镇江茅苍术资源概况

本文通过对镇江茅苍术资源的分布、栽培及开发利用的调查,基本摸清了茅苍术道地产区的资源情况,结合野生蕴藏量大幅下降的实际,提出了在保护野生资源的同时应积极开展野生转家种试验的发展对策,为充分利用道地药材资源提供基础信息.

茅苍术对H9c2心肌细胞氧化损伤的保护作用

目的：茅苍术水煎液和它的含药血清对H9 c2该细胞的保护效果的研究。方法采用双氧水制造 H9 c2大鼠心肌细胞的氧化损伤模型,以Vc为阳性对照,通过对受损心肌细胞形态学观测、SOD活力检测及细胞相对凋亡情况的检测,测定茅苍术水煎液和它的含药血清对H9 c2细胞的保护效果。结果不同浓度的茅苍术水煎液均使细胞生长状态得以改善,外部形态明显好转。高剂量组细胞生长较好,中剂量组次之,低剂量组较差；茅苍术水煎液组LDH释放量和MDA含量明显低于Vc对照组,SOD活力明显高于损伤组；细胞的相对存活率随着茅苍术水提液的浓度升高而明显增大,分别为72．37%、66．19%、55．44%,低剂量组的茅苍术水提液对H2 O2损伤的H9c2心肌细胞的保护作用不明显。结论茅苍术水提液的保护作用机制与增强细胞抗氧化能力、减少自由基和脂质过氧化物导致的细胞膜损伤有关。

150 茅苍术根茎中的酚类和聚乙炔类化合物及其抗炎活性

苍术类药材提取物体外对成骨细胞增殖及酶活性的影响

目的:观察不同产区苍术的不同提取部位体外对成骨细胞增殖及碱性磷酸酶活性的影响.方法:分别以苍术生药量1×10-4,1×10-6 g·mL-12个质量浓度进行新生大鼠成骨细胞、MG-63成骨细胞株增殖和碱性磷酸酶活性测定.结果:茅苍术对大鼠成骨细胞、MG-63成骨细胞株增殖的效果比北苍术好；在挥发油、水煎液、醇提液3个不同提取部位比较中,发现水煎液的效果较好,且道地产区茅苍术的效果佳,对成骨细胞、MG-63细胞株增殖率分别是11.27％,13.57％；大鼠成骨细胞的ALP活性测定,以茅苍术的水煎液和挥发油的碱性磷酸酶活性高,均为5.22 U·L-1.结论:苍术类药材对骨质疏松症的治疗有一定的疗效,且茅山地区产茅苍术水煎液对MG-63细胞株、成骨细胞增殖效果佳.

HPLC测定道地产地和主产地茅苍术中β-桉叶醇及其他成分的含量

目的:通过测定道地产地和主产地茅苍术中有效成分及其他成分的含量,综合评价茅苍术的药材品质.方法:采用HPLC对不同产地的茅苍术中的β-桉叶醇、苍术素、苍术素醇和苍术内酯Ⅱ进行含量测定.结果:不同产地的茅苍术中成分的含量差异显著,各地的茅苍术药材质量存在较大差异.β-桉叶醇和苍术素醇含量高的是湖北英山的野生品;苍术素和苍术内酯Ⅱ含量高的产地是江苏茅山.结论:综合考虑茅苍术中苍术素、β-桉叶醇、苍术素醇和苍术内酯Ⅱ主产地的茅苍术的质量要比道地产地茅苍术的质量优.该结果为茅苍术的产业化发展提供依据.

几个道地产区茅苍术指纹图谱及苍术素含量测定研究

目的:结合茅苍术主要成分苍术素的含量测定与指纹图谱,比较不同产地药材化学成分的差异性,为科学评价不同产地茅苍术药材的质量提供依据.方法:采用HPLC对各产地茅苍术药材进行分析,采用“中药色谱指纹图谱相似度评价系统”软件比较指纹图谱的相似度,并用SPSS 19.0对13批样品进行聚类分析.采用药典方法测定苍术素含量.结果:建立了茅苍术药材指纹图谱检测方法,不同产地茅苍术药材指纹图谱有较大相似性.但苍术素的含量有较大的差异.聚类分析结果表明道地产区与主产区茅苍术药材存在一定差异,但差别不是很大.结论:所建立的HPLC指纹图谱具有良好的精密度、重复性和稳定性,结合苍术素的含量,为茅苍术质量评价的提供依据.

