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RP-HPLC法测定心宁片中丹参素和原儿茶醛的含量
目的 建立同时测定心宁片中丹参素和原儿茶醛含量的方法.方法 采用高效液相色谱法,色谱柱为LinkSil ODS C18;柱温:35℃；流动相:甲醇-1％冰醋酸溶液(8∶92)；流速:1.0 mL· min-1；检测波长:280 nm.结果 丹参素在23.4～187.2 mg·L-1(r=0.999 8)、原儿茶醛在1.92～38.40 mg· L1(r=0.999 9)浓度范围内线性关系均良好；平均回收率分别为100.29％和98.96％.结论 该方法简单、准确、快速,可用于心宁片中丹参素和原儿茶醛的质量控制.
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HPLC测定心宁片中丹参素的含量
目的:改进心宁片中丹参素的含量测定方法.方法:以50%甲醇为提取溶剂,超声处理30 min,采用甲醇-1%冰醋酸(6:94)为流动相,进行测定.结果:方法简便易行、重现性好.结论:本文所采用的方法可以作为心宁片的含量测定方法.
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心宁片对心肌梗死后大鼠心肌血管内皮生长因子及其受体表达的影响
目的 观察心宁片对心肌梗死(心梗)后大鼠心肌血管内皮生长因子(VEGF)及其受体胎肝激酶1(FLK-1)表达的影响,探讨心宁片对心梗后大鼠缺血心肌的保护作用及其相关机制.方法 采用结扎大鼠左冠状动脉前降支制备心肌缺血模型.将60只SD大鼠随机分为假手术组、模型组、麝香保心丸组(30 mg*kg -1*d -1)以及心宁片大、中、小剂量组(分别为1.08、0.54和0.27 g*kg -1*d -1),各组均于制模后2 d给药,连用30 d.于术前、术后5 min、给药30 d后动态监测Ⅱ导联心电图,采用免疫组化法测定缺血心肌组织VEGF、FLK-1的表达.结果 与假手术组比较,模型组心电图ST段明显抬高,心肌缺血区VEGF及其受体FLK-1的含量显著增加(P<0.05或P<0.01).与模型组比较,心宁片大、中剂量组ST段显著压低[(0.319±0.064)mV、(0.328±0.046)mV比(0.384±0.078)mV,P<0.01和P<0.05];心肌缺血区VEGF、FLK-1表达显著升高(VEGF A值:0.190±0.029、0.169±0.027比0.156±0.019;FLK-1 A值:0.133±0.004、0.101±0.004比0.095±0.003,P<0.05或P<0.01],而心宁片小剂量组虽有压低和升高趋势,但差异无统计学意义.阳性对照药麝香保心丸组与心宁片大、中剂量组的作用差异无统计学意义.结论 心宁片可提高心梗后动物缺血心肌组织中的VEGF与FLK-1含量,其中以大剂量组作用强.
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HPLC法测定心宁片中丹参素钠含量
目的 建立心宁片中丹参素钠高效液相色谱(HPLC)含量测定方法.方法 色谱柱为Agilent Hypersil C18(4.0 mm×250 mm,5 μm),流动相为乙腈-0.1%磷酸(10∶90),流速1.0 mL/min,测定波长为225 nm.结果 线性范围为0.128～1.024 mg(r=0.999 9),平均回收率为98.92%,RSD=1.83%,精密度RSD=1.59%,重复性RSD=1.55%.结论 该方法简便、可靠、灵敏,可作为本品的质量控制方法.
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心宁片中芍药苷含量测定
目的:对心宁片中芍药苷进行含量测定.方法:采用高效液相色谱法(HPLC)对制剂所含芍药苷进行含量测定.结果:心宁片中的芍药苷与其它成分分离良好.高效液相色谱法(HPLC)测定芍药苷,可达基线分离,芍药苷对照品进样量在0.07152～0.3576 μg内呈线性关系,r=0.9996,平均回收率为99.1%,RSD=1.07(n=5).结论:该法简便快速,结果准确,重复性好,可作为该制剂的含量测定方法.
