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眼表羊膜手术的羊膜固定方式
眼表碱烧伤、角膜溃疡等多种眼表疾病均可造成角膜、结膜的损伤和缺失，且常伴有角膜新生血管的形成，进而影响视觉功能。而羊膜具有使急性损伤的角膜或结膜缺损区迅速上皮化，抑制炎症、减少瘢痕形成等作用。因此在眼表重建及治疗角膜新生血管方面，羊膜已得到大量应用。但在术中如何固定羊膜十分关键。既保证黏附时间和覆盖面积，又保证操作便捷且刺激性小才能达到佳治疗效果。本文即对羊膜遮盖术中羊膜的固定方式进行综述。
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大泡性角膜病变的临床治疗及研究进展
各种原因引起的角膜内皮细胞损害,致角膜内皮失代偿,产生角膜基质水肿、上皮下水肿,终形成的大泡性角膜病变(bullous keratopathy,BK)已成为常见的致盲性角膜病.而BK并非一种独立的疾病,往往与其他多种眼病同时存在,使其更加不易治疗.近年来,除了临床常用的药物及传统的手术方式外,学者们还积极开发新的角膜层间术式,拓展羊膜在手术中的应用及其复合术式;对角膜内皮细胞移植术及体外培养角膜内皮细胞移植的不断探索和发展,在临床和研究上都取得了一定的进展.本文就BK的临床治疗和研究进展作一综述.
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羊膜在眼科临床应用中的研究新进展
随着羊膜移植在眼科临床,特别是在治疗眼表疾病中应用的成功报道,羊膜在眼科领域应用的基础研究也进一步受到关注.本文就羊膜的组织学、免疫学、生物学特性及其在眼科领域的临床应用进行综述.
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羊膜中生物活性物质的研究进展
羊膜移植促进角膜上皮化,抑制炎症和新生血管,减轻纤维化的作用在很多研究中得到证实,但有关这些作用的生物学基础尚不完全清楚.近年来有关羊膜的基础研究逐渐增多,现已有数十种生物活性物质从羊膜中检出.本文将羊膜内生物活性成分按性状和作用分为基质成分、生长因子和酶类并对其相互关系及近年来的研究进展作简要综述.
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构建组织工程化羊膜角膜上皮植片的研究进展
虽然组织工程化角膜组织已成功构建,并为体外进行角膜生理、病理、药理和角膜移植等方面的研究提供了与活体角膜很接近的模型,但其距离临床应用还有一定距离.近年来,采用组织工程技术构建的羊膜角膜上皮植片已率先应用于临床,为成千上万的由于角膜上皮缺损所致的角膜疾病患者带来希望,本文对有关羊膜的基础研究、羊膜负载角膜缘干细胞植片的构建方法及其功能的评价、角膜缘干细胞在羊膜上的生物学特性、植片移植及术后护理等方面的研究进展和存在的问题进行综述.
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"三明治"式人羊膜移植治疗难治性青光眼疗效评价
目的:探讨小梁切除联合"三明治"式羊膜植入治疗难治性青光眼并运用超声生物显微镜(ultrasound biomicroscopy,UBM)评价其疗效. 方法:对完成追踪观察的49例(50眼)难治性青光眼患者施行小梁切除后,术中巩膜瓣下及结膜瓣下植入人羊膜(即三明治式),以保持滤过道通畅.结果:术后随访6～12mo,85.2%的患者完成了整个随访,术后12mo时,眼压由术前的46.38±0.12mmHg降至18.86±3.80mmHg(t=48.56,P＜0.05),观察术前、术后眼压比较差异均有显著意义,功能性滤过道形成率为88.6%,无排斥反应和严重并发症,UBM下所有病例术后均形成前部的透明液间腔. 随访期间巩膜池前部体积无明显变化,平均宽1.976±0.618mm,高0.295±0.137mm. 羊膜在术后9mo左右融解后后部巩膜池无明显液间池存在,但滤过道通畅.结论:"三明治"式羊膜植入是治疗难治性青光眼的安全有效术式.UBM适合于通过影像对该手术疗效进行长期随访.
