首页 > 文献资料
-
EphrinA2基因促进MDA-MB-231乳腺癌细胞迁移的初步研究
目的 在MDA-MB-231人乳腺癌细胞系中过表达EphrinA2基因,研究其对肿瘤细胞迁移能力的影响,并初步探讨其可能的作用机制.方法 用脂质体法将EphrinA2真核表达质粒转染至MDA-MB-231细胞中,用Western blot法检测转染前后细胞中EphrinA2、E-Cadherin及p27/Kip1蛋白的表达;并用细胞疏散、细胞划痕及Transwell小室试验检测转染前后细胞迁移能力的变化;用Rac1抑制剂NSC23766抑制Rac1活性后用细胞划痕试验检测细胞迁移能力变化.结果 转染EphrinA2后的细胞迁移能力更强,并且呈现出E-Cadherin及p27/Kip1蛋白表达下降;用NSC23766抑制Rac1活性能抑制EphrinA2介导的细胞迁移.结论 EphrinA2能促进MDA-MB-231乳腺癌细胞的迁移,其机制可能与E-Cadherin和p27/Kip1蛋白下调及Rac1活性抑制有关.
关键词： EphrinA2 MDA-MB-231 迁移 -
红藻氨酸致痫大鼠海马Cav-1、EphrinA2蛋白的变化及肉桂醛的干预作用
目的：探讨肉桂醛对红藻氨酸（ KA）致痫大鼠海马Cav-1和EphrinA2蛋白的影响。方法60只雄性 Wistar大鼠随机分成正常组、NaCl组、癫痫组、肉桂醛低剂量（25 mg／kg）组、肉桂醛中剂量（37.5 mg／kg）组及肉桂醛高剂量（50 mg／kg）组。癫痫组和肉桂醛治疗组均采用大鼠脑右侧海马CA3区一次性注射1μg／μl KA 1μl诱发癫痫发作，NaCl对照组注射等量NaCl溶液，观察其行为学表现，Western印迹检测各组大鼠海马组织Cav-1和EphrinA2蛋白的表达。结果实验性癫痫大鼠模型制作成功，肉桂醛各剂量组和癫痫组实验动物全部达到点燃标准，肉桂醛治疗组大鼠癫痫发作潜伏期延长，发作时间明显缩短，发作级别降低。海马区Cav-1和EphrinA2蛋白的表达在正常组与NaCl组无差异（ P＞0.05）；与 NaCl组比较，癫痫组大鼠海马Cav-1和EphrinA2蛋白表达均明显增加（ P＜0.01）；肉桂醛各治疗组大鼠海马 Cav-1和 EphrinA2蛋白的表达低于癫痫组（ P＜0.05），且与肉桂醛浓度有关。结论 KA海马区注射可获得稳定的癫痫大鼠模型，肉桂醛通过降低大鼠海马 Cav-1和 EphrinA2蛋白的表达，起到抗癫痫作用。
-
肉桂醛对癫痫大鼠皮质小窝蛋白表达的影响
目的：观察小窝蛋白（ Cav）－1、Survivin和EphrinA2在红藻氨酸（ KA）诱导的急性癫痫大鼠皮质表达的变化，初步探讨癫痫发作机制及肉桂醛干预作用。方法将60只成年雄性 Wistar 大鼠随机分成正常组、NaCl 对照组、癫痫组、肉桂醛小剂量组（25 mg／ml ）、肉桂醛中剂量组（37．5 mg／ml）及肉桂醛大剂量组（50 mg／ml）。 KA制备癫痫模型，Western 印迹检测大鼠皮质Cav－1、Survivin和 EphrinA2的表达。结果 NaCl对照组和正常组Cav－1、Survivin和EphrinA2蛋白的表达无差异（P＞0．05），癫痫组大鼠皮质Cav－1、Survivin和EphrinA2蛋白的表达显著高于 NaCl对照组（P＜0．01）；与癫痫组比较，肉桂醛组Cav－1、Survivin和EphrinA2的表达降低，且与肉桂醛的浓度呈负相关关系（P＜0．05）。结论肉桂醛降低癫痫的发作与调节Cav－1、Survivin、EphrinA2蛋白的表达有关。
-
轴突导向因子EphrinA2在难治性癫(癎)患者颞叶中的表达
目的 检测轴突导向因子EphrinA2在难治性癫(癎)患者颞叶中的表达,探讨颞叶癫(癎)的发病机制.方法 难治性癫(癎)患者(实验组)颞叶标本12例,正常(对照组)颞叶脑组织标本2例.采用免疫组织化学方法,观察EphrinA2在患者颞叶和正常颞叶组织中表达变化.结果 癫(癎)患者颞叶组织细胞中EphrinA2呈阳性反应,细胞体积较对照组膨胀增大,细胞黄染,胞浆内为棕黄色的阳性反应颗粒,呈圆形或椭圆形;对照组细胞体积正常,胞浆为蓝色.实验组EphrinA2的OD值与对照组比较,显著增高,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 EphrinA2参与了癫(癎)的病理生理过程,EphrinA2在癫(癎)中的高表达可能与在颞叶癫(癎)患者轴突出芽和突触重建有关.
