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8例先天性无阴道治疗体会
先天性无阴道在女性生殖道畸形中并非罕见,其发生率为1/5000～1/4000,分为完全性和不完全性两种,前者多合并先天性无子宫.目前,国内外治疗先天性无阴道方法很多,主要方法有:乙状结肠阴道成形术,回肠阴道成形术,游离皮瓣阴道成形术,羊膜阴道成形术,腹膜阴道成形术,腹腔镜治疗先天性无阴道,顶压阴道成形术.本研究对我院2年间8例先天性无阴道成形术式经验总结如下.
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利凡诺尔联合米非司酮在中期妊娠引产中的应用
利凡诺尔是终止中期妊娠常用药,自2000年至今,采用联合米非司酮,在终止妊娠中取得了良好效果,现报告如下.临床资料一、一般资料:选择孕16～26周,因医学因素自愿要求终止妊娠者87例,且经查均无利凡诺尔及米非司酮用药禁忌.二、方法:经腹腔向羊膜腔内注入利凡诺尔100mg,随即口服米非司酮50 mg,间隔2小时再口服50 mg,12小时后(即应用凡诺尔后24小时),若胎儿未娩出,再口服米非司酮50mg,米非司酮大用药总量为150 mg.
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羊膜移植治疗重度眼部碱烧伤
本院于2003年12 月至2006年6月收住院治疗的严重角结膜碱烧伤54例(56眼),行羊膜移植治疗,现报告如下.
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剖宫产术后舌后坠原因分析
1临床资料1.1一般资料我院自2001年1月～6月施行剖宫产术446例,发生呼吸延迟伴舌后坠6例,占0.01%.手术指征分别为:相对头盆不称3例、先天性高度近视1例、羊膜早破1例、中度妊娠1例.
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羊膜联合Ahmed青光眼引流阀治疗新生血管性青光眼疗效观察
目的 探讨在Ahmed青光眼引流阀手术的基础上,在巩膜表面和引流盘表面各覆盖羊膜治疗新生血管性青光眼的效果.方法 新生血管性青光眼手术患者32例,依据不同的治疗方法分为两组,对照组16例用Ahmed青光眼引流阀进行手术治疗,羊膜法组16例以羊膜联合Ahmed青光眼引流阀治疗.结果两组患者治疗前基本情况差异无显著性,而治疗后1周及1、3、6个月时羊膜组的眼压控制及视力改善情况优于对照组,血清及泪液血管内皮生长因子及白介素-6控制更好,差异有显著性(P<0.05).结论 在Ahmed青光眼引流阀手术的基础上,在巩膜表面和引流盘表面各覆盖羊膜治疗新生血管性青光眼,取得满意疗效.
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人羊膜间充质干细胞移植对大鼠随意皮瓣成活的影响
目的 探索人羊膜间充质干细胞(hAMSCs)移植促进超长宽比例随意皮瓣血管化,进而促进皮瓣成活的可能性. 方法 体外分离、培养、免疫组化及流式细胞术鉴定hAMSCs.hAMSCs植入皮瓣前用CellTrackerTM CM-Dil进行标记.选用20只健康成年SD大鼠,于大鼠背侧左右分别构建8 cm1×2 cm超长缺血随意皮瓣模型,皮瓣蒂部位于髂棘水平.皮瓣掀起后每只大鼠皮瓣分为左侧组[注射0.5 ml低糖杜氏改良培养基(LG-DMEM)]和右侧组(注射0.5 ml浓度为l×106/ml的hAMSCs).术后7d观察各组皮瓣的成活率.激光多普勒血流监测仪于术后即刻、24 h、48 h、4d、7d监测皮瓣蒂部和中部的相对血流值.通过组织学观察各组成活皮瓣毛细血管密度,荧光显微镜观察标记CellTrackerTM-CM-Dil的hAMSCs在皮瓣内的分布及成活情况. 结果 皮瓣成活率左侧组为(50.6±2.2)％,右侧组为(70.9±2.1)％(P＜0.05).左侧组术后4d及7d皮瓣蒂部的相对血流值高于右侧组(P＜0.05);皮瓣中部术后24 h、48 h、4d、7d的相对血流值均低于右侧组(P＜0.05).术后7d皮瓣内微血管断面密度左侧组为(8.8±1.2)个/mm2,右侧组为(23.5±1.6)个/mm2,(P＜0.05).右侧组成活皮瓣组织在荧光显微镜下可观察到标记有CellTrackerTM CM-Dil红色荧光染料的hAMSCs,可以证实hAMSCs在皮瓣内分布及存活. 结论 在超长随意皮瓣中、远部位应用hAMSCs可明显改善皮瓣的成活率,增加皮瓣下微血管重建的密度.