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NPTS三种植入物疗效的随机对照
目的:观察NPTS术中植入SKGE胶、羊膜、自体巩膜3种植入物的治疗原发性开角青光眼(POAG)的临床效果.方法:采用平行、随机、对照设计,将药物控制不良的84例(93眼)POAG患者分为常规组27例(31眼).羊膜组28例(32眼),巩膜组29例(30眼),3组施行相同的手术过程,分别植入SKGE生物胶,人胎盘羊膜和自体巩膜.结果:术后3组视力、眼压动态变化、滤过泡形成情况、并发症发生率均无统计学意义,P>0.05.结论:SKGE生物胶、羊膜、自体巩膜均可作为NPTS植入物,但羊膜、自体巩膜取材便利、经济,可望成为更为合适的NPTS植入材料,有一定应用前景.
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多层新鲜羊膜移植联合结膜囊成形术治疗结膜囊狭窄
目的:探讨多层新鲜羊膜移植术治疗结膜囊狭窄的临床疗效.方法:对52例(52眼)结膜囊狭窄、无法安装义眼的患者行结膜囊成形术,根据结膜囊狭窄的不同程度分为3组.将2～3层新鲜羊膜上皮面朝上移植于结膜缺损区,上下睑缘褥式缝合.每周打开眼睑并用荧光素试纸染色,观察结膜上皮生长情况.术后3mo拆除上下眼睑缝线,定制合适的义眼.结果:术后随访12mo.术后4wk 51眼羊膜表面全部被结膜上皮覆盖,有1眼发生羊膜上皮融解,结膜上皮未愈.术后3mo Ⅰ度结膜囊狭窄(A组)15眼全部治愈;Ⅱ度结膜囊狭窄(B组)17眼中15眼治愈,2眼好转;Ⅲ度结膜囊狭窄(C组)20眼中16眼治愈,3眼好转,1眼无效.Ⅲ度结膜囊狭窄患者手术成功率与Ⅰ度、Ⅱ度结膜囊狭窄患者比较,其差异无显著性意义(P＞0.05).结论:多层新鲜羊膜移植联合结膜囊成形术是治疗结膜囊狭窄的有效方法,同样适用于重度结膜囊狭窄.
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羊膜培养液体外抑制兔角膜上皮细胞血管内皮生长因子的表达
目的:探讨羊膜培养液对角膜上皮细胞中血管内皮细胞生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)表达的影响.方法:刮除并收集新鲜兔角膜上皮细胞,传代培养接种于35mm培养皿及自制的羊膜培养皿上.实验分为4组,Ⅰ组(对照组):无血清的DMEM培养液,Ⅱ组:去上皮的羊膜培养液,Ⅲ组:未去上皮的羊膜培养液,Ⅳ组:将细胞直接接种于无上皮羊膜.作用48h后用Trizol法提取各组样本的总RNA,进行RT-PCR一步法反应检测各组VEGF mRNA表达并与β-actin比较.结果:正常角膜上皮细胞中有VEGF基因表达,在Ⅲ,Ⅳ组中表达受到明显抑制(P＜0.01,n=5).结论:羊膜培养液明显抑制VEGF mRNA在角膜上皮细胞中的表达.
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青光眼滤过术中羊膜、丝裂霉素和透明质酸钠抗增殖作用的比较
目的:探讨青光眼滤过术中羊膜、丝裂霉素(mitomycin C,MMC)和透明质酸(Healon)抗增殖作用.方法:健康同种系新西兰大白兔15只30眼随机选5只为1组,共3组:羊膜组、MMC组和Healon组.均行小梁切除术,在作巩膜瓣后,羊膜组在巩膜瓣下放置保存羊膜;MMC组在巩膜瓣下放置0.25g/L的MMC海绵片4min;Healon组在巩膜瓣下放置透明质酸钠.术后观察滤过泡、角膜和眼底情况.结果:术后28d取滤过泡周围组织作病理检查,羊膜组、MMC组多数形成功能性滤过泡,但羊膜组无任何并发症,病理未见结缔组织胶原化.结论:羊膜在青光眼滤过术中抗增殖作用较MMC,Healon效果好,无副作用,是一种安全有效的抗增殖方法,值得推广.