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心宁片药效学实验研究
心宁片是由赤芍、川芎、紫丹参、红花、三七等中药,采用超浓缩提取低温干燥法等现代工艺制成的无蔗糖薄膜衣异型片.具有活血化瘀、理气止痛等功能;临床上用于治疗心血管等疾病.为验证其疗效,我们对心宁片进行了药效实验研究.现将报道如下.
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心宁片对糖尿病合并心肌缺血再灌注损伤的保护作用和机制研究
目的:研究心宁片对糖尿病合并心肌缺血再灌注损伤的保护作用及其作用机制.方法:腹腔注射STZ加高脂高糖饲料喂养诱导二型糖尿病小鼠模型,随机分为假手术组、模型组及心宁片高、中、低剂量组(心宁片10、20和30 mg·kg"),每组10只.在此基础上,制作心肌缺血再灌注模型.测定小鼠体内血糖和血脂水平,测定缺血再灌注后心肌酶(LDH和CK-MB)、心梗面积以及AMPK磷酸化水平.结果:心宁片能够有效的控制糖尿病小鼠体内血糖和血脂水平,减轻胰岛素抵抗情况.心宁片能够减轻缺血再灌注引起的心肌梗死,降低LDH和CK-MB水平,减少MDA水平.同时,还发现心宁片能够促进AMPK蛋白磷酸化.采用AMPK特异性抑制剂CompoundC抑制AMPK后,LDH水平显著升高,心宁片的心肌保护作用减弱.结论:心宁片能够保护糖尿病合并缺血再灌注损伤,其机制可能是通过AMPK信号通路.
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HPLC-ELSD测定心宁片中三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1的含量
目的:建立心宁片(丹参、三七、红花、川芎等)中三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、Rb1的含量测定方法.方法:采用HPLC梯度洗脱法,使用C18柱,流动相为乙腈-水梯度洗脱,(0～5 min,20%～25%乙腈;5～20 min,25%～45%乙腈);ELSD漂移管温度70℃;氮气流速2.0 L/min;柱温35℃.结果:3种皂苷类成分得到很好分离,线性关系良好,平均加样回收率:三七皂苷R1,人参皂苷Rg1,人参皂苷Rb1分别为102.32%,100.73%和101.40%.RSD分别为0.97%,1.16%和1.21%.结论:本法结果准确,便于操作,可作为心宁片的质量控制方法之一.
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HPLC法同时测定心宁片中3个有效成分的含量
目的:建立HPLC法同时测定心宁片中芦丁、丹酚酸B、人参皂苷Rb1含量的方法.方法:采用CAPCELL PAK MG(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,流动相为乙腈(A)-0.1％磷酸溶液(B),梯度洗脱,流速1.0 ml·min-1,柱温35℃,检测波长为354 nm、286 nm和203 nm(波长切换方式).结果:芦丁浓度在0.0273～1.3600 mg·ml-1范围内(r=1.0000),丹酚酸B浓度在0.0244～1.2200 mg·ml-1范围内(r=1.0000),人参皂苷Rb1浓度在0.0186～0.9310 mg·ml-1范围内(r=0.9999),与峰面积均呈良好的线性关系;平均回收率分别为102.3％,98.7％,101.7％,RSD分别为1.1.％,0.8％,1.8％(n=6).结论:本文建立HPLC法可实现同时测定芦丁、丹酚酸B、人参皂苷Rb13种有效成分,方法快速、简便、结果准确,可为心宁片提供更全面、可靠的质量控制方法.
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心宁片对动物血液流变学和体外血栓形成的影响
心宁片(XinNing Tablet,简称 XNT)属治疗冠心病中药六类新药,为系统研究该药的药理作用,笔者观察了心宁片对家兔血小板聚集、血瘀型大鼠体外血栓形成及血液粘度的影响,现将其研究结果介绍如下.