不同光质对茅苍术生长、抗氧化酶活性及挥发油含量的影响

目的:基于茅苍术在林下栽培优于露地栽培,开展不同光照试验,研究不同光质对茅苍术生长发育及挥发油成分含量的影响.方法:分别设置CK(空白组),红光,蓝光,红光-蓝光(9:1)[简称红蓝(9:1)],红蓝(6:1),红蓝(3:1)共6个不同光质组,生长9个月后采样分析.结果:红蓝(9:1)光照条件下茅苍术的生物量(23.18g)及4种挥发油成分(苍术素、苍术酮、苍术醇和β-桉叶醇)总量(3.74％)高;其次是红蓝(6:1)组,生物量18.32g,4种成分总量2.97％.红蓝(9:1)光照条件下净光合速率、蒸腾速率、气孔导度和胞间CO2浓度等光合参数均高于其他处理组,且大部分具有显著性差异.不同光质处理组下超氧化物歧化酶、过氧化物酶、还原型谷胱甘肽、还原型抗坏血酸和过氧化氢酶等抗氧化酶活性均高于空白组,且大部分具有显著性差异;红蓝(9:1)光照下丙二醛含量显著低于空白组.结论:综合各项指标结果发现,红蓝(9:1)光照条件适合茅苍术的生长发育,为茅苍术产量及质量的提升提供新的种植模式.

茅苍术DXS基因的克隆与分析

目的:克隆茅苍术萜类化合物生物合成关键酶1-脱氧木糖-5-磷酸合酶(DXS)基因,并进行序列特征分析和组织特异性表达分析.方法:根据转录组测序所得的DXS基因片段,克隆出全长eDNA序列.运用实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR),以tublin为内参基因,检测DXS基因在不同组织中的表达量.结果:克隆得到的DXS基因全长eDNA序列为2 151 bp,编码716个氨基酸,并在GenBank注册(登录号KY659208).氨基酸序列系统发育分析表明,该序列与甜叶菊等菊科植物DXS基因有较高的同源性.Real-time PCR法检测发现茅苍术DXS在叶片中表达量高,其次为花,而在根茎和根中表达很低.结论:获得了茅苍术DXS基因的全长eDNA序列,对其进行了初步生物信息学分析,揭示了其组织差异性表达特征,为进一步阐述该基因在茅苍术萜类成分生物合成途径中的功能奠定了基础.

苍术的本草考证

对宋、明以来的本草著作和医药学家中流行的"术即白术"的观点提出质疑,论证<神农本草经>的"术"主要是指苍术,其抗衰老用途应当继承发扬,开发出新的产品;道地药材茅苍术对植物分类产生过巨大影响,其优异生物种质已经高度濒危,应当采取有效措施加以保护.

苍术的化学药理研究进展

苍术为菊科植物茅苍术(南苍术)Atractylodes lancea(Thunb)DC、北苍术Atracty1odes chinensis Koidz(又名:山苍术、枪头菜、山刺菜)的干燥根茎.

RP-HPLC测定茅苍术中β-桉叶醇的含量

目的:采用RP-HPLC测定茅苍术中β-桉叶醇的含量,为茅苍术质量标准研究提供依据.方法:采用反相高效液相色谱法,色谱柱为Inertsil ODS-3(4.6 mm×250 mm,5 μm);流动相乙腈-水(68:32);流速1.0 mL·min-1;检测波长200 nm;柱温为25 ℃.结果:测得10批茅苍术药材中β-桉叶醇含量为0.833～4.466 mg·g-1,β-桉叶醇为0.048～1.200 μg,r=0.999 9,平均回收率99.3%,RSD 1.4%(n=9).结论:建立了高效液相色谱法测定茅苍术中β-桉叶醇含量的方法,该方法准确,可靠,可用于茅苍术药材的测定.