-
鸡卡那霉素中毒后EphrinA2蛋白表达与耳蜗毛细胞神经连接再生及重塑的关系
目的 探讨Ephrin A2在鸡卡那霉素中毒后耳蜗毛细胞神经连接再生及重塑过程中的作用.方法 66只新生罗曼鸡为实验对象.试验组48只,于生后3 d开始连续肌注卡那霉素200 mg·kg~(-1)·d~(-1),共用10 d,设施药完毕前2 d、完毕后1、3、7,15、21、30、60 d 8组.对照组18只,设3、13、43 d龄3组.不施与任何药物.所有动物按预定时间点处死,取听神经行Western印迹分析,处死前均作ABR测试.结果 对照组动物各时间点Eph-rinA2蛋白表达量基本一致.施药完毕前2 d及施药完毕后1 d时,试验组动物听神经组织中EphrinA2蛋白表达较对照组明显降低.施药完毕15 d后,EphrinA2蛋白表达明显升高,施药完毕30 d时,EphrinA2蛋白表达已与对照组基本相同.同时,实验组用药10天后ABR阈值达116.3±4.3 dB SPL,停药后3、7、10天时分别为112.0±5.2、101.5±4.3、94.3±4.8 dB SPL,10天后无变化.结论 鸡卡那霉素耳中毒后听神经组织中EphrinA2蛋白的表达与其耳蜗毛细胞神经连接的再生及重塑基本同步,提示EphrinA2在鸡卡那霉素耳中毒后耳蜗毛细胞神经连接的再生及重塑中可能有重要作用.
-
FTY720-P对破骨细胞EphA2-EphrinA2双向信号通路作用的研究
目的 探讨FTY720-P对破骨细胞EphA2-EphrinA2双向信号通路的影响.方法 取小鼠巨噬细胞RAW264.7,采用地塞米松及1α,25-二羟维生素D3诱导分化为破骨细胞,并行抗酒石酸酸性磷酸酶(tartrate resistant acid phosphatase,TRAP)染色鉴定.将诱导培养的破骨细胞分为两组,实验组给予400 ng/mL的FTY720-P处理,对照组不给予FTY720-P.培养48 h后,取细胞行实时荧光定量PCR检测、Western blot检测以及免疫荧光染色观察,分析细胞中EphA2、EphrinA2、RhoA,以及骨重建相关蛋白BMP-2及TGF-β1的表达.结果 经TRAP染色鉴定,RAW264.7细胞成功诱导成为破骨细胞.培养48 h后,与对照组相比,实验组EphA2及EphrinA2 mRNA及蛋白相对表达量均明显降低(P<0.05),RhoA蛋白相对表达量也明显降低(P<0.05);BMP-2及TGF-β1mRNA相对表达量明显增高(P<0.05),蛋白表达增强.结论 FTY720-P能通过影响破骨细胞EphA2-EphrinA2双向信号通路之间的传导下调RhoA,并促进TGF-β1和BMP-2表达,终影响破骨细胞的破骨作用.
-
大鼠正畸牙移动过程中ephrinA2在牙周膜内的表达与分布
目的:观察大鼠正畸牙移动过程中牙周膜内ephrinA2的表达分布情况.方法:取36只雄性SD大鼠建立正畸牙移动模型,上颌左侧正畸加力的第一磨牙为实验组,右侧不加力的第一磨牙为对照组.正畸加力后12h和1、3、7、10、14 d分别将大鼠处死(n=6),解剖分离出含有第一磨牙的牙槽骨并制作石蜡切片,免疫组化染色检测牙周膜中ephrinA2的表达.结果:ephrinA2在对照组牙周膜中呈弱阳性表达,主要分布于成纤维细胞胞质和胞膜上.实验组12 h时牙周膜中ephrinA2表达增强,压力侧显著高于张力侧(P＜0.05),主要分布于成纤维细胞、前体破骨细胞的胞膜上,部分分布于胞质和胞核中.阳性表达随正畸加力时间延长而增强,3d时达到高峰,7d时开始下降,14 d时接近对照组水平(P＞0.05).结论:ephrinA2在正畸力作用下牙周组织改建中具有重要作用,可能参与了牙槽骨改建的早期调控.