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心宁片治疗冠心病心绞痛30例总结
目的:观察心宁片治疗冠心痛心绞痛的临床疗效.方法:将58例患者随机分为治疗组30例和对照组28例,治疗组采用心宁片治疗,对照组采用复方丹参滴丸治疗,主要观察两组冠心病患者心绞痛疗效、心电图疗效、硝酸甘油用量及临床症状改善情况.结果:治疗组对心绞痛的疗效明显优于对照组(P<0.05),且对气短、倦怠乏力的改善情况也明显优于对照组.结论:心宁片对冠心痛心绞痛有较理想的疗效.
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HPLC法同时测定心宁片中没食子酸、丹参素、原儿茶醛及芍药苷的含量
目的 建立同时测定心宁片中没食子酸、丹参素、原儿茶醛及芍药苷含量的高效液相色谱(HPLC)法.方法 采用Altima C18(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,流动相为甲醇-0.15％磷酸溶液,流速1.0mL· min-1,柱温35℃,检测波长分别为273 nm、283 nm、280 nm及230 nm.结果 没食子酸浓度在0.011 2～0.180 2 mg·mL-1范围内(r=1.000 0),丹参素浓度在0.012 5～0.201 3 mg·mL-1范围内(r=1.000 0),原儿茶醛浓度在0.001 2～0.0201 mg·mL-1范围内(r=1.000 0),芍药苷浓度在0.0124～0.199 1mg· mL-范围内(r=1.000 0),与峰面积均呈良好的线性关系;平均回收率(n=6)分别为100.7％、96.7％、99.4％及102.4％,RSD均小于3.0％.结论 建立的HPLC法可同时测定没食子酸、丹参素、原儿茶醛及芍药苷4种成分,方法快速、简便、结果准确,可为心宁片提供更全面、可靠的质量控制方法.
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RP-HPLC测定心宁片中芦丁的含量
目的:建立心宁片中芦丁的含量测定方法.方法:采用RP-HPLC法,色谱柱为Lichrospher C18柱(5μm,4.6mm×250mm,Hanbon Science),流动相为乙腈-0.1%磷酸溶液(20∶80);流速为1.0ml/min;检测波长为257nm;柱温为30℃;进样量为10μl.结果:所建立的HPLC含测方法平均回收率98.94%,RSD=0.69%(n=6).结论:所建立的HPLC含测方法灵敏度高,准确,快速,专属性强,重现性好,可作为心宁片的质量控制方法之一.
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心宁片对心肌梗死后大鼠心肌自由基的影响
目的 观察心宁片对心肌梗死后大鼠缺血心肌自由基的影响.方法 采用结扎大鼠左冠状动脉前降支制备大鼠心肌缺血模型,将大鼠随机分为假手术组、模型组、麝香保心丸组以及心宁片高、中、低剂量组.动态Ⅱ导联心电图监测判断模型复制,取心肌组织TTC染色测定心肌梗死范围,颈动脉取血后用分光光度法检测心肌超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)含量.结果 心宁片可改善模型大鼠心肌缺血区心电图ST段偏移程度,明显缩小心肌梗死面积,提高SOD的活性,减少脂质过氧化代谢产物MDA的含量.结论 心宁片对动物结扎冠状动脉实验性心肌缺血具有明显的保护作用.
