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树鼩粪便中沙门氏菌LAMP检测方法建立及应用
目的 建立树鼩粪便沙门氏菌的环介导等温扩增(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)检测方法,并对此方法进行初步应用.方法 根据沙门氏菌种属特异性基因invA(侵袭蛋白基因A)的保守序列,设计合成特异性LAMP引物.分别设定十个反应温度即57℃ ~66℃和十个反应时间即24~42 min进行优化,并测定本方法的特异性和灵敏度;同时进行普通PCR实验,作为本方法的验证和比较.用建立的LAMP法对91份野生来源的树鼩稀便样品进行检测.结果优化反应条件选出反应温度为62℃,反应时间34 min;该方法对沙门氏菌的灵敏度可达3.36×101CFU/mL,比普通PCR方法高10~100倍;对10种树鼩来源的肠道细菌进行LAMP检测,只有沙门氏菌属的肠炎沙门氏菌和乙型副伤寒沙门氏菌检测为阳性,其余为阴性;对91份野生树鼩粪便样品进行LAMP检测,阳性检出率为20.88%;LAMP法的所有反应可在40 min内完成.结果 可通过肉眼观察颜色变化直接判定.结论 所建立的LAMP方法具有便捷、快速、灵敏、特异等特点,可用于树鼩粪便中沙门氏菌的大规模快速检测.
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河北廊坊市三县人群蛔虫感染情况与土壤蛔虫卵污染调查
蛔虫是人体感染的重要土源性线虫之一,为了解廊坊市目前人群蛔虫感染现状和土壤中蛔虫卵污染情况,我们按照廊坊市南、中、北三个区域,随机选取三河县、文安县和永清县三县作为调查点进行了调查,现将调查结果报告如下.内容与方法一、人群蛔虫感染调查按照廊坊市地理南、中、北方位,随机选取三河县、文安县和永清县三县为人群蛔虫感染调查县,以确定的调查点常住人群为调查对象,每个县检查约1 000 人,采集粪便样品采用改良加藤厚涂片法(Kato-Katz 法)镜检蛔虫卵.
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类志贺邻单胞菌2例报告
类志贺邻单胞菌(plesiomus shigelloides,PS)是近年来受到关注的感染性腹泻及食物中毒的病原体.2004年我们从2例腹泻患者的粪便样品中检出类志贺邻单胞菌菌株.现将检测结果报告如下.
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胶体金法检查粪便隐血假阴性的分析
免疫胶体金法检查粪便隐血(occult Blood ,OB)采用高灵敏度的双抗体夹心法检测原理.应用单克隆和多克隆抗体的特异性检测粪便样品中的人血红蛋白,共抗干扰性强,方法简单、快速,但该法仍存在一些问题需要改进[1-2],现将在实际工作中,碰到的假阴性结果报道如下.1 标本分析前原因血红蛋白抗原性发生改变,失去与抗体结合的能力,造成OB假阴性结果.(1)血红蛋白在消化道内存留时间过长,可能被胃酸或肠道内细菌分泌的酶所降解或破坏,导致的抗原性改变.(2)标本处理不当,如放置过久、高温、潮湿、未能及时送检等,造成的抗原性改变.在粪便形成的过程中,少量的消化道出血不一定与之混合均匀,且消化道出血具有间断性.