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补充葛根素对力竭游泳训练大鼠海马细胞凋亡及Bcl-2、P53蛋白表达的影响
目的:观察补充葛根素对力竭性游泳训练造成的大鼠海马细胞凋亡以及Bel-2和P53表达的影响.方法:2月龄SD大鼠30只随机分为安静对照组、力竭训练组和力竭训练+葛根素补充组,每组10只.对照组不运动,其它两组进行4周的力竭性游泳训练.葛根素补充组每天给予葛根素注射液灌胃(100mg/kg),对照组及单纯力竭运动组给予等量生理盐水.各组大鼠分别于实验结束后麻醉处死,取大鼠海马组织,采用流式细胞仪检测大鼠海马组织细胞凋亡、Bcl-2及P53蛋白表达.结果:与安静对照组相比,力竭训练组海马细胞凋亡率显著升高(P<0.01),细胞增殖指数显著升高(P<0.05),海马神经细胞Bcl-2表达显著下降(P<0.05),P53表达显著升高(P<0.01).与力竭训练组相比,葛根素补充组海马神经细胞凋亡率显著下降(P<0.01).海马神经细胞Bcl-2表达显著升高(P<0.05),P53表达显著性下降(P<0.05).结论:补充葛根素对力竭性游泳大鼠海马细胞有保护作用及促进疲劳恢复的作用,可能与葛根素上调凋亡基因Bcl-2及下调P53蛋白表达有关.
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急性一氧化碳中毒小鼠脑海马细胞凋亡及bcl-2、Bax和caspase-3蛋白表达
目的研究急性一氧化碳中毒(ACOP)后脑海马细胞凋亡和bcl-2、Bax、caspase-3蛋白表达的变化.方法雄性昆明小鼠56只随机分为7组(对照组、ACOP后1 h,6 h,12 h,24 h,3 d,7 d组),每组8只,对照组暴露于空气中,中毒组暴露于一氧化碳(CO)气体中,于相应时间点断头取脑.采用TUNEL、免疫组化法和流式细胞仪观察ACOP后细胞凋亡和caspase-3、bcl-2、Bax蛋白表达的变化.结果ACOP后3 d小鼠脑海马凋亡细胞明显增加(P＜0.05),第7天达高(P＜0.01);caspase-3蛋白在ACOP后1 h表达增加,第3天达到高峰,第7天降至正常;bcl-2蛋白在中毒后1 h海马区表达增多,24 h达到高峰,第7天大致正常;Bax蛋白在CO中毒1 h表达增多,24 h达高峰,第7天大致正常.结论ACOP后小鼠脑海马出现迟发的神经元凋亡及凋亡相关因子表达,细胞凋亡可能参与了ACOP迟发脑病的发病机制.
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复方丹参滴丸对血管性痴呆大鼠海马CA3区Bax、Caspase-3表达的影响
目的 观察复方丹参滴丸对血管性痴呆(VD)大鼠的学习记忆能力影响并探讨其作用的机制.方法 采用双侧颈总动脉结扎法制作血管性痴呆大鼠模型,用复方丹参滴丸治疗,Morris水迷宫检测大鼠的学习记忆能力,HE染色观察海马的病理变化,免疫组织化学检测海马CA3区Bax和Caspase-3的表达.结果 复方丹参滴丸能明显改善VD大鼠的学习记忆能力,减轻VD大鼠海马的病理损害,减少VD大鼠海马CA3区Bax和Caspase-3的表达.结论 复方丹参滴丸通过抑制海马CA3区Bax和Caspase-3表达,保护海马细胞,改善VD大鼠的学习记忆能力.
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慢性应激对大鼠海马细胞凋亡的影响及相关的信号通路
应激是机体对内外环境刺激的反应.海马既是与学习、记忆、行为和情绪密切相关的重要脑区,也是介导应激反应的主要靶器官[1-2].本研究比较了21 d慢性不可预见性应激模型大鼠和正常对照组大鼠海马细胞的凋亡指数及与凋亡相关的信号蛋白在海马的表达.