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羊膜间充质干细胞研究进展
近些年来,再生医学蓬勃发展,它主要致力于使用干细胞来生成机体组织和器官以替代人体丧失功能的器官和组织来达到治疗目的.再生医学需要具备三个必要的条件:(1)干细胞,即具有高度的自我更新、增殖和分化能力,能够修复受损器官组织的细胞;
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新生儿疟疾一例
患儿男26 d,因发热、皮肤出血点4～5 d入院.系第2胎第2产,胎龄40周,自然分娩,羊膜早破2d.生后1周内擦过"马牙",混合喂养.其于入院前4～5 d出现发热,体温38.5℃,使用退热药后体温正常,面部出现出血点,第3日发热体温38.7℃,在当地医院化验外周血常规:
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新生儿先天性弓形虫脑病1例
患儿,男性,G4P1,孕34周,羊膜早破18小时而剖宫产.出生体重1650g,1分钟Apgar评分9分.以"早产儿、低出生体重儿"收住新生病房,人院体检:早产儿貌,头围30cm,哭声响,反应好,全身皮肤无黄染.
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羊膜移植髋关节成形术的临床研究
目的:了解胎盘羊膜经冷藏保存后及植入人体髋关节后的组织学改变.方法:对新鲜羊膜,冷藏保存1个月、2个月、3个月、半年、1年的羊膜以及植入髋关节的羊膜活检后经光镜及电镜检查.结果:冷藏羊膜上皮细胞的胞膜及核心膜保存完整,而细胞核心、细胞质和细胞器均发生不同程度的退变.植入髋关节的羊膜先化生为纤维软骨,4个月左右开始化生为透明软骨并形成新的关节囊,内衬滑膜组织,1年左右可化生为类透明软骨.结论:胎盘羊膜植入人体髋关节后在持续活动的刺激下可化生为透明软骨,对关节功能的恢复可起到重要作用.本研究结果为髋关节成形术又增加了一个新方法.
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羊膜或羊膜联合结膜移植治疗眼严重化学烧伤20例
1 临床资料2000年10月-2007年8月,笔者单位收治20例眼部严重化学烧伤患者(共25只伤眼).其巾男14例(19只伤眼)、女6例(6只伤眼),年龄5～50岁,平均29岁.酸烧伤8例(12只伤眼)、碱烧伤12例(13只伤眼).人院时视力:光感～0.08.患者均有不同程度角膜水肿、浑浊和上皮剥脱,未形成角膜溃疡或穿孔.
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羊膜联合角膜缘移植治疗早期化学性眼烧伤13例
临床资料:本组患者男9例,女4例;年龄6～43岁,平均25岁.单眼烧伤10例,双眼3例;Ⅲ度烧伤9例,Ⅳ度4例;酸烧伤3例,碱烧伤10例.开始接受治疗的时间为伤后3 h～5 d.术前视力:光感1眼,手动/眼前5眼,指数/眼前4眼,0.02～0.08者6眼.术后随访3～12个月,平均8个月.
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锥虫蓝直接染色法鉴定人羊膜细胞活力方案研究
目的 摸索锥虫蓝直接染色法在人羊膜细胞活力快速鉴定中的适宜浓度及染色时间.方法 取健康剖宫产产妇的胎膜6张,浸泡后分离羊膜并剪成1 cm×1 cm备用.(1)取部分制备好的羊膜分别浸泡于1、2、3、4 g/L4种浓度的锥虫蓝溶液中,每个浓度下各浸泡1、3、4、10 min后取出,在PBS中漂洗30s,更换PBS,继续漂洗30 s.存光学显微镜下选取4个视野拍照,每个视野计数1000个细胞,同时计数蓝染细胞计算细胞死亡率.(2)另取部分制备好的羊膜浸泡于0.5 g/L氯己定1h后行锥虫蓝直接染色,锥虫蓝溶液浓度与染色时间为前一实验结果选定的浓度、时间,并与1 g/L锥虫蓝染色10 min对比.后续操作及检测同前一试验.对数据行两因素析因设计方差分析、Duncan多范围检验及LSD检验. 结果 (1)1、2、3 g/L锥虫蓝染色1、3 min后细胞死亡率相近(P值均大于0.05),染色4、10 min后细胞死亡率明显高于1、3 min(P值均小于0.05).4 g/L锥虫蓝染色1、3、4 min后细胞死亡率相近(P值均大于0.05),染色10 min后细胞死亡率显著高于1、3min(P值均小于0.05).锥虫蓝浓度为2、3、4 g/L时,各时相点细胞死亡率都显著高于1 g/L(P值均小于0.05).(2)对经0.5 g/L氯己定浸泡1h羊膜染色显示,1 g/L锥虫蓝染色1 min细胞死亡率[(72.6±7.4)％]显著低于预计死亡率(100.0％,P ＜0.05),染色3 min细胞死亡率[(95.3±5.6)％]、染色10 min细胞死亡率[(99.8±5.0)％]与预计死亡率相近(P值均大于0.05). 结论 锥虫蓝直接染色法鉴定人羊膜细胞活力的适宜方案为浓度1 g/L,染色时间3 min.
