氧条件下更为明显;而且HSYA的促VEC增殖作用可能与VEGF或VEGF受体有关.
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RP-HPLC同时测定十味活血丸中苦杏仁苷和羟基红花黄色素A的含量
目的 建立同时测定十味活血丸中苦杏仁苷和羟基红花黄色素A含量的RP-HPLC法.方法 以十味活血丸为研究对象,采用Diamonsil C18柱(4.6 mm×200 mm,5μm)色谱柱,流动相为甲醇-0.05%酸(26:74),流速1.0 mL·min-1,检测波长210nm,柱温35℃.结果 苦杏仁苷和羟基红花黄色素A质量浓度分别在2.40～24.0g·L-1(r=0.999 8,n=6),1.76～17.6g·L-(r=0.999 7,n=6)内与峰面积呈良好线性关系;精密度实验RSD分别为1.1%,0.59%;重复性实验RSD分别为0.74%,0.89%;平均加样回收率(n=9)分别为99.9%(RSD=1.2%)和99.1%(RSD=1.5%).结论 本测定方法简便、快捷、准确,为十味活血丸质量评价提供依据.
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红花当归单煎共煎液中有效成分含量的变化
目的 比较红花当归单煎共煎液中有效成分羟基红花黄色素A和阿魏酸含量的变化,初步探索2味中药配伍的变化规律.方法 采用RP-HPLC,色谱柱为Shim-pack VP-ODS C_(18)(4.6 mm×150 mm,5 μm),流动相为甲醇-0.02 mol·L~(-1)磷酸二氢钾缓冲液(磷酸调节pH至3.5),采用梯度洗脱进行分析;检测波长为230 nm,流速为100 mL·min~(-1).结果 羟基红花黄色素A回归方程Y=22 821ρ-4 105.1,r=0.999 9,在2.5～50 mg·L~(-1)内线性相关良好,平均加样回收率为100.1%,RSD为2.2%;阿魏酸回归方程Y=70 219ρ-2 573.9,r=0.999 9,在0.5～10 mg·L~(-1)内线性相关良好,平均加样回收率为101.4%,RSD为3.0%.结论 红花当归共煎液中羟基红花黄色素A和阿魏酸含量比各单煎液中含量高.共煎更有助于有效成分的提取.本方法简便、快速、准确,适用于同时测定羟基红花黄色素A和阿魏酸的含量.
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羟基红花黄色素A保护缺氧缺糖再灌注诱导PC12细胞损伤及对基质金属蛋白酶-9的影响
目的 探讨羟基红花黄色素A对缺氧缺糖再灌注诱导肾上腺嗜铬细胞瘤细胞损伤的保护作用及基质金属蛋白酶-9表达的影响.方法 以肾上腺嗜铬细胞瘤细胞缺氧缺糖再灌注损伤模拟脑缺血再灌注损伤,四甲基偶氮唑蓝法检测肾上腺嗜铬细胞瘤细胞的存活率,乳酸脱氢酶法检测肾上腺嗜铬细胞瘤细胞死亡率,Hoechst33342检测肾上腺嗜铬细胞瘤细胞凋亡；细胞免疫化学法检测肾上腺嗜铬细胞瘤细胞经缺氧缺糖再灌注诱导后基质金属蛋白酶-9表达.结果 缺氧缺糖再灌注可诱导肾上腺嗜铬细胞瘤细胞损伤,与正常对照组相比,缺氧缺糖4h-再灌注2h组细胞存活率为(75.5±3.7)％,明显降低(P＜0.01).四甲基偶氮唑蓝法、乳酸脱氢酶法及Hoechst33342染色结果显示,1 μmol·L-1羟基红花黄色素A预处理能增加缺氧缺糖再灌注诱导后肾上腺嗜铬细胞瘤细胞存活率(90.8±7.6)％,降低细胞乳酸脱氢酶释放率(109.5±7.0)％,同时减少肾上腺嗜铬细胞瘤细胞凋亡率(19.7±7.5)％,与模型组(缺氧缺糖4h再灌注2h)相比,均具有显著性差异(P＜0.01).基质金属蛋白酶-9经缺氧缺糖再灌注处理后能产生诱导表达,而羟基红花黄色素A能抑制其表达.结论 羟基红花黄色素A对缺氧缺糖再灌注诱导的肾上腺嗜铬细胞瘤细胞损伤具有明显保护作用,能减少细胞凋亡,其机制可能与抑制基质金属蛋白酶-9的诱导表达有关.