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多波长HPLC法同时测定心宁片中5种成分的含量
目的：建立同时测定心宁片中丹参素、原儿茶醛、丹酚酸B、芍药苷和阿魏酸含量的方法。方法：采用多波长高效液相色谱法。色谱柱为Agilent Zorbax Eclipse XDB-C18，流动相为乙腈-甲醇-0.5％H3PO4溶液（梯度洗脱），流速为1.0 ml/min，柱温为30℃，进样量为10μl，检测波长为280 nm（丹参素、原儿茶醛、丹酚酸B）、230 nm（芍药苷）、320 nm（阿魏酸）。结果：丹参素、原儿茶醛、丹酚酸B、芍药苷、阿魏酸质量浓度分别在66.25～1060.00、5.55～88.86、187.20～2995.20、23.71～379.39、0.20～3.12μg/ml范围内与各自峰面积呈良好的线性关系（r＝0.9999、0.9999、0.9997、0.9999、0.9997）；精密度、稳定性、重复性试验的RSD＜2％；平均加样回收率分别为98.85％、97.95％、99.18％、98.14％、97.16％，RSD分别为0.12％、0.19％、0.37％、0.25％、1.36％（n＝6）。结论：该方法分离效果好、操作简便，可用于测定心宁片中5种成分的含量。
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心宁片的心血管作用研究
目的:研究心宁片对实验性心肌缺血动物的保护作用.方法:应用垂体后叶素等造成动物心肌缺血和其它心功能改变.结果:心宁片对垂体后叶素(Pit)引起的大鼠心电图急性缺血性改变有明显的预防作用;对注射Pit大鼠血清中磷酸肌酸激酶(CPK)和乳酸脱氢酶(LDH)的升高有一定的缓解作用.心宁片能明显减少Pit大鼠心肌组织丙二醛(MDA)的生成,保护大鼠心肌组织超氧化物歧化酶(SOD)的活性;对氯仿所致小鼠室颤和Pit引起的大鼠心律失常有明显的保护作用.心宁片能明显延长异丙肾上腺素(Iso)小鼠耐缺氧时间,对空气栓塞造成的小鼠心脑缺氧有明显的保护作用.
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心宁片对脑缺血大鼠的作用
目的:观察心宁片对脑缺血大鼠的保护作用.方法:采用结扎大鼠颈总动脉和生化测定法对大鼠进行脑缺血的研究.结果:心宁片能明显降低脑缺血大鼠的脑含水量和脑毛细血管通透性;明显减少脑缺血大鼠脑组织丙二醛(MDA)的生成,保护大鼠脑组织超氧化物歧化酶(SOD)的活性.
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心宁片对小鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用及其机制研究
目的 研究心宁片对小鼠心肌缺血/再灌注损伤(MI/RI)的保护作用和作用机制.方法 采用3种体外自由基体系测定心宁片的自由基清除能力.C57小鼠随机分为假手术组、模型组及心宁片高、中、低剂量组(心宁片10,20和30 mg·kg-1),每组10只.结扎冠状动脉左前降支制备MI/RI模型,观察给药后小鼠心功能参数,测定体内抗氧化酶水平,Western Blot法检测核因子E2相关因子2蛋白表达.结果 心宁片能够有效清除体外自由基,清除能力与维生素C相当.心宁片低、中、高剂量组能够明显改善心功能参数,升高体内抗氧化酶水平,促进核因子E2相关因子2蛋白表达.敲除核因子E2相关因子2蛋白后,心宁片调节氧化酶表达的能力被取消.结论 心宁片对MI/RI具有保护作用,其作用机制有可能是通过直接清除自由基和促进核因子E2相关因子2蛋白表达,从而升高抗氧化酶水平.
关键词： 心宁片 心肌缺血再灌注损伤 氧化损伤 核因子E2相关因子2 -
反相高效液相色谱法同时测定心宁片中盐酸川芎嗪和羟基红花黄色素A的含量
目的:建立同时测定心宁片中盐酸川芎嗪和羟基红花黄色素A含量的反相高效液相色谱法.方法:采用RP-HPLC法,流动相为甲醇(A)-0.2%磷酸水溶液(B),梯度洗脱[0 min(91%B)→12 min(80%B)→13 min(70%B)→30 min(73%B),保持1 min],色谱柱为Diamonsil C18(200 Bin×4.6 mm,5 μm),流速为1.0 mL·min-1,柱温为35℃,检测波长为210 nm.结果:盐酸川芎嗪和羟基红花黄色素A浓度分别在3.96～39.6μg·mL-1和3.52～35.2μg·mL-1内,与峰丽积旱良好的线性关系,相关系数分别为0.9999和0.9998;方法平均回收率(n=3)分别为99.9%～101.4%和100.2%～102.5%.结论:本方法简便、准确,专属性强,为心宁片的质量控制提供了依据.
