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脉络宁对原代大鼠海马神经元在氧糖剥夺/复氧中的保护作用
目的:观察脉络宁对氧糖剥夺/复氧(oxygen glucose deprivation/reoxygenation,OGD/R)诱导的SD大鼠原代培养海马神经元损伤的保护作用及可能机制.方法:原代培养从新生24h内SD乳鼠取材的海马神经元,建立氧糖剥夺30min/复氧8h海马神经元损伤模型.实验分为正常对照组、OGD/R模型组、脉络宁低、中、高剂量组(5,10和20 μg·mL-).采用Hoechest33258染色测定细胞凋亡,免疫细胞化学检测各组细胞中脑红蛋白(neuroglobin,NGB)及Bc1-2的表达,PCR检测其mRNA的表达情况.结果:与OGD/R模型组比较,各剂量脉络宁组神经元凋亡率均不同程度降低(P＜0.01),且随药物浓度的升高而降低;NGB和Bc1-2蛋白表达不同程度地升高(P＜0.01),且随药物浓度升高而升高；NGB及Bc1-2蛋白的mRNA亦升高(P＜0.01).结论:脉络宁发挥神经保护作用可能的机制之一是抑制OGD/R诱导的海马神经元细胞凋亡,促进NGB和Bc1-2蛋白的表达.
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大鼠脑组织缺血后Ngb mRNA表达与缺血时间推断的研究
目的 探讨大鼠脑组织缺血后不同时间脑红蛋白(Ngb)mRNA表达及法医学意义.方法 建立Wistar大鼠脑组织缺血模型,应用一步法逆转录-聚合酶链式反应(one step RT-PCR)技术与计算机图像分析技术检测脑组织缺血后不同时间Ngb mRNA表达的差别.结果 脑缺血后Ngb mRNA表达迅速升高,缺血1 min达高峰,缺血5 min表达迅速降低,但仍高于假手术组水平,10 min后随缺血时间延长表达再度逐渐增强.结论 大鼠脑组织缺血后Ngb mRNA的表达呈现时相性的变化,可在法医实践中用于早期脑缺血时间的推断.
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年龄因素对大鼠睾丸中脑红蛋白表达的影响
目的:探讨脑红蛋白(neuroglobin,NGB)在不同年龄段大鼠睾丸中的分布特征及表达差异.方法:随机选取3月,9月,15月龄SD雄性大鼠,每个年龄段各8只,处死后立即在无菌情况下取睾丸组织,免疫组织化学SP法观测NGB在大鼠睾丸中的定位,巢式PCR和western blotting分析NGB mRNA和蛋白的表达差异.结果:免疫组织化学显示NGB在大鼠睾丸的间质细胞、精原细胞、各级精母细胞、支持细胞和精子细胞的胞质和胞核都有表达;巢式PCR检测表明9月龄组大鼠睾丸组织中NGB mRNA表达量高,15月龄组表达次之,3月龄组表达量低;而NGB蛋白表达与其mRNA相一致.结论:NGB在各年龄段大鼠睾丸组织中广泛表达,且年龄因素影响大鼠睾丸中脑红蛋白的表达.