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羊膜移植物的制备及临床应用研究进展
Amniotic membrane has been used as wound dressing for more than 100 years.With the development of the preservation and preparation techniques,amniotic membrane is widely used in opbthalmology,burns,plastic surgery,dentistry,and neurosurgery.In recent years,as more and more amuiotic membrane is used in chronic wounds,it will be a new treatment method for wounds.This paper is a brief review about advances in preparation and clinical application of amniotic membrane graft.
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人羊膜上皮干细胞来源外泌体对大鼠全层皮肤缺损创面愈合的影响
目的 探讨人羊膜上皮干细胞来源外泌体对大鼠全层皮肤缺损创面愈合的影响.方法 (1)取笔者单位妇产科5名足月分娩孕妇的羊膜组织,采用胰蛋白酶消化法分离人羊膜上皮干细胞并观察细胞形态;取第3代细胞,用罗丹明标记的鬼笔环肽染色,观察细胞骨架;另取第3代细胞,采用流式细胞仪检测细胞表面标志物CD29、CD31、CD34、CD90、CD105、SSEA3、SSEA4和免疫相关标志物人白细胞抗原DR位点(HLA-DR)的表达;另取第3代细胞,进行成脂、成骨诱导分化鉴定.(2)取第3代人羊膜上皮干细胞,用含体积分数10％无外泌体FBS的DMEM培养基培养,超速离心法从细胞培养上清液中提取人羊膜上皮干细胞来源外泌体,用扫描电镜观察其形态.(3)取6只成年SD大鼠,于每只大鼠背部制备4个面积为1 cm×1 em的全层皮肤缺损创面,按随机数字表法将每只大鼠创面分为对照组及25、50、100 μg/mL外泌体组(每组6个创面),分别于创面四周皮下多点均匀注射总体积100 μL的PBS及25、50、100 μg/mL人羊膜上皮干细胞来源外泌体.伤后7、14、21 d,观察创面愈合情况计算创面愈合率.伤后21 d,取各组创面愈合组织,HE染色,观察计数皮肤附件;Masson染色,观察胶原纤维排列.对数据行重复测量方差分析、随机区组方差分析、单因素方差分析及Bonferroni检验.结果 (1)分离培养的细胞呈典型的鹅卵石样,细胞表面分布较多微绒毛;细胞CD29、CD90、SSEA3、SSEA4阳性表达率高于50.0％,CD105阳性表达率为8.0％,CD31、CD34和HLA-DR阳性表达率几乎为0;细胞经诱导后可分化为脂肪细胞和成骨细胞.综上,培养细胞鉴定为人羊膜上皮干细胞.(2)人羊膜上皮干细胞来源外泌体为直径50 ～ 150 nm的圆形或椭圆形囊泡.(3)伤后7、21 d,各组创面愈合率相近(P值均大于0.05).伤后14 d,50、100 μg/mL外泌体组创面愈合率分别为(89.8±4.3)％、(92.0±4.6)％,均显著高于对照组的(80.3±6.4)％(P ＜0.05或P ＜0.01);且100 μg/mL外泌体组创面愈合率显著高于25 μg/mL外泌体组[(83.3±5.1)％,P＜0.05].伤后21d,50、100 μg/mL外泌体组创面愈合组织中皮肤附件数量分别为(4.3±1.4)、(5.1±1.6)个,明显多于对照组和25 μg/mL外泌体组的(1.4±0.5)、(1.8±0.6)个(P值均小于0.01);且50、100μg/mL外泌体组创面愈合组织中胶原纤维排列更整齐.结论 人羊膜上皮干细胞来源外泌体能促进大鼠全层皮肤缺损创面的愈合.
