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大鼠膀胱肿瘤热应激后热休克蛋白70肽复合物的纯化及其抑瘤效应
目的 分离纯化经亚高温盆腔区域热疗处理后大鼠膀胱肿瘤组织中的热休克蛋白70肽复合物(HSP70-PC),研究其对原位的大鼠膀胱肿瘤的治疗效应.方法 经尿道膀胱灌注MNU诱导出大鼠膀胱肿瘤,用内生场热疗系统加热大鼠盆腔后取出膀胱肿瘤,用改良的液相色谱法分离纯化HSP70-PC,用SDS-PAGE、Western blot、SELDI-TOF-MS鉴定纯化的HSP70及与其结合的多肽.将大鼠分为肿瘤对照组、HSP70治疗组,治疗1月后进行病理研究.结果 纯化获得的蛋白质经SDS-PAGE、Western blot、SELDI-TOF-MS鉴定,证实为HSP70-PC.HSP70-PC治疗组膀胱及肿瘤湿重低于对照组、肿瘤分期低于对照组(P＜0.01).肿瘤分级两组间差异无统计学意义(P＞0.05).膀胱肿瘤组织中CD8阳性细胞率、脾脏S-100蛋白阳性细胞率及CD8阳性细胞率、肿瘤细胞凋亡指数均高于对照组(P＜0.01).结论 应用改良的液相色谱法可以纯化出高纯度的HSP70-PC,该蛋白复合物具有上调肿瘤鼠的细胞免疫状态,促进肿瘤细胞凋亡的作用.
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郁金挥发油提取工艺及其抑菌活性研究
目的 采用正交实验法优选郁金挥发油的提取工艺,考察郁金挥发油的抑菌活性.方法 采用水蒸气蒸馏法提取郁金挥发油,以减重法测量挥发油质量,薄层色谱法及气相色谱法进行成分分析;测量郁金挥发油的抑菌圈大小,比较其抑菌效果.结果 郁金挥发油的佳提取工艺条件为:郁金粗粉[过10目筛,筛孔内径:(2000±70)μm],加12倍量水,提取8h;都金挥发油对金黄色葡萄球菌、四联球菌、大肠埃希菌、产气杆菌、枯草杆菌均有明显抑制作用.结论 所得郁金挥发油佳提取条件简便、经济,郁金挥发油抑菌效果显著.
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郁金挥发油提取工艺及其抑菌活性研究
目的 采用正交实验法优选郁金挥发油的提取工艺,考察郁金挥发油的抑菌活性.方法 采用水蒸气蒸馏法提取郁金挥发油,以减重法测量挥发油质量,薄层色谱法及气相色谱法进行成分分析;测量郁金挥发油的抑菌圈大小,比较其抑菌效果.结果 郁金挥发油的佳提取工艺条件为:郁金粗粉[过10目筛,筛孔内径:(2000±70)μm],加12倍量水,提取8h;都金挥发油对金黄色葡萄球菌、四联球菌、大肠埃希菌、产气杆菌、枯草杆菌均有明显抑制作用.结论 所得郁金挥发油佳提取条件简便、经济,郁金挥发油抑菌效果显著.
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白花丹高效液相色谱指纹图谱分离条件优化
目的 优化白花丹高效液相色谱法指纹图谱(HPLC-FPs)的分离条件.方法 以反相高效液相色谱法,使用Shim-pack VP-ODS C18柱(250 mm×4.6 mm, 5 μm),流动相为乙腈-0.1%磷酸水溶液,检测波长270 nm,柱温25 ℃,考察白花丹不同提取物在不同梯度洗脱条件下的分离情况.结果 优选出的白花丹HPLC-FPs分离条件可使白花丹不同提取物中各组分达到较佳分离、稳定性、精密度及重复性.结论 该色谱分离条件可用于建立白花丹药材HPLC-FPs的分离条件.
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反相高效液相色谱法测定金刚藤软胶囊中白藜芦醇的含量
目的 建立反相高效液相色谱法测定金刚藤软胶囊中脂溶性成分白藜芦醇的含量.方法 以Agilent Extend-C18(4.6 mm×250 mm,5μm)为固定相, 乙腈-水(22:78)为流动相,检测波长为306 nm,流速1 mL·min-1.结果 白藜芦醇在21.12～316.80 ng线性关系良好,r＝1.000 0;加样回收率为101.4%,RSD＝1.9%.结论 该法简单、快速、适合于测定金刚藤软胶囊中白藜芦醇的含量.