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大蒜素对幼年铅中毒大鼠海马细胞凋亡损伤的抑制作用
目的 探讨大蒜素对铅中毒大鼠海马细胞凋亡损伤的抑制作用.方法 60只雄性3周龄SD大鼠按随机数字表法分成6组,每组10只,分别为低剂量(A-L)、中剂量(A-M)和高剂量(A-H)大蒜素组,铅暴露(Pb)组,二巯基丁二酸(DMSA)组和空白对照组.空白对照组提供超纯水,其余5组饮用1.0 g/L的醋酸铅水溶液,20 d后换为超纯水并进行灌胃给药,A-L组、A-M组和A-H组大蒜素用药剂量分别为2.7 mg/kg、5.4 mg/kg、10.8 mg/kg,DMSA剂量为10.8 mg/kg,Pb组予9 g/L盐水.模型建立后处死大鼠收集全血和海马组织.检测血铅和海马组织铅浓度,采用TUNEL染色法检测海马组织细胞凋亡水平,实时荧光定量PCR(qPCR)和Western blot法检测天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶-3(caspase-3)、天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶-9(caspase-9)和聚腺苷酸二磷酸核糖转移酶(PARP)的mRNA和激活型蛋白表达量,采用免疫荧光技术检测细胞色素C在胞质内的表达情况.结果 1.A-L组、A-M组和A-H组大鼠血铅和海马组织铅水平[(190.54±11.33) μg/L,(0.28±0.03)μg/L;(159.55±16.94) μg/L,(0.22±0.06) μg/L;(116.62±8.85) μg/L,(0.19 ±0.01) μg/L]显著低于Pb组[(271.34±21.23) μg/L,(0.31±0.04) μg/L],差异均有统计学意义(均P＜ 0.05):DMSA组大鼠血铅和海马组织铅水平[(50.12±7.44) μg/L,(0.15±0.03) μg/L]低于A-L组、A-M组和A-H组.2.TUNEL染色结果显示,A-L组、A-M组和A-H组大鼠海马细胞凋亡水平显著低于Pb组[(2.81±0.17)％,(2.08±0.28)％,(1.33±0.08)％比(4.23±0.17)％],差异均有统计学意义(均P＜0.05);DMSA组大鼠海马细胞凋亡水平[(2.63±0.32)％]高于A-M组和A-H组,低于Pb组.3.qPCR结果表明,与Pb组比较,A-H组caspase-3、caspase-9和PARP的mRNA均显著下调(1.07 ±0.05,1.02 ±0.02,1.11±0.02比1.34±0.02,1.26±0.05,1.93±0.07),差异均有统计学意义(均P＜0.05);A-L组、A-M组caspase-3和PARP mRNA表达量下调(1.21 ±0.05,1.43 ±0.12、1.16 ±0.02,1.20 ±0.06比1.34±0.02,1.93±0.07),差异均有统计学意义(均P＜0.05),caspase-9 mRNA无明显变化;A-H组caspase-3、caspase-9和PARP的mRNA水平(1.07 ±0.05,1.02±0.02,1.11 ±0.02)均低于DMSA组(1.14 ±0.02,1.15±0.08,1.32 ±0.05).4.Western blot结果:与Pb组比较,A-H组激活型caspase-3、caspase-9和PARP蛋白表达量显著下调(A-H组:0.44±0.15、0.58±0.25、0.31 ±0.19和0.23±0.07比Pb组:0.69 ±0.13、0.72 ±0.22、0.55±0.21和0.43 ±0.10),A-M组激活型caspase-9蛋白表达量低于Pb组(A-M组:0.59 ±0.18比Pb组:0.72±0.22),差异均有统计学意义(均P＜0.05);A-H组激活型caspase-3和RARP蛋白表达低于DMSA组.5.荧光染色结果显示A-L组、A-M组和A-H组细胞色素C在胞质中的表达量均显著低于Pb组及DMSA组.结论 大蒜素在降低SD大鼠海马组织铅的同时,可通过线粒体通路抑制铅中毒大鼠海马组织细胞凋亡,大蒜素抑制凋亡损伤的作用可能优于DMSA.
关键词： 大蒜素 铅中毒 海马细胞凋亡 线粒体凋亡通路 天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶家族 -
海马神经细胞端粒酶反转录酶在七氟烷干预下的表达及对细胞凋亡的影响
目的 观察七氟烷对新生大鼠海马组织端粒酶反转录酶(TERT)及神经细胞凋亡的影响,探讨七氟烷导致神经细胞凋亡与TERT表达的关系.方法 将新生SD大鼠随机分为对照组(C组:吸2％纯氧)与七氟烷吸入组(S组:吸入2.3％七氟烷).体外分离大鼠海马组织,原位缺口末端标记法(TUNEL)染色比较神经元凋亡情况,免疫组织化学染色联合反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)比较TERT的表达水平.结果 TUNEL染色显示七氟烷处理后,新生大鼠海马神经元的凋亡显著增加(11.408±2.357比1.324±0.032,P＜0.05).与C组比较,S组中的TERT强阳性、阳性和弱阳性的表达均较低,且差异有统计学意义.PCR结果显示七氟烷处理后,大鼠海马神经元中TERT mRNA的表达水平降低至1/14.281.结论 七氟烷诱导海马组织神经细胞凋亡可能与其下调TERT表达密切相关.