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芪天滴丸主要活性成分的大孔吸附树脂分离纯化工艺研究
目的 采用大孔吸附树脂法,优化芪天滴丸中赤芍、红花及红景天活性成分的纯化工艺条件.方法 以芍药苷,羟基红花黄色素A(HSYA)及红景天苷为指标,对4种树脂进行了筛选;以芍药苷和HSYA为指标,优化HPD100型大孔树脂富集纯化的工艺条件.结果 HPD100型对芪天滴丸中芍药苷、HSYA及红景天苷具有很好的吸附特性,优化HPD100型大孔树脂富集纯化的工艺条件为:样品溶液含芍药苷2.98 g·L-1,含HSYA 1.44 g·L-1,含红景天苷0.81 g·L-1,吸附时间不低于12 h,吸附速度60 mL·h-1,洗脱速度60 mL·h-1,20%乙醇洗脱200 mL.大孔吸附树脂反复使用7次.结论 HPD100大孔吸附树脂能有效富集纯化赤芍、红花及红景天中的活性成分.
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羟基红花黄色素A、红花提取物及复方脑得生片中羟基红花黄色素A在大鼠体内的排泄比较研究
目的 研究比较大鼠口服羟基红花黄色素A单体、红花提取物及复方脑得生片后羟基红花黄色素A胆汁及尿、粪排泄动力学差异.方法 采用反相高效液相色谱法测定给药后大鼠胆汁及尿、粪中羟基红花黄色素A的含量,分别计算羟基红花黄色素A的累计排泄量及排泄率.结果 灌胃给予羟基红花黄色素A单体、红花提取物和复方脑得生片后24h的胆汁累计排泄率分别为(0.164±0.072)％、(0.125±0.044)％、(0.056±0.016)％；尿中累计排泄率分别为(0.075±0.004)％、(0.156±0.01)％、(0.024±0.002)％；粪中累计排泄率分别为(46.7±20.4)％、(54.5±18.8)％、(26.8±8.61)％,其累计排泄率在各组间均有显著性统计学意义.结论 羟基红花黄色素A单体、红花提取物、复方脑得生片中羟基红花黄色素A在大鼠体内的排泄存在明显差异,显示红花中的其他成分影响了羟基红花黄色素A在体内的吸收与利用,而复方配伍后可增加红花中羟基红花黄色素A在体内的利用程度,减少羟基红花黄色素A以原型排出体外.
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羟基红花黄色素A缓解大鼠心肌线粒体损伤的作用研究
目的 研究红花成分羟基红花黄色素A(HSYA)对大鼠心肌线粒体损伤的作用.方法 采用低温离心法制备大鼠心肌线粒体;比浊法检测线粒体肿胀;荧光偏振法测量线粒体膜流动性;硫代巴比妥酸比色法观察线粒体脂质过氧化水平.结果 HSYA可明显减轻离体大鼠心肌线粒体肿胀(P＜0.05)、缓解线粒体膜流动性的下降(P＜0.001)、抑制羟自由基诱导的线粒体脂质过氧化(P＜0.001).结论 HSYA可减轻大鼠心肌线粒体的损伤.
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羟基红花黄色素A在健康人体内的药动学研究
目的 研究羟基红花黄色素A(hydroxysafflor yellow A,HYSA)在人体内的药动学特征.方法 12名健康受试者随机分为低、中、高3个剂量组,每组4人,分别脉滴注给予注射用红花黄色素(以羟基红花黄色素A的含量为35,70和140mg计算),采用高效液相色谱法测定给药后不同时间点血浆中羟基红花黄色素A的浓度并计算药动学参数.结果 羟基红花黄色素A在体内过程符合二室模型.主要药动学参数如下:ρmax分别为(2.02±0.18),(7.42±0.61),(14.48±4.71)mg·L-1;t1/2β分别为(3.05±0.70),(3.56±0.77),(3.35±0.91)h;AUC0-15分别为(6.79±1.29),(26.75±5.46),(49.81±13.75)mg·h·L-1,AUC0-∞分别为(7.85±1.07),(28.60±5.51),(53.80±14.85)mg·h·L-1.结论 高、中、低3个单剂量组中羟基红花黄色素A在人体内的消除半衰期较快,AUC0-15,AUC0-∞和ρmax均与剂量呈线性关系.
关键词： 羟基红花黄色素A 药动学 高效液相色谱.紫外法 -
羟基红花黄色素A的 Caco-2 细胞摄取转运研究
目的 研究羟基红花黄色素 A (HSYA)的胃肠吸收转运机制.方法 采用 Caco-2 细胞模型考察孵育时间.介质pH,药物浓度及抑制剂(环孢菌素 A 和叠氮钠)对羟基红花黄色素 A 摄取转运的影响,并分析 HSYA 灌胃给药后在大鼠尿及粪中的累积排泄.结果 HSYA 的摄取符合被动扩散过程,pH 7.8 环境下药物的细胞摄取量[(1.05±0.045)mg·g-1]低于 pH5.4[1.24±0.09)mg·g-1](P<0.05),其在 Caco-2 单细胞层的表现透过系数(Papp)为(2.16±1.21)x10-8cm·s-1,加入环孢菌素 A和叠氮钠后其Papp显著提高(P<0.05),分别为(47.92±17.8)x10-8和(12.53±4.55)×10-8cm·s-1.HSYA 大鼠灌胃给药(5.6mg·kg-1)后31 h,其尿和粪中的累积排泄量分别为给药剂量的0.74%和28.57%.结论 HSYA的吸收基本符合被动扩散过程并有P-gp的参与,其黏膜透过性较差,碱性环境相对不利于药物的吸收.HSYA 口服后的胃肠吸收较差,大量的药物被排出体外或在胃肠道内被代谢转化.