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双贝胶囊的质量标准
目的 建立双贝胶囊的质量标准.方法 采用薄层色谱法对双贝胶囊中土贝母、浙贝母、连翘进行定性鉴别;采用高效液相色谱法对双贝胶囊中土贝母苷甲进行定量分析.结果 薄层色谱鉴别分离效果好,专属性强;土贝母苷甲含量在0.182～0.912 mg·mL-1范围内线性关系良好,r=0.9997;平均加样回收率99.31％,RSD 0.49％.结论 该方法简单、准确、专属性强、重复性好,可有效控制双贝胶囊的质量.
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高效阳离子交换色谱法测定大腹皮中槟榔碱的含量
目的 建立大腹皮中槟榔碱的含量测定方法.方法 以高效液相色谱仪测定槟榔碱,采用partisil 10 SCX色谱柱(4.6mm×250 mum),柱温25℃;流动相为乙腈-磷酸(5→1 000,三乙胺调pH3.8)(60:40),流速为1.0mL·min-1,检测波长215 mm.结果 槟榔碱在20 min内分离良好,精密度实验RSD =0.69％ (n =5),重复性实验RSD=0.20％(n=6),稳定性实验RSD =0.24％ (n =6),加样回收率96.00％,RSD =1.8％ (n=6).结论 该法快捷、简便、专属性强、灵敏度高,可应用于控制大腹皮药材及其他成方制剂中槟榔碱的含量.
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不同样品溶剂对高效液相色谱_蒸发光散射检测器测定黄芪甲苷的影响
目的：考察不同样品溶剂对高效液相色谱_蒸发光散射检测器( HPLC_ELSD)测定黄芪甲苷的影响。方法以黄芪和感毒清颗粒为样品，以甲醇、90%甲醇、80%甲醇、70%甲醇、32%乙腈、15%乙腈和水为样品溶剂，采用HPLC_ELSD测定黄芪甲苷的含量。结果以90%甲醇溶液为样品溶剂，其系统适用性良好，准确度、精密度、线性关系等方法学验证指标符合要求。结论采用90%甲醇溶液作为样品溶剂，更有利于黄芪及制剂中黄芪甲苷的质量控制。
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高速逆流色谱分离纯化木芙蓉叶中芸香苷
目的 建立高速逆流色谱(HSCCC)分离纯化木芙蓉叶中芸香苷的方法.方法 采用水提取法制备芙蓉叶粗提物,应用大孔吸附树脂以60%乙醇为洗脱液对粗提物进行洗脱,达到去除杂质和获得黄酮类物质的目的,应用高速逆流色谱仪,以乙酸乙酯:正丁醇:水(1:0.3:1.5)上相为固定相,下相为流动相,组成溶剂体系对芙蓉叶提取物进行分离,从而获得高纯度的芸香苷.结果 经对提取的芸香苷粗提物及HSCCC法纯化后的峰样品进行高效液相色谱(HPLC)分析,表明芸香苷粗提物的纯度较低,纯化后的峰样品纯度98.6%,达到了化学对照品的要求.结论 该方法重复性好,分离效果好,可为HSCCC在其他植物黄酮类提取中的应用提供有价值的参考.
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武当山地区白四块瓦高效液相色谱指纹图谱研究
目的 建立白四块瓦类中草药的高效液相色谱(HPLC)指纹图谱分析方法.方法 采用Diamonsil C18(4.6 mm×250 mm,5 μm)色谱柱,以甲醇-水为流动相,梯度洗脱,检测波长232 nm,柱温25 ℃,流速1.0 mL·min-1.结果 确立了白四块瓦HPLC指纹图谱的6个共有峰,10批白四块瓦类中8批相似度多在0.9以上.结论 该方法准确可靠,重现性好,可为质量评价提供参考.
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超高效液相色谱-串联质谱法同时检测人血浆中11种镇静催眠药浓度?
目的：建立超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/ MS)测定人血浆中11种镇静催眠药的浓度。方法血样采用二氯甲烷：正己烷：乙酸乙酯(5：4：1)进行萃取，Waters ACQUITY UPLC HSS T3(2.1 mm×100 mm，1.8μm)色谱柱进行分离，乙腈-0.1％氨溶液为流动相进行梯度洗脱，流速0.2 mL?min－1，通过电喷雾离子源(ESI)，多重反应监测(MRM)正离子模式进行检测。结果11种镇静催眠药在所测质量浓度范围内呈现良好的线性关系，相关系数均>0.99，除右佐匹克隆检测限为200 pg?mL－1，其他物质检测限为10~20 pg?mL－1，11种被分析物的日内、日间 RSD 均<15.0％，提取回收率范围为72.3％~108.0％，基质效应范围为0.86~1.12。结论该方法快速、灵敏、准确，适用于人血浆中11种镇静催眠药浓度的同时检测。
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海金护卫散质量标准研究?