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经角膜基质细胞诱导的大鼠骨髓间充质干细胞在人羊膜上构建角膜上皮移植片
目的:研究将骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSC)诱导分化后在羊膜表面培养构建角膜上皮移植片的可行性.方法:取SD大鼠骨髓间充质干细胞和角膜基质细胞,分别培养并传2代后进行共培养,取共培养7d后的MSC覆载于新鲜人羊膜,再培养7d.对MSC及诱导后MSC进行免疫荧光染色和扫描电镜检查;对覆载细胞的羊膜进行HE染色及免疫荧光染色.结果:MSC在体外培养条件下贴壁生长,免疫荧光染色CD29和CD44阳性,CK12阴性.经角膜基质细胞诱导分化后,MSC细胞CK12染色转为阳性.诱导后MSC接种到羊膜表面,迅速贴壁生长,组织学特性无明显改变,CK12染色仍为阳性.结论:经角膜基质细胞诱导的MSC表现出角膜上皮细胞特征,在羊膜上生长后保持不变.
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凹凸面生物羊膜移植术治疗上皮内上皮癌的疗效观察
目的：凹凸面生物羊膜移植术治疗上皮内上皮癌的疗效观察。方法：针对我科临床诊治为上皮内上皮癌患者24例(24眼),均进行肿瘤病灶清除,随机选择其中12例对切除的结膜部分以及巩膜创面行凹凸生物羊膜覆盖,另外12例行普通羊膜覆盖,术后观察对比角膜伤口的上皮愈合程度,凹凸面生物羊膜的降解情况,术后肿瘤复发情况以及其他的并发症。切除的肿瘤均进行组织病理学检查。
结果：所有患者样本的病理结果均为上皮内上皮癌,术后5 d内两组患者术区角结膜上皮已无荧光素钠着染,14 d左右羊膜完全降解,两组患者角膜愈合时间无统计学意义,术后视力提高两组相比较无统计学意义,随访1a期间,凹凸面羊膜覆盖组较普通羊膜覆盖组复发率低。
结论：肿瘤切除联合凹凸面生物羊膜移植术是治疗上皮内上皮癌有效的手术方法。 -
羊膜移植在20例眼表疾病中的应用
目的:研究羊膜移植在眼表疾病中的疗效.方法:曾经历过眼睑缝合、角膜接触镜等各种方法治疗的20例20眼接受羊膜移植.结果:在术后平均20d内,第一次羊膜移植后有10眼(50%)治愈,1眼(10%)复发.结论:羊膜移植有助于眼表疾病的治疗.
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兔眼滤过手术模型制作探析
目的:探讨建立长期有效的兔眼滤过手术模型.方法:对18只36眼家兔行青光眼滤过手术,其中右眼植入单层生物羊膜,左眼植入双层生物羊膜,术后观察眼压、滤过泡形态.结果:家兔术后巩膜瓣修复快,滤过通道难以长期有效维持,易导致造模失败.术中植入双层羊膜,可明显延长有效滤过通道的维持时间,部分模型有效滤过可维持14~30d.双层羊膜组眼压控制也较理想.结论:兔眼小梁切除术中植入双层羊膜,可以提高滤过模型的成功率.
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纯甘油-4℃保存方法对羊膜活性影响的研究
目的:观察-4℃纯甘油保存方法对羊膜活性的影响.方法:取健康剖宫产产妇胎盘,剥离羊膜,分成2 cm×2 cm小块,保存于-4℃纯甘油中,3,7,14,30,60,90 d后,分别进行光镜,酶组织化学[乳酸脱氢酶(LDH)、琥珀酸脱氢酶(SDH)]及免疫组织化学[碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)]观察,并于新鲜羊膜对比.结果:光镜下,-4℃纯甘油保存60d以内羊膜上皮层结构较完整,可见少数细胞破裂.胞核脱失.90 d组上皮层结构破坏明显,多数细胞破裂,核脱失.酶组织化学(LDH、SDH)及免疫组织化学(bFGF)显示:60 d内各组于新鲜羊膜比较无显著差异性;各组间两两比较亦无显著性差异(P＞0.05).而90 d组于新鲜对照组及各实验组间两两比较均有显著性差异(P＜0.05).结论:羊膜在-4℃纯甘油保存60 d内;组织结构;上皮细胞活性稳定
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以不同性质羊膜为载体培养人角膜缘干细胞的生物学特性
目的:观察并比较在完整羊膜和去上皮层羊膜这两种不同性质的载体羊膜上培养的人角膜缘干细胞的生物学特性.方法:采用组织块培养法,将角膜缘组织块种植于完整羊膜(Ⅰ组)和去上皮层羊膜(D组)上进行培养,并对细胞的生长特点,超微结构以及免疫荧光染色结果进行观察.结果:在这两种性质的羊膜上人角膜缘干细胞均可生长形成单层,扫描电镜观察见细胞之间存在细胞连接.免疫荧光细胞化学染色结果显示,Ⅰ组细胞BrdU标记阳性率高于D组(Ⅰ组vsD组,P＜0.05),而对AE5和缝隙连接蛋白(Cx43)表达的阳性率低于D组(Ⅰ组vsD组,P＜0.05),对增殖细胞核抗原(PCNA)阳性表达两组均较高.结论:人角膜缘干细胞均可在这两种性质的羊膜上生长,在去上皮羊膜上生长的干细胞有不同程度的分化,而完整羊膜能更好的维持干细胞特性.