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高效液相色谱法测定参麦散结胶囊中羟基红花黄色素A的含量
目的:建立高效液相色谱法测定参麦散结胶囊主药红花中羟基红花黄色素A的含量.方法:色谱柱为ZORBAX SB-C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为甲醇-乙腈-0.7%磷酸溶液(V:V:V=23:2:75),检测波长为403 nm,流速为1.0 ml/min,柱温为35℃.结果:羟基红花黄色素A的质量浓度在24.25~121.25μg/ml范围内具有良好的线性关系(r=0.9995,n=5),平均回收率为97.93%,RSD为1.64%(n=6).结论:本方法简便快速、准确、重复性好,可用于该制剂的质量控制.
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高效液相色谱法测定醋制消肿止痛液中苦参碱、氧化苦参碱、羟基红花黄色素A的含量
目的:建立醋制消肿止痛液中苦参碱、氧化苦参碱、羟基红花黄色素A的含量测定方法.方法:采用高效液相色谱法,色谱柱为Sinochrom ODS-BP色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流速为1.0 ml/min;柱温为30℃.测定苦参碱、氧化苦参碱采用流动相乙腈-0.2％磷酸水(V∶V=92∶8),用三乙胺调pH至6.0,检测波长为220 nm;测定羟基红花黄色素A采用流动相乙腈-0.2％甲酸水(V∶V=15∶85),检测波长为403 nm.结果:苦参碱、氧化苦参碱、羟基红花黄色素A的进样量分别在0.412～1.648、0.448 ～1.792、0.220 ～0.880 μg范围内与峰面积具有良好的线性关系(r分别为0.999 5、0.999 3、0.999 4);苦参碱的平均加样回收率为98.90％,RSD为0.42％;氧化苦参碱的平均加样回收率为99.08％,RSD为0.69％;羟基红花黄色素A的平均加样回收率为99.03％,RSD为0.44％.结论:本方法操作简便、结果准确、重现性良好,可作为该制剂的质量检测标准,并为其开发应用提供了理论基础.
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HPLC法测定乐脉颗粒中羟基红花黄色素A的含量
目的 建立测定乐脉颗粒中羟基红花黄色素A含量的高效液相色谱法.方法 采用迪马Diamonsil C18色谱柱,甲醇-0.1%磷酸(30∶70) 为流动相,流速1.0mL· min-1,检测波长403nm,柱温:35℃. 结果 羟基红花黄色素A在0.0053～0.106mg · mL-1范围内线性关系良好(r =0.9998).乐脉颗粒的平均加样回收率为99.5%,RSD=1.8%(n= 9).结论 该方法简便快速,适用于乐脉颗粒中羟基红花黄色素A的含量测定.
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HPLC法测定古日古木-7中羟基红花黄色素A的含量
目的 测定古日古木-7中羟基红花黄色素A含量.方法 采用HPLC法,以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂,流动相为甲醇-乙腈-0.7％磷酸溶液(26∶2∶72),检测波长为403 nm,流速为1.0 mL·min-1.结果 羟基红花黄色素A进样量在0.0855～1.2825μg范围内具有良好的线性关系(r=0.99998);平均加样回收率为100.4％,RSD=0.7％ (n=6).结论 该方法稳定准确、重复性好,可用于古日古木-7中羟基红花黄色素A的含量测定.
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HPLC法测定加味图喜木勒-3中羟基红花黄色素A的含量测定
建立蒙成药加味图喜木勒-3含量测定方法.采用液相色谱法测定羟基红花黄色素A的含量.羟基红花黄色素A的线性范围为0.1492～5.2220μg,相关系数r=0.9999,平均加样回收率为95.71%,RSD=0.60%,该方法具有简便、快速、准确等特点,可用于本品的质量控制.
关键词： 高效液相色谱法 加味图喜木勒-3味丸 羟基红花黄色素A 含量 -
HPLC法测定蒙成药德吉德朱出尔中羟基红花黄色素A的含量
建立蒙成药德吉德朱出尔含量测定方法.以高效液相色谱法测定羟基红花黄色素A的含量.采用Hypersil C18色谱柱;甲醇-乙腈-0.7%磷酸溶液(25:2:73 )为流动相;检测波长为403nm;流速为1.0mL·min-1.羟基红花黄色素A的线性范围为0.1974～1.645μg, r=0.9999,平均加样回收率为100.18%,RSD=1.3%.该方法具有简便、快速、准确等特点,可用于本品的质量控制.