目的：建立海金护卫散的质量标准。方法通过薄层色谱法对处方中的延胡索、白芷、当归分别进行定性鉴别；采用高效液相色谱法对延胡索中的延胡索乙素进行含量测定。结果薄层色谱斑点清晰,专属性强,阴性对照无干扰。含量测定中延胡索乙素在10.78~107.8μg.mL－1浓度范围内线性关系良好(r＝0.9999),平均加样回收率96.57％( n＝6),RSD为1.40％( n＝6)。结论建立的方法可靠,能准确进行定性、定量检测,可有效控制海金护卫散的质量。
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人β2-微球蛋白的可溶性表达和纯化鉴定
目的:制备高纯度人β2-微球蛋白(β2m),为其结构和功能研究奠定基础.方法:选用两种不同的表达载体pET15b和pET21b,表达人β2m;联合使用亲和层析、离子交换层析、凝胶过滤层析、高压液相色谱等方法,纯化人β2m;采用SDS-PAGE和MALDI-TOF-MS质谱方法,鉴定人β2m.结果:使用改造过的N端组氨酸标签载体pET15b,在原核表达菌株E.coli2 BL21 (DE3)中,实现了人β2m稳定高效的可溶性表达;联合多种分离纯化方法,获得了色谱纯的人β2m,纯度达99％以上,质谱鉴定正确.结论:实现了人β2m的可溶性表达和制备,为进一步研究MHC Ⅰ类分子的结构和在免疫系统中的重要作用奠定基础.
关键词： 人β2-微球蛋白 表达载体 色谱 MALDI-TOF-MS -
氨基酸离子交换色谱实验方法改进
色谱技术广泛的应用于蛋白质、核酸、多糖、脂类、氨基酸等生物分子的分离和纯化[1],是目前科研上常用的实验技术.由于受实验条件的限制,至今难以在本科生中普及开展.为了提高实验课质量,根据学生实验的特点,我实验室对如何将科研上常用的实验技术转化为学生实验进行了探讨[2-3].该研究对色谱实验方法进行了必要的改进,通过学生实验,取得了良好的效果.
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基于标准高斯和塔板模型的RBFNN色谱峰解析
基于塔板色谱峰模型的径向基函数神经网络(RBFNN)用于色谱(含重叠)峰解析是一种新方法.为了使RBFNN具有结构重组能力,用于色谱峰解析的RBFNN必须采用遗传算法(GA).虽然遗传算法具有鲁棒性和全局优化能力,但若种群过小,则陷于局部极小点的概率将增高.而塔板模型是一个低效模型,若选用过大的种群,必然使解析过程加长.为了提高算法效率,提出先用高效色谱峰近似模型标准高斯模型进行繁衍,而后再用塔板模型.
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超高效液相色谱快速测定吡喹酮的有关物质
本文利用UPLC测定吡喹酮的有关物质,考察其可行性与实用性.
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HPLC测定功劳去火片中黄芩苷的含量
功劳去火片为<中国药典>2005版一都收载品种[1],由功劳木、黄芩、黄柏、栀子等药物制成,具有清热解毒之功效,用于实热火毒所致的急性咽喉炎、急性胆囊炎、急性肠炎.原标准缺少有效成分的定量控制指标.
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HPLC测定湖南道地药材玄参中哈巴俄苷的研究
目的:对10批湖南道地药材玄参中哈巴俄苷的含量进行测定,为科学评价及有效控制其质量提供可靠方法.方法:采用高效液相色谱法,测定10批不同来源的湖南道地药材玄参,色谱柱为依利特C18色谱柱(4.6×200 mm,5 μm);流动相:A乙腈,B 1%醋酸溶液;检测波长为278 nm.结果:建立了湖南道地药材玄参的含量测定.结论:该方法简便,能用于湖南道地药材玄参的鉴别与评价.
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中药指纹图谱的研究现状与展望
1中药指纹图谱的概念、特点及其意义指纹图谱(fingerprint)系指某种中药材或中成药经适当处理后采用一定的分析手段得到的能够标示该中药特征的色谱、光谱或其他图谱.
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砷形态分析方法进展
对色谱分析技术中液相色谱法、气相色谱法、光谱分析技术、毛细管电泳分析技术用于砷形态分析进行了评述,比较了各种方法的优缺点.引用文献30篇.