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保存人羊膜对人脐静脉内皮细胞生长状态的影响
目的:观察保存人羊膜对体外培养及移植状态下人血管内皮细胞生长状况的影响,研究羊膜移植治疗角膜新生血管性疾病的机制.方法:取健康产妇胎盘羊膜,以酶消化加机械分离法去上皮,-80℃甘油保存.使用时复水,平铺于培养板底,干燥备用.1g/L胰蛋白酶灌流消化法收获人脐静脉内皮细胞,以1～1.7×108/L分别接种于培养板及铺有羊膜的培养板孔内培养.倒置显微镜及电镜进行形态学观察.待羊膜上细胞生长成完整单层后,将载有血管内皮细胞的羊膜移植到去内皮细胞的猫眼角膜内皮侧,3mo后取角膜植片行组织病理学观察.结果:羊膜及培养板上培养的细胞均在24h完全贴壁,2～3d形成单层,细胞为铺路石样,Ⅷ因子染色阳性.植入猫眼内的人脐静脉内皮细胞在长达3mo的观察期内仍存活,有些甚至增生成多层排列.结论:体外培养及移植状态下,保存人羊膜都不能抑制血管内皮细胞增殖,其抑制角膜新生血管形成的机制可能不是通过内皮细胞途径.
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羊膜对兔眼滤过道成纤维细胞活性的抑制作用
目的:应用细胞增殖指标核仁组成区相关嗜银蛋白(AgNORs),研究兔眼滤过道成纤维细胞(Fb)增殖规律及羊膜的抗增殖作用,并对其临床意义进行探讨.方法:模仿人眼滤过手术方式行兔眼巩膜瓣下巩膜咬切术,切开前房前巩膜瓣下植入5mm×6mm大小的羊膜,术后1,2,3,4wk取兔眼滤过道标本,作AgNORs及HE染色,比较羊膜眼和对照眼FbAgNORs染色颗粒数量、眼压、滤过泡变化.结果:不同手术区羊膜眼Fb AgNORs颗粒数显著低于对照眼,羊膜抑制率为10.8%～59.5%,羊膜眼眼压低于对照眼,术后3,4wk差异有显著性;羊膜眼滤过泡保持时间1～4wk,对照眼为1～2wk.结论:羊膜可以有效抑制滤过道Fb的增殖活性、延长眼压下降和滤过泡保留时间.
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羊膜移植治療結膜囊狭窄24例
目的平價羊膜移植治疗結膜囊狭窄的效果.方法封24例結膜囊狭窄患者行結膜囊成型聯合保存羊膜移植術.結果術後随訪6個月～1年,結膜囊大小及形態穩定,24例中14例經一次手術成功,10例嚴重的結膜囊狭窄經二次手術聯合臉缘粘連性缝合半年後獲得成功.結論保存人羊膜移植治疗結膜囊狭窄,取材方便,效果顯著.
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保存羊膜移植在眼表重建方面的临床应用
目的:观察和探讨保存人羊膜移植在眼表重建方面的临床应用和作用机制.方法:采用保存人羊膜移植治疗各种原因造成的眼表疾患共144例(154眼),术后随访观察4mo～1a.结果:术后患者眼部充血、刺激症状均较轻,约在1～2wk后移植区水肿消退.111眼(72.1%)视力有提高;147眼(95.5%)一次性达到治疗效果. 结论:保存人羊膜移植能够安全、有效地重建眼表疾患患者的眼表,值得广泛应用.