土壤中无机元素对茅苍术道地性的影响

目的:了解土壤中无机元素对茅苍术道地性的影响.方法:对不同产地茅苍术根茎及生长地土壤中15种无机元素含量进行测定,所得数据用SPSS10.0软件进行分析比较.结果:发现道地产区茅苍术药材中镍的平均含量高于其他茅苍术的3倍以上,其对钙的吸收有富集作用;相关系数分析表明茅苍术及土壤中无机元素元素的含量不相关.结论:茅苍术主要是通过主动吸收调控药材中无机元素的含量;同时发现茅苍术对铁和铬、铁和汞、汞和铬、砷和铅及钴和锶的吸收积累有很好的协同作用.

茅苍术道地药材的挥发油组成特征分析

目的:在个体和总体两个水平上研究南苍术挥发油成分所蕴涵的多样性和特征,进而揭示茅苍术道地性的化学本质.方法:分单株采集7个居群的47株南苍术根茎,用GC-MS分离鉴定挥发油中的6个主要成分,使用SPSS分析软件进行主成分分析和聚类分析.结果:聚类分析显示茅苍术挥发油主要组分的含量明显不同于非道地南苍术.其他分析表明,与非道地南苍术挥发油相比,茅苍术总挥发油含量显著低(P<0.01),其归一化百分含量大于1%的组分数目显著高(P<0.01),苍术酮加苍术素的含量极其显著高,而茅术醇加β-桉叶醇的含量极其显著低(P<0.001).主成分分析表明苍术酮在体现茅苍术道地性特征时具有非常特殊的作用.结论:茅苍术道地性在挥发油中的表现主要是苍术酮、茅术醇、β-桉叶醇及苍术素呈现出的一种特定配比关系,即(0.70～2.00)∶(0.04～0.35)∶(0.09～0.40)∶1.

茅苍术及其麸炒品对胃溃疡大鼠抗炎作用的比较研究

该实验旨在比较茅苍术生品和麸炒品对实验性胃溃疡大鼠的抗炎作用,初步探讨茅苍术抗胃溃疡的作用机制.采用改良Okabe法即外科手术胃黏膜局部注射乙酸法诱导大鼠胃溃疡模型.大鼠分成10组,即假手术组,模型组,奥美拉唑组,三九胃泰组,茅苍术生品和麸炒品低、中、高剂量组,灌胃给药,每日2次,连续给药10 d,腹主动脉采血,分离血清,分取胃组织溃疡面.采用酶联免疫吸附(ELISA)法检测血清及胃组织中炎症因子白细胞介素6(IL-6)、白细胞介素8(IL-8)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)和前列腺素E2(PGE2)的含量.实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-PCR)法检测胃组织中IL-8和TNF-α mRNA的表达.免疫组织化学法检测胃组织中TNF-α和IL-8的蛋白表达.与假手术组比较,模型组大鼠血清及胃组织中IL-6,IL-8,TNF-α和PGE2的含量明显升高,胃组织中IL-8和TNF-α mRNA的表达和二者的蛋白表达量显著增加,各治疗组均出现不同程度的降低.与茅苍术生品比较,相同剂量的茅苍术麸炒品具有更好的降低血清及胃组织中IL-6,IL-8,TNF-α和PGE2的含量,下调胃组织中IL-8和TNF-α mRNA表达的作用,其中高剂量组及中剂量组均有显著性差异.茅苍术对乙酸致胃溃疡大鼠具有明显的抗炎作用,麸炒后该作用增强;茅苍术抗胃溃疡的作用部分是由于下调IL-6,IL-8,TNF-α和PGE2的含量.

茅苍术中苍术酮、茅术醇、β-桉叶醇和苍术素的同时含量测定及其聚类分析

目的:建立气相色谱法同时测定茅苍术药材中苍术酮、茅术醇β-桉叶醇和苍术素的含量,根据含量水平对茅苍术药材进行聚类分析.方法:HP-1弹性石英毛细管色谱柱(0.25mm×30 m,0.25 μm);氢火焰离子化检测器(FID);载气氮气;起始温度145℃,保持25 min,以10℃·min~(-1)升温至250℃,保持10 min;进样方式为分流进样,分流比为40:1;进样量为2μL;采用SPSS 13.0统计软件进行聚类分析.结果:苍术酮、茅术醇、β-桉叶醇和苍术素进样浓度分别在0.012～2.32(r=0.999 8),0.008～1.68(r=0.999 8),0.008～1.76(r=0. 999 9),0.016～3.20 g·L~(-1)(r=0.999 7)呈良好线性关系;平均回收率(n=3)分别为98.0%～99.0%,97.7%～99.4%,98.4%～99.2%,97.8%～99.7%;所分析的茅苍术药材大致划分为两类.结论:该方法准确、简便,具有良好的重复性和稳定性,可用于茅苍术药材中苍术酮、茅术醇、β-桉叶醇和苍术素含量的同时测定;道地产区茅苍术与其它非道地产区茅苍术4种活性成分含量的差异较大.