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早期新鲜羊膜移植治疗重度眼热烧伤的临床分析
目的 研究早期新鲜羊膜移植术在重度眼热烧伤重建眼表中的临床效果.方法 收集整理急性重度眼热烧伤47例55眼,手术组28例28眼(Ⅲ度10眼,Ⅳ度18眼)早期(伤后3周内)行新鲜羊膜移植术,对照组27例27眼(Ⅲ度19眼,Ⅳ度8眼)予药物治疗,比较两种治疗方法 的眼表重建效果.结果 手术组Ⅲ度10眼术后眼表重建成功;手术组Ⅳ度18眼及对照组24眼丧失正常眼表结构,发生睑球粘连,5眼角膜穿孔,所有眼视力均下降,手术组眼表上皮化时间显著低于对照组(P＜0.05).结论 早期新鲜羊膜移植术可作为重度眼热烧伤后重建眼表的第一步.
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小鼠囊胚在人羊膜上着床行为的超微观察
目的:建立一种较理想的体外着床模型.方法:将妊娠d 4的小鼠囊胚培养在人羊膜的基膜面.结果:发现囊胚能在羊膜上正常脱带、贴附和扩展.光镜观察显示,滋养层细胞对羊膜有侵入,二者在结构上有交错.扫描电镜下,囊胚紧贴于羊膜表面,被无数长短一致、粗细均匀的微绒毛覆盖.透射电镜显示部分滋养层细胞及内细胞团细胞已侵入羊膜之中,滋养层细胞膜下和微绒毛内可见许多小泡样结构.结论:小鼠囊胚在人羊膜上的发育生长可作为研究胚胎着床机理的体外模型.
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药物联合羊膜覆盖术治疗真菌性角膜炎的临床效果
目的 探讨药物联合羊膜覆盖术治疗真菌性角膜炎的临床效果.方法 2006年6月—2013年6月,在我院确诊为真菌性角膜炎的病人97例(98眼),其中单纯药物治疗组53例(53眼),药物联合羊膜覆盖术组44例(45眼).两组均行角膜溃疡清创术并给予那他霉素滴眼液治疗.药物联合羊膜覆盖术组病人在接受上述处理方法基础上,联合应用羊膜覆盖术治疗.比较两组病人治疗效果、平均视力和平均疗程.结果 两组疗效比较,差异有显著性(Uc=2.62,P＜0.05).两组术后平均矫正视力及平均疗程比较,差异有显著性(t=2.07、2.19,P＜0.05).结论 药物联合羊膜覆盖术是治疗真菌性角膜溃疡的有效方法,值得临床推广应用.
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骨髓间充质干细胞载体复合膜修复皮肤缺损的实验研究
目的 探讨应用自体骨髓间充质干细胞的羊膜载体复合膜(羊膜-明胶-壳聚糖膜)植入皮肤全层缺损处对真皮的再生和重建速度的影响.方法 抽取16只新西兰大耳白兔的骨髓间充质干细胞,经体外分离、培养并于其背部脊柱两侧制作两个全层皮肤缺损创面、随机分为两组.治疗组为骨髓间充质干细胞和载体复合膜,对照组单纯为载体复合膜.7、14、21天取材观察结果.采用大体观察、HE染色、Masson染色、Ⅰ型胶原免疫组织化学染色、电镜观察、墨汁灌注法等化学染色动态观察创面愈合情况.结果 治疗组在7、14、21天时新生真皮明显较对照组相应时间点的厚、活跃的Ⅰ型胶原阳性细胞数多、电镜下粗面内质网扩张的成纤维细胞、血管和胶原纤维均较对照组的多.结论 用含骨髓间充质干细胞的载体复合膜修复全层皮肤缺损,能加速真皮的修复和重建.
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羊膜联合角膜缘干细胞移植治疗眼表疾病的研究
目的 探讨羊膜联合角膜缘干细胞移植治疗眼表疾病的临床效果.方法 选择有手术指征的各种眼表疾病病例300例,随机分为治疗组(A 组),对照组(B组),每组150例(150)眼.A组行羊膜联合角膜缘干细胞移植术,B组行自体角膜缘上皮移植术,随访6～24月,观察眼表上皮修复、炎症反应、新生血管、视力等.结果 角膜缘干细胞联合羊膜移植(A组)与自体角膜缘移植(B组)角膜上皮修复时间分别为3.1±0.2d和3.3±0.5d,应用u检验,P＜0.01,认为两组存在统计学差异.A组3例(3眼)复发复发率为2%,B组11例复发复发率为7.33%,经X2检验P＜0.05,组间比较存在统计学差异.结论 用羊膜联合角膜缘干细胞移植是一种有效的治疗眼表疾病的手段.