苍术不定根诱导培养的研究

苍术源于菊科苍术属植物苍术Atractylodes lancea(Thunb.)DC的根茎,其功效为燥湿健脾、驱风散寒、明目[1].近年来,随着国际市场对苍术的需求量日益增加,茅苍术被掠夺性采挖,加之对茅苍术生态环境的人为破坏,造成茅苍术资源的枯竭,使其濒临灭绝[2].目前利用生物技术进行中药资源繁殖并大规模生产其有效成分已成为一条新的发展途径,但药用植物细胞培养的弊端之一是有效成分的含量不稳定,这主要是由于大多数有效成分均为次生代谢产物,其合成在细胞阶段表现不强造成的,而不定根培养可以解决这一问题[3].

麸炒北苍术挥发油指纹图谱研究

苍术为菊科植物北苍术Atractylodes chimemsis D C.Koidz.或茅苍术A.lancea(Thrnb.)DC的干燥根茎,性温,味辛、苦,归脾、胃、肝经,具有燥湿健脾、祛风散寒之功效,药典收载有生苍术、麸炒苍术2种[1].

人工种植茅苍术佳采收期的初步研究

茅苍术Atractylodes lancea(Thunb.)DC.为药典2005年版收载的苍术原植物之一[1].茅苍术的有效成分主要是挥发油,药效结果表明总挥发油中的β-桉叶醇为健脾的有效成分之一.曾报道[2]以南京茅苍术栽培品挥发油的含量研究茅苍术佳采收期及少生长年限.本研究以总挥发油及β-桉叶醇作为衡量茅苍术质量的指标,对茅苍术不同年限及同一年限不同生长期的样品进行含量测定,为湖北人工种植茅苍术佳采收期的确定提供依据.

1株选择性降解茅苍术挥发油内生真菌的筛选与鉴定

目的:从茅苍术Atractylodes lancea根中分离内生真菌,筛选能选择性降解转化茅苍术挥发油的菌株,实现内生真菌对茅苍术挥发油主要成分的转化作用.方法:利用微生物体外转化方法,通过气相色谱追踪挥发油变化,筛选出能选择性利用挥发油的内生真菌.通过单因素试验研究碳源、转速、装液量、初始pH和植物组织添加对内生真菌降解的影响,并选取对降解影响较大的因素进行正交试验.结果:筛选到的内生真菌ALG-13可以选择性利用挥发油,改变了挥发油主要成分相对百分比.总体表现为苍术酮和苍术素增加,β-桉叶醇和茅术醇含量减少.经过真菌选择性降解后,挥发油组分更加接近道地茅苍术的挥发油组成.ALG-13基于形态特征、ITS序列系统学分析,确定为生赤壳属真菌Bionectria ochroleuca.优降解条件为200 r·min-1,pH4.5,250 mL装液量为50 mL、蔗糖为碳源.结论:内生真菌ALG-13可以选择性降解挥发油,使挥发油组分接近道地药材.

濒危药用植物茅苍术花粉形态、活力测定及贮存研究

目的:研究濒危药用植物茅苍术花粉形态、活力测定及贮存.方法:采用扫描电镜观察茅苍术花粉形态,用液体培养及染色法筛选花粉萌发适培养基及活力测定方法,并检测不同贮存条件下花粉的活力.结果:茅苍术花粉粒呈类球形,具3萌发沟,外壁表面具刺状雕纹；在ME3+16％PEG4000+10％蔗糖液体培养基上花粉萌发率高,达62.1％,而其他3种染色法均不宜用于茅苍术花粉活力的检测；低温可明显延长茅苍术花粉的贮存时间,在-80℃低温下可贮存60d.结论:液体培养法适于茅苍术花粉粒活力的测定,花粉萌发率与贮存温度及时间密切相关,本研究为茅苍术人工辅助授粉及野生抚育研究提供了科学的依据.